崔 誠，史文青

（1.陜西普恩檢測技術(shù)有限公司，陜西西安 710000；2.陜西省農(nóng)村科技開發(fā)中心，陜西西安 710000）

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

丙酮：色譜純，德國默克；活性炭：copure174，深圳逗點生物科技有限公司；甲胺磷標準品：1 000 μg/mL，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

PerkinElmer Clarus 580 型氣相色譜儀：配有FPD 檢測器，珀金埃爾默股份有限公司；RV8 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：德國IKA 公司。

1.3 檢測方法

稱取10 g 樣品，精確至0.001 g，置于錐形瓶中，加入0.2 ～0.4 g 活性炭及80 mL 丙酮，振蕩0.5 h，抽濾。將濾液置于40 ℃水浴中減壓濃縮定容至5 mL，供氣相色譜分析用。

1.4 標準溶液制備

吸取濃度1 000 μg/mL 的甲胺磷標準品1 mL，用丙酮定容至10 mL，配制成濃度為100 μg/mL 的標準儲備液，分別準確吸取不同體積的標準使用液，配制成濃度為0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.2 μg/mL和0.5 μg/mL的標準系列，供氣相色譜測定，繪制標準曲線。

2 建立數(shù)學模型

2.1 含量計算

甲胺磷的含量按下式計算：

式中：ρ為試樣中被測組分含量，mg/kg；ρ1為標準曲線算出質(zhì)量濃度，μg/mL；m為樣品質(zhì)量，g；V1為濃縮體積，mL。

2.2 不確定度分量匯總組成

測定過程的不確定度分量匯總?cè)绫? 所示。

表1 不確定度分量匯總表

3 不確定度分量的量化

3.1 A 類不確定度評估

按照不確定度評估列表，本檢測方法中的A 類不確定度共有兩種，分別是分析方法中的精密度u(p)及樣品濃度中的標準曲線u(c)，按照其影響因素及其計算公式，對本檢測方法進行A 類不確定度評估[1]。

3.1.1 精密度u(p)

根據(jù)GB/T 5009.103—2003 檢測方法，對馬鈴薯中甲胺磷進行檢測，并在基質(zhì)中添加濃度水平為0.01 mg/kg 的標準物質(zhì)，對其進行6 次重復性測試，根據(jù)數(shù)據(jù)及公式計算，其中s(p)為相對標準偏差，m為平行樣品次數(shù)，計算精密度不確定度u(p)=1.37%。測試結(jié)果見表2。

表2 甲胺磷精密度計算表

3.1.2 標準曲線u(c)

用甲胺磷標準工作液配制成0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.2 μg/mL 和0.5 μg/mL 的標準系列，根據(jù)其響應(yīng)值繪制標準曲線，測試結(jié)果見表3。

xi=0.17，標準曲線的擬合方程為y=8 772.76xi-88.02，斜率a=8 772.76，根據(jù)貝塞爾公式[2]，將表3 中數(shù)據(jù)帶入其中計算標準曲線的標準差為標準曲線擬合引入的相對標準不確定度為：

表3 標準曲線的不確定度計算表

式中：s為標準曲線的標準差；c為待測試樣中甲胺磷的含量；為標準曲線濃度的平均值；a為標準曲線的斜率；p為試樣溶液的測定次數(shù)（p=4）；N為標準曲線的標點數(shù)，N=5。

3.2 B 類不確定度評估

本實驗室設(shè)有中央空調(diào)常年溫控，同時實驗室禁止開窗，故忽略環(huán)境溫度及氣壓的影響，其他不確定度來源僅考慮參考物質(zhì)的純度、稀釋過程、稱量過程和測定儀器響應(yīng)中可能的非線性和樣品的不均勻性這些不確定度的分量。

按照不確定度評估列表，本檢測方法中的B 類不確定度共有5 種，分別是分析方法中的準確度u(R)、樣品濃度中的標準品u(std)、體積的量度允差uflask和溫度膨脹utemp及質(zhì)量的天平允差u(m)，按照其影響因素及其計算公式，對本檢測方法進行B 類不確定度評估[3]。

3.2.1 準確度u(R)

根據(jù)GB/T 5009.103—2003 檢測方法，對馬鈴薯中甲胺磷進行檢測，并在基質(zhì)中添加濃度水平為0.01 mg/kg 的標準物質(zhì)，對其進行6 次重復性測試，計算得到其回收率為95.5%～99.0%，平均回收率為97.3%，根據(jù)準確度不確定度公式其中aR為回收率半寬度4.5%，計算不確定結(jié)果u(R)為1.84%。

3.2.2 標準品u(std)

根據(jù)GB/T 5009.103—2003 檢測方法，選用的甲胺磷標準品的不確定度為0.11 μg/mL，根據(jù)標準品計算公式計算，其中a為標準物質(zhì)證書給定的不確定度，k為參考系數(shù)取2，計算不確定度結(jié)果u(std)為0.055，標準品相對不確定度urel(std)為0.06%。

3.2.3 體積的量度允差uflask和溫度膨脹utemp

根據(jù)GB/T 5009.103—2003 檢測方法，對馬鈴薯中甲胺磷進行檢測，量取體積的移液槍和容量瓶的容量誤差服從三角分布[4]。其中，標準溶液儲備液定容體積為10 mL 容量瓶，經(jīng)計量校準后，容量瓶符合A 級標準，其量度允差為±0.02 mL，配制標準溶液儲備液時，采用1 000 μL 移液槍，容量允差為±1 μL，配制標準工作曲線時用移液槍分別移取2 μL、5 μL、10 μL、20 μL 和50 μL 儲備液，容量允差分別為±0.24 μL、±0.4 μL、±0.8 μL、±0.8μL 和±1.5 μL。

溫度膨脹服從矩形分布，計算公式為：

體積的相對合成不確定度計算公式為：

綜上根據(jù)計算公式，體積不確定度測試結(jié)果如表4 所示。

表4 體積不確定度測試計算表

3.2.4 質(zhì)量的天平允差u(m)

根據(jù)GB/T 5009.103—2003 檢測方法，對馬鈴薯中甲胺磷進行檢測，用千分之一的天平稱取樣品，根據(jù)電子天平檢定證書數(shù)據(jù)可知，該天平的最大允許偏差abalance為±0.01 g，按照矩形分布處理，根據(jù)數(shù)據(jù)和公式u(m)=計算得到urel(m)=0.06%。

4 計算合成標準不確定度

分析在對馬鈴薯中甲胺磷的檢測所產(chǎn)生的不確定度因素及其來源，通過分析方法、樣品濃度、體積及質(zhì)量4 方面進行評估，最終計算合成不確定度，其計算公式如下：

式中：u(p)為精密度不確定度；urel(c)為標準曲線相對不確定度；u(R)為準確度的標準不確定度；urel(std)為標準品相對不確定度；urel(v)為體積的相對合成總不確定度；urel(m)為質(zhì)量的相對不確定度。

5 計算擴展不確定度

擴展不確定度U是由合成不確定度乘以包含因子k（也稱范圍因子）得到，并且通過對各個分量的分析，符合正態(tài)分布[5]。選擇具有95%置信水平區(qū)間時，包含因子為2，即k=2（也可通過計算自由度后查t分布臨界值表得到，評定結(jié)果表示見表5。

表5 合成標準不確定度計算表

依據(jù)GB/T 5009.103—2003 檢測方法，在馬鈴薯中甲胺磷的檢測過程中，通過評估各分量的不確定度可知，標準曲線引入的不確定度最大，其次是準確度、精密度和體積的量取，不確定度分量最小的是樣品的稱樣量和標準品濃度。

6 結(jié)論

檢測結(jié)果在要求提供不確定度的情況下，按照上述規(guī)程對加標量為0.025 mg/kg 的樣品進行不確定度評定，檢測結(jié)果為0.023 2 mg/kg，不確定度的報告表示為0.023 2±0.003 1 mg/kg，置信水平區(qū)間為95%，k=2。