孫鵬鵬，張秀婷，葛 蕾，趙昌軍，李 惠，于 輝

（1. 淄博市食品藥品檢驗(yàn)研究院，山東 淄博 255000；2. 齊魯醫(yī)藥學(xué)院，山東 淄博 255300；3. 山東藥品食品職業(yè)學(xué)院，山東 威海 264200）

克林霉素磷酸酯為化學(xué)半合成的克林霉素衍生物，它本身在體外并無(wú)抗菌活性，主要通過(guò)進(jìn)入體內(nèi)后迅速水解為克林霉素而發(fā)揮作用，故其抗菌譜、抗菌活性及治療效果與克林霉素相同[1-2]。但與克林霉素相比，它的脂溶性及滲透性較好，可用于肌肉注射和靜脈注射，因此克林霉素磷酸酯注射液臨床應(yīng)用廣泛[3]。近年克林霉素磷酸酯的循環(huán)系統(tǒng)臨床不良反應(yīng)時(shí)有報(bào)道，如急性溶血、大汗淋漓、胸悶、心悸、氣短等[4-5]。其中“心臟驟?！钡牟涣挤磻?yīng)已列入美國(guó)和日本上市藥品說(shuō)明書(shū)中。美國(guó)上市藥品說(shuō)明書(shū)中有“靜脈注射過(guò)快時(shí)罕見(jiàn)心跳呼吸驟停和低血壓的報(bào)道”，日本上市藥品說(shuō)明書(shū)中的不良反應(yīng)項(xiàng)記載“心跳停止（頻度不明）：有快速靜脈注射引起心跳停止的報(bào)道”[6]。而我國(guó)批準(zhǔn)的藥品說(shuō)明書(shū)尚未載明克林霉素類藥品影響心臟正常功能的潛在風(fēng)險(xiǎn)，需引起高度關(guān)注。

本研究主要觀察克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠心電圖及血流動(dòng)力學(xué)的影響，為臨床提供相關(guān)的毒理學(xué)數(shù)據(jù)，以期為提高我國(guó)克林霉素磷酸酯的安全性和加強(qiáng)對(duì)克林霉素磷酸酯不良反應(yīng)的評(píng)價(jià)提供思路。.

1 儀器與材料

1.1 儀器

BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 藥品與試劑

克林霉素磷酸酯注射液（山東新華制藥股份有限公司，批號(hào)：1910119）；0.9 %氯化鈉注射液（河北天成藥業(yè)股份有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)環(huán)境

雄性SD大鼠，體重280±l0 g，SPF級(jí)，購(gòu)自濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司[生產(chǎn)許可證編號(hào)：SCXK（魯）20190003]。正常條件喂養(yǎng)，自由進(jìn)食、飲水，飼養(yǎng)于淄博市食品藥品檢驗(yàn)研究院動(dòng)物房大鼠飼養(yǎng)間[使用許可證號(hào)：SYXK（魯）20180005]，溫度20～25 ℃，日溫差≤3 ℃，濕度40 %～70 %，壓強(qiáng)梯度10 Pa以上，換氣次數(shù)10～20次/h，晝夜明暗交替時(shí)間12 h/12 h。

2 方法

2.1 劑量分組與給藥

32只雄性大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、克林霉素磷酸酯低、中、高劑量（50，100，200 mg/kg）組，每組8只。藥物組通過(guò)恒速蠕動(dòng)泵經(jīng)股靜脈給予相應(yīng)藥物溶液，1 ml/kg，10 min內(nèi)給完，空白對(duì)照組給予等容積的氯化鈉注射液，隨后觀測(cè)和記錄給藥結(jié)束后120 min內(nèi)大鼠心電圖和血流動(dòng)力學(xué)變化。

2.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程

實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食6 h，自由飲水，實(shí)驗(yàn)當(dāng)天用10 %水合氯醛腹腔注射（350 mg/kg）麻醉，待大鼠麻醉后仰臥位固定于大鼠手術(shù)臺(tái)上，于頸部腹側(cè)偏右縱向切開(kāi)皮膚，在胸鎖乳突肌內(nèi)側(cè)分離右頸總動(dòng)脈15 cm，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，動(dòng)脈夾夾閉近心端，經(jīng)頸動(dòng)脈向心方向插入充滿0.1 %肝素生理鹽水的靜脈留置針，松緊度應(yīng)以切口處不漏血，導(dǎo)管又能自由進(jìn)出為度?？焖偃〕隽糁冕槂?nèi)芯后與壓力換能器連接，迅速將導(dǎo)管插入左心室內(nèi)，連接BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。然后四肢皮下插入針型電極測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)心電圖。記錄5 min后，通過(guò)恒速蠕動(dòng)泵經(jīng)股靜脈給予相應(yīng)藥物溶液，同時(shí)連續(xù)記錄120 min 的心電圖變化。觀察比較給藥前后心率、心電圖和血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)的變化。

2.3 統(tǒng)計(jì)方法

所有計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。使用 SPSS 11.0版軟件進(jìn)行處理，組間比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01為差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠心電圖的影響

與給藥前相比，中劑量組給藥后前30 min的P-R間期、Q-T間期和QRS間期明顯延長(zhǎng)（P＜0.05）；高劑量組給藥后0～120 min的P-R間期、Q-T間期和QRS間期明顯延長(zhǎng)（P＜0.05）；低劑量組的P-R間期、Q-T間期和QRS間期無(wú)明顯改變。見(jiàn)表1～3。

表1 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠P-R間期的影響（ ±s，n=8）

表1 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠P-R間期的影響（ ±s，n=8）

注：*P＜0.05，**P＜0.01 vs 給藥前

組別 劑量/mg·kg-1 給藥前P-R間期/ms 給藥后P-R間期/ms 15 min 30 min 60 min 120 min空白對(duì)照組 ― 56.17±2.99 55.50±2.51 56.50±3.51 55.33±2.07 56.17±3.37低劑量組 50 53.33±1.21 57.00±3.03 53.33±2.16 52.17±3.87 54.83±2.79中劑量組 100 53.33±3.27 61.00±2.83* 62.50±3.39* 52.17±2.48 53.83±3.60高劑量組 200 51.83±3.19 74.67±5.32** 71.17±3.97** 82.67±2.07** 87.83±2.32**

表2 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠Q-T間期的影響（ ±s，n=8）

表2 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠Q-T間期的影響（ ±s，n=8）

注：**P＜0.01 vs 給藥前

組別 劑量/mg·kg-1 給藥前 Q-T間期/ms 給藥后Q-T間期/ms 15 min 30 min 60 min 120 min空白對(duì)照組 ― 64.33±1.75 65.33±1.37 65.67±2.66 67.00±2.37 66.50±1.38低劑量組 50 64.67±1.51 66.33±5.61 68.00±3.52 68.67±1.75 68.00±2.19中劑量組 100 65.17±1.33 76.17±4.54** 85.83±3.66** 65.00±2.10 68.83±3.43高劑量組 200 64.27±2.25 90.83±2.56** 87.67±2.94** 95.67±10.50** 113.33±2.73**

表3 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠QRS間期的影響（ ±s，n=8）

表3 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠QRS間期的影響（ ±s，n=8）

注：*P＜0.05，**P＜0.01 vs 給藥前

組別 劑量/mg·kg-1 給藥前QRS間期/ms 給藥后QRS間期/ms 15 min 30 min 60 min 120 min空白對(duì)照組 ― 29.33±3.56 30.67±4.72 31.00±4.47 30.83±4.12 30.33±3.67低劑量組 50 30.33±4.13 33.50±2.74 32.00±2.45 33.83±3.60 31.50±2.59中劑量組 100 32.00±3.74 38.00±3.03** 36.67±3.50* 30.83±3.19 35.17±2.48高劑量組 200 32.67±2.66 58.17±2.56** 57.83±4.26** 54.33±6.38** 52.67±5.01**

3.2 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響

4組大鼠心率在給藥前差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與給藥前相比，中劑量組心率給藥后120 min明顯下降（P＜0.01）；高劑量組心率給藥后0～ 120 min內(nèi)明顯下降（P＜0.05）；低劑量組心率與給藥前相比無(wú)明顯改變。中、高劑量組的左室壓力最大上升速率（+dp/dtmax）和左室收縮峰壓（LVSP）分別在給藥后60～120 min和0～120 min明顯下降（P＜0.01）。中、高劑量組的心室收縮開(kāi)始至室內(nèi)壓變化速率達(dá)最大值的時(shí)間（t-dp/dtmax）分別在給藥后30～120 min和60～120 min明顯增加（P＜0.01或P＜0.05）。低劑量組的心率、+dp/dtmax、LVSP和t-dp/dtmax與對(duì)照組相比無(wú)明顯改變。見(jiàn)表5。

表4 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠心率的影響（ ±s，n=8）

表4 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠心率的影響（ ±s，n=8）

注：**P＜0.01 vs 給藥前

給藥后心率/次·min-1 15 min 30 min 60 min 120 min空白對(duì)照組 ― 406±55 408±45 407±50 409±53 403±47低劑量組 50 415±41 406±55 428±46 413±47 410±53中劑量組 100 394±36 370±44 368±44 361±40 325±17**高劑量組 200 401±23 291±55** 282±56** 265±51** 247±47**組別 劑量/mg·kg-1 給藥前心率/次·min-1

表5 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響（ ±s，n=8）

表5 克林霉素磷酸酯注射液對(duì)大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響（ ±s，n=8）

注：*P＜0.05，**P＜0.01 vs 給藥前

組別 劑量/mg·kg-1 時(shí)間/min +dp/dtmax/mmHg·s-1 LVSP/mmHg t-dp/dtmax/ms空白對(duì)照組 ― ― 3686.56±331.04 105.03±4.10 50±12低劑量組 50 15 3411.78±299.69 99.15±5.10 48±10 30 3357.85±328.01 100.14±4.02 59±13 60 3252.73±369.68 99.76±2.40 64±12 120 3070.13±356.56 103.77±2.75 65±12中劑量組 100 15 3595.76±412.44 86.17±3.20** 52±13 30 3240.68±494.97 87.83±3.40** 56±12 60 2694.73±264.60** 87.72±3.57** 67±6*120 2428.83±301.68** 91.59±4.41** 70±5**高劑量組 200 15 3827.99±314.48 82.64±2.69** 39±8 30 3180.37±311.29 81.15±1.75** 75±12**60 2597.91±382.23** 78.41±0.58** 85±7**120 2317.09±522.17** 76.30±1.84** 85±14**

4 討論

克林霉素磷酸酯注射液作為國(guó)家基本藥物之一，具有血藥濃度高、生物利用度好、起效快、抗菌作用強(qiáng)、穩(wěn)定性高、無(wú)需做皮膚試驗(yàn)等特點(diǎn)，其臨床常見(jiàn)的不良反應(yīng)多為胃腸道反應(yīng)，如惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉等，可發(fā)生假膜性腸炎[7]。據(jù)報(bào)道稱有患者在注射使用克林霉素后，會(huì)對(duì)心血管系統(tǒng)造成不良反應(yīng)，主要臨床特征表現(xiàn)為心臟的室顫、室性早搏等[8]。另有報(bào)道稱有患者在使用注射用鹽酸克林霉素過(guò)程中出現(xiàn)心跳驟停[9]。本研究主要觀察克林霉素磷酸酯注射液對(duì)心臟的急性毒副作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠靜脈注入克林霉素磷酸酯注射液中劑量（100 mg/kg）和高劑量（200 mg/kg）后對(duì)心臟的興奮性、自律性均有一定影響。股靜脈恒速給藥后大鼠的心率減慢，同時(shí)使心電圖的P-R間期、Q-T間期和QRS間期明顯延長(zhǎng)，并呈現(xiàn)一定的時(shí)-效和量-效關(guān)系。提示克林霉素磷酸酯可減慢房室傳導(dǎo)，使心室復(fù)極化和心室的除極化過(guò)程減慢。對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的主要影響是對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的影響，主要表現(xiàn)在中劑量組和高劑量組的+dp/dtmax和LVSP給藥后明顯下降，t-dp/dtmax在給藥后明顯增加。這表明中劑量和高劑量組有明顯的心肌收縮性能下降的表現(xiàn)?？肆置顾亓姿狨ナ前牒铣傻目肆置顾匮苌?，進(jìn)入機(jī)體后迅速水解為克林霉素并顯示其藥理活性?？肆置顾厥橇挚擅顾氐难苌铮挚擅顾鼐哂猩窠?jīng)阻滯作用，因此克林霉素可能也具有神經(jīng)肌肉阻滯作用，尤其與其他藥物，如麻醉藥、鎮(zhèn)痛藥等神經(jīng)系統(tǒng)抑制類藥物聯(lián)合使用時(shí)，會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)抑制作用加強(qiáng)效果，可能會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)呼吸衰竭、心臟驟停等不良反應(yīng)[10]。通過(guò)上述研究認(rèn)為中、高劑量克林霉素磷酸酯可能會(huì)引起一定的心臟毒副作用。

中劑量（100 mg/kg）和高劑量（200 mg/kg）換算為人的劑量分別為32.4 mg/kg和64.8 mg/kg，大于克林霉素磷酸酯注射液人體推薦劑量，表明克林霉素磷酸酯注射液在臨床使用劑量下不會(huì)對(duì)心臟功能產(chǎn)生明顯影響，但臨床用藥時(shí)醫(yī)務(wù)人員應(yīng)嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)要求用藥，避免超劑量及快速滴注，并注意監(jiān)測(cè)可能出現(xiàn)的心率減慢甚至心律失常等不良反應(yīng)，從而避免心臟因心臟搏動(dòng)能力下降而導(dǎo)致低血壓癥狀，甚至出現(xiàn)休克或心臟驟停等嚴(yán)重不良反應(yīng)。