亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        血清miR-130a-3p聯(lián)合胰島素樣生長因子1對2型糖尿病患者并發(fā)下肢外周動脈病變的診斷價值▲

        2022-08-08 05:41:30劉春陽王彥輝方多多王雷永
        廣西醫(yī)學(xué) 2022年11期
        關(guān)鍵詞:踝臂試劑盒下肢

        劉春陽 王彥輝 方多多 賈 慧 丁 毅 王雷永

        (1 北京中醫(yī)醫(yī)院順義醫(yī)院瘡瘍血管外科,北京市 101300;2 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京中醫(yī)醫(yī)院瘡瘍血管外科,北京市 100010)

        我國糖尿病患病率為10.4%,下肢外周動脈病變(peripheral artery disease,PAD)是糖尿病常見的、嚴(yán)重的慢性并發(fā)癥。動脈粥樣硬化是下肢PAD的主要病理改變,易造成下肢血管的狹窄與閉塞;下肢PAD的致死率和致殘率均較高,是糖尿病足潰瘍及截肢的獨立危險因素[1-2]。miRNA是一類非編碼RNA分子,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞生長發(fā)育、增殖等多種生理過程,目前已發(fā)現(xiàn)miRNA與多種心血管疾病(如下肢PAD)的發(fā)生有關(guān)[3]。研究表明,miR-130a-3p在冠心病患者血漿中的表達(dá)水平與冠狀動脈粥樣硬化程度呈負(fù)相關(guān),可作為評估冠狀動脈粥樣硬化的潛在生物標(biāo)志物[4]。胰島素樣生長因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)不僅具有調(diào)節(jié)血糖、血脂的作用,還可增加機體對胰島素的敏感性,刺激血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移,在動脈粥樣硬化的形成中發(fā)揮重要作用[5]。研究表明,2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)并發(fā)下肢PAD的患者IGF-1表達(dá)水平升高,IGF-1高表達(dá)是T2DM患者并發(fā)下肢PAD的獨立危險因素[6]。本研究通過檢測T2DM患者血清中miR-130a-3p及IGF-1的表達(dá)情況,探討二者對T2DM并發(fā)下肢PAD的診斷價值。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 選擇2019年10月至2020年12月在北京中醫(yī)醫(yī)院順義醫(yī)院瘡瘍血管外科就診的178例T2DM患者作為研究對象,其中男性96例、女性82例,患者年齡50~79(54.00±8.50)歲。根據(jù)入院時的踝臂指數(shù)[7]判斷患者是否并發(fā)下肢PAD,然后將患者分為單純T2DM組90例(踝臂指數(shù)>0.90)和并發(fā)PAD組88例(踝臂指數(shù)≤0.90)。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合《中國2型糖尿病防治指南(2013版)》[8]中T2DM及糖尿病所致下肢PAD的診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)肝腎功能正常,無其他器質(zhì)性疾病;(3)患者臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)1型糖尿??;(2)合并高血壓、心肌梗死、心力衰竭、腦血管疾病、內(nèi)分泌疾病的患者;(3)近3個月內(nèi)使用糖皮質(zhì)激素治療者;(4)臨床資料不全者。本研究通過該院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn),所有研究對象均簽署知情同意書。

        1.2 主要試劑與儀器 TRIzol提取試劑盒購自Invitrogen公司(批號:15596026);反轉(zhuǎn)錄試劑盒、實時熒光定量PCR試劑盒購自大連寶生物公司(批號:RR036A、RR820A);miR-130a-3p及U6的引物由上海生工生物公司設(shè)計與合成。ABI 7500實時熒光定量PCR儀購自美國Applied Biosystems公司。IGF-1 ELISA試劑盒購自美國Elabscience公司(批號:E-EL-H0086c)。

        1.3 研究方法

        1.3.1 臨床資料的收集:收集所有患者的一般資料及入院時未接受治療前的血清學(xué)指標(biāo)。一般資料包括性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)及病程等。血清學(xué)指標(biāo)包括空腹血糖、糖化血紅蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、餐后2 h血糖(2-hour postprandial blood glucose,2hPBG)、空腹胰島素(fasting insulin,F(xiàn)INS)、三酰甘油、總膽固醇、HDL-C、LDL-C等指標(biāo)。計算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗(homeostasis model-insulin resistance,HOMA-IR)指數(shù),HOMA-IR指數(shù)=空腹血糖×FINS/22.5。

        1.3.2 踝臂指數(shù)的測量:于患者入院時未接受治療前進(jìn)行測量。取仰臥位,采用彩色多普勒血流探測儀(日本林電氣株式會社,型號ES-100V3)測量雙側(cè)前臂肱動脈收縮壓,以最高值為肱動脈壓,然后測量與肱動脈收縮壓同側(cè)的脛后動脈和足背動脈收縮壓,以最高值為踝動脈壓。計算踝臂指數(shù),踝臂指數(shù)=肱動脈壓/踝動脈壓。

        1.3.3 樣品采集及保存:于入院時未治療前,采集患者清晨空腹肘靜脈血5 mL,裝入試管,2 000~3 000 r/min離心10 min,收集上清液,保存于-80 ℃冰箱。

        1.3.4 實時熒光定量PCR檢測血清miR-130a-3p表達(dá)水平:使用TRIzol試劑提取血清中的總RNA,采用NanoDrop 2000c微量分光光度計(Thermo Scientific公司)檢測總RNA的濃度及純度,使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA,采用實時熒光定量PCR檢測各組患者血清miR-130a-3p表達(dá)水平。miR-130a-3p基因和U6基因引物序列見表1。PCR反應(yīng)總體系為20 μL,包括SYBR Premix Ex TaqTMⅡ 10 μL、上下游引物各1 μL、cDNA 2 μL、滅菌蒸餾水6 μL。反應(yīng)條件為95 ℃預(yù)變性30 s;95 ℃、45 s,65 ℃、15 s,72 ℃、15 s,40個循環(huán)。每個樣品設(shè)置3個復(fù)孔。反應(yīng)結(jié)束后,以U6作為內(nèi)參,采用2-ΔΔCt分析法計算miR-130a-3p的相對表達(dá)水平。

        表1 引物序列

        1.3.5 ELISA檢測血清IGF-1表達(dá)水平:采用ELISA試劑盒檢測兩組患者的血清IGF-1表達(dá)水平,嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以(x±s)表示,兩組間比較采用獨立樣本t檢驗;計數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示,組間比較采用χ2檢驗;采用Pearson法分析血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平與踝臂指數(shù)的相關(guān)性;采用Logistic回歸分析影響T2DM患者并發(fā)下肢PAD的危險因素,采用受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線評價血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平對T2DM患者并發(fā)下肢PAD的診斷價值。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié) 果

        2.1 兩組患者臨床資料的比較 兩組患者的空腹血糖、HbA1c、2hPBG、三酰甘油、FINS、HOMA-IR指數(shù)及踝臂指數(shù)比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05);兩組患者的年齡、性別、體質(zhì)指數(shù)、病程、總膽固醇、HDL-C、LDL-C比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。見表2。

        表2 兩組患者臨床資料的比較

        2.2 兩組患者血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平的比較 并發(fā)PAD組患者血清miR-130a-3p表達(dá)水平低于單純T2DM組,IGF-1表達(dá)水平高于單純T2DM組(均P<0.05)。見表3。

        表3 兩組患者血清miR-130a-3p相對表達(dá)水平和IGF-1表達(dá)水平的比較(x±s)

        2.3 并發(fā)下肢PAD患者血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平與踝臂指數(shù)的相關(guān)性 并發(fā)PAD組患者血清miR-130a-3p表達(dá)水平與踝臂指數(shù)呈正相關(guān)性(r=0.405,P<0.001),血清IGF-1表達(dá)水平與踝臂指數(shù)呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.533,P<0.001)。

        2.4 血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平對T2DM患者并發(fā)下肢PAD的診斷價值 血清miR-130a-3p表達(dá)水平診斷T2DM患者并發(fā)下肢PAD的曲線下面積為0.857(95%CI:0.797,0.905;P<0.001),截斷值為0.71時敏感度為82.95%,特異度為85.56%。IGF-1表達(dá)水平診斷T2DM患者并發(fā)下肢PAD的曲線下面積為0.832(95%CI:0.768,0.883;P<0.001),截斷值為162.63 ng/mL時敏感度為84.09%,特異度為75.59%。血清miR-130a-3p與IGF-1表達(dá)水平聯(lián)合診斷T2DM患者并發(fā)下肢PAD的曲線下面積為0.923(95%CI:0.873,0.957;P<0.001),截斷值為0.383時敏感度為89.77%,特異度為84.44%,見圖1。

        圖1 血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平對T2DM患者并發(fā)下肢PAD的診斷價值

        2.5 T2DM患者并發(fā)下肢PAD影響因素的Logistic回歸分析 以T2DM患者是否并發(fā)下肢PAD為因變量(是=1,否=0),以表2及表3中有統(tǒng)計學(xué)意義的指標(biāo)為自變量(根據(jù)ROC曲線的截斷值進(jìn)行賦值:miR-130a-3p表達(dá)水平≤0.71=1,miR-130a-3p表達(dá)水平>0.71=0;IGF-1表達(dá)水平>162.63 ng/mL=1,IGF-1表達(dá)水平≤162.63 ng/mL=0,其余變量以實測值納入),納入Logistic回歸分析。結(jié)果顯示,空腹血糖、HbA1c、三酰甘油水平及IGF-1表達(dá)水平升高,以及miR-130a-3p表達(dá)水平降低是T2DM患者并發(fā)下肢PAD的獨立危險因素(均P<0.05),見表4。

        表4 T2DM患者并發(fā)下肢PAD影響因素的Logistic回歸分析

        3 討 論

        下肢PAD是糖尿病的主要并發(fā)癥之一,動脈粥樣硬化是其主要病理基礎(chǔ),研究表明胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝異常、持續(xù)高血糖、炎癥反應(yīng)等均是下肢PAD發(fā)生的危險因素[9-10]。下肢PAD患者因為下肢缺血,可出現(xiàn)肢體壞疽、截肢等嚴(yán)重不良后果,這嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。因此尋找影響下肢PAD發(fā)生的危險因素,對下肢PAD的預(yù)防和治療具有重要意義。

        研究表明,miRNA在血管重塑、微血管病變、調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能及糖尿病血管病變中均起到重要作用[11]。miR-130a-3p為miRNA的一種類型,在代謝相關(guān)疾病和心血管疾病中發(fā)揮重要的調(diào)控作用[12]。盧翔等[13]的研究表明,過表達(dá)miR-130a可改善T2DM患者外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞的黏附和遷移能力,并可抑制白細(xì)胞介素18、轉(zhuǎn)化生長因子β1的表達(dá)。王曉姣等[14]的研究表明,過表達(dá)的miR-130a-3p可能通過抑制蛋白激酶通路來減輕H9c2心肌細(xì)胞的肥大程度。另有研究表明,miR-130a-3p在血管生成過程中發(fā)揮重要作用,其在神經(jīng)發(fā)育過程中調(diào)控感覺和運動神經(jīng)元中血管內(nèi)皮生長因子受體2的表達(dá)[15]。本研究結(jié)果顯示,與單純T2DM組比較,并發(fā)PAD組患者血清miR-130a-3p表達(dá)水平降低(P<0.05),提示miR-130a-3p表達(dá)水平與下肢PAD的發(fā)生有關(guān)。

        IGF-1是一種胰島素類似物,具有促生長作用。其主要由肝臟合成和分泌,不僅具有調(diào)節(jié)血糖、血脂的作用,還可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的增殖,在動脈粥樣硬化、血管再狹窄等心血管疾病中發(fā)揮重要作用[16-17]。IGF-1可與其受體結(jié)合形成復(fù)合物沉積在血管壁上,促進(jìn)血管細(xì)胞增殖、分化以使得血管中膜增厚,導(dǎo)致血管管腔狹窄,從而引發(fā)微血管病變和大血管病變。Lin等[18]的研究表明,IGF-1可通過激活磷脂?;?-激酶/蛋白激酶信號通路,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞/脂肪干細(xì)胞共培養(yǎng)體系的血管生成,從而促進(jìn)新生血管形成。沈?qū)庩柕萚19]發(fā)現(xiàn),糖尿病腎病患者血清IGF-1表達(dá)水平升高,IGF-1表達(dá)水平與糖尿病腎病患者發(fā)生腎微血管病變有關(guān),是腎微血管病變的危險因素。還有研究表明,高IGF-1表達(dá)水平的肥胖型糖尿病患者的血糖、血脂及左心室射血分?jǐn)?shù)水平均明顯低于低IGF-1表達(dá)水平者,且高IGF-1表達(dá)水平患者胰島素抵抗程度低,表明血清IGF-1表達(dá)水平與糖尿病患者的糖脂代謝和心功能密切相關(guān)[20]。本研究結(jié)果顯示,并發(fā)PAD組患者血清IGF-1表達(dá)水平高于單純T2DM組(P<0.05),這與李倩[6]的研究結(jié)果一致,表明IGF-1表達(dá)水平升高與下肢PAD有關(guān)。

        本研究結(jié)果顯示,并發(fā)PAD組患者血清miR-130a-3p表達(dá)水平與踝臂指數(shù)呈正相關(guān)性,血清IGF-1表達(dá)水平與踝臂指數(shù)呈負(fù)相關(guān)性(均P<0.05),進(jìn)一步證實了血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平與下肢PAD相關(guān)。Logistic回歸分析結(jié)果顯示,血清miR-130a-3p表達(dá)水平降低、IGF-1表達(dá)水平升高是影響T2DM患者并發(fā)下肢PAD的獨立危險因素(均P<0.05),提示miR-130a-3p、IGF-1或許可作為診斷T2DM患者并發(fā)下肢PAD的標(biāo)志物。ROC曲線分析顯示,血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平單獨或聯(lián)合診斷T2DM患者并發(fā)下肢PAD曲線下面積分別為0.857、0.832、0.923,提示血清miR-130a-3p、IGF-1表達(dá)水平對T2DM患者并發(fā)下肢PAD具有一定的診斷價值,二者聯(lián)合應(yīng)用可進(jìn)一步提高診斷效能。

        綜上所述,T2DM并發(fā)下肢PAD的患者血清中miR-130a-3p呈低表達(dá)、IGF-1呈高表達(dá),二者與下肢PAD的發(fā)生密切相關(guān),二者聯(lián)合檢測對T2DM患者并發(fā)下肢PAD具有一定的診斷價值。

        猜你喜歡
        踝臂試劑盒下肢
        中西醫(yī)治療下肢動脈硬化閉塞癥的研究進(jìn)展
        2型糖尿病患者踝臂指數(shù)降低的影響因素及其與短期內(nèi)因缺血性心腦血管事件再住院的關(guān)系▲
        準(zhǔn)媽媽要重視下肢靜脈曲張的預(yù)防
        下肢血管彩超聯(lián)合踝臂指數(shù)對老年下肢血管疾病的價值分析
        GlobalFiler~? PCR擴增試劑盒驗證及其STR遺傳多態(tài)性
        GoldeneyeTM DNA身份鑒定系統(tǒng)25A試劑盒的法醫(yī)學(xué)驗證
        96例缺血性卒中患者踝臂指數(shù)與其相關(guān)危險因素的觀察
        微創(chuàng)旋切術(shù)治療182例下肢靜脈曲張的術(shù)后護(hù)理
        下肢動脈硬化閉塞癥支架術(shù)后再狹窄的治療
        牛結(jié)核病PCR診斷試劑盒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究
        无码人妻专区免费视频| 特黄 做受又硬又粗又大视频| 国产色xx群视频射精| 丰满人妻妇伦又伦精品国产| 三级全黄的视频在线观看| 免费看草逼操爽视频网站| 日本欧美大码a在线观看| 无码人妻丰满熟妇区五十路百度| 欧美日韩区1区2区3区| 狠狠久久av一区二区三区| 久久久久人妻精品一区二区三区 | 一区二区三区不卡在线| 麻豆成年人视频在线观看| 日韩内射美女片在线观看网站| 国产成人啪精品视频免费软件| 亚洲三级香港三级久久| 青青草免费视频一区二区| 中文人妻av久久人妻水蜜桃| 日韩好片一区二区在线看| 香蕉亚洲欧洲在线一区| 亚洲乱妇熟女爽到高潮视频高清 | 国产精品白丝喷水在线观看| 亚洲欧美日韩国产精品一区| 不卡av一区二区在线| 国产美女精品视频线免费播放软件| av无码久久久久久不卡网站| 国产在线AⅤ精品性色| 在线国人免费视频播放| 肉体裸交137日本大胆摄影| 色综合88| 高清国产精品一区二区| 欧美顶级少妇作爱| 久热在线播放中文字幕| 日本经典中文字幕人妻| 国产一区二区三区仙踪林| 无码人妻精品一区二区在线视频| 国产农村三片免费网站| 中文字幕人妻av一区二区| 日日摸天天摸97狠狠婷婷| 久久久窝窝午夜精品| 激情视频在线观看免费播放|