李錫萱，譚婧萱，李琳杰，翟學(xué)佳，呂永寧

(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院藥學(xué)部，武漢 430022)

卒中是全球第二大致死原因，且卒中患者的預(yù)后較差，有80%會出現(xiàn)永久性殘疾[1]。根據(jù)腦生理及血流變化的差異，卒中大致能夠分為兩大類型：因腦內(nèi)血管破裂引起的出血性卒中(intracerebral hemorrhage，ICH)以及因腦內(nèi)動脈阻塞引起的缺血性卒中(ischemic stroke，IS)，其中缺血性卒中占比85%～87%[2-3]。缺血性卒中的基本成因是流向腦實質(zhì)的血流因大動脈粥樣硬化、小血管閉塞或心肌梗死等發(fā)生中斷，從而造成腦局部的氧氣及能量供應(yīng)中斷[4]。缺血性卒中發(fā)生后，腦組織的缺血缺氧往往造成興奮性毒性、氧化應(yīng)激、蛋白質(zhì)錯誤折疊、神經(jīng)炎癥、細(xì)胞死亡及血腦屏障破壞等一系列腦損傷事件[5-8]。其中，細(xì)胞死亡事件不僅造成了缺血性卒中后神經(jīng)細(xì)胞的損失，也會造成腦小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞的丟失，直接導(dǎo)致了大腦損傷，使卒中患者的恢復(fù)變得十分困難，造成終身殘疾[9]。

細(xì)胞的死亡包括細(xì)胞凋亡、自噬依賴性細(xì)胞死亡、細(xì)胞壞死等，許多研究表明這些過程密切地影響著缺血性卒中的預(yù)后[10-11]。近年來，研究表明一種與炎癥密切相關(guān)的新型細(xì)胞程序性死亡方式——細(xì)胞焦亡能夠引發(fā)缺血后的炎癥反應(yīng)，加重腦組織的損傷[12]。細(xì)胞焦亡為闡明缺血性卒中的機(jī)制提供了新的途徑，抑制細(xì)胞焦亡過程也成為了缺血性卒中治療的新方向。本文將闡釋細(xì)胞焦亡與缺血性卒中機(jī)制的關(guān)聯(lián)，并對與細(xì)胞焦亡相關(guān)治療靶點及藥物研究進(jìn)行綜述。

1 細(xì)胞焦亡與凋亡的異同

細(xì)胞焦亡(pyroptosis)于2001年被首次提出，最初用來描述被沙門菌或志賀菌感染的巨噬細(xì)胞中發(fā)生的半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)依賴性細(xì)胞程序性死亡過程[13]。雖然細(xì)胞焦亡過程也會出現(xiàn)DNA損傷及染色質(zhì)濃縮的現(xiàn)象，但與最早被提出的程序性細(xì)胞死亡過程——細(xì)胞凋亡(apoptosis)相比，它在發(fā)生機(jī)制及細(xì)胞形態(tài)都有很大的不同。

在機(jī)制方面，參與細(xì)胞凋亡過程的半胱氨酸蛋白酶(caspase)主要是caspase-3、caspase-8、caspase-6；而細(xì)胞焦亡在最初被定義為caspase-1依賴性的過程，后來的研究中發(fā)現(xiàn)caspase-11/4/5、caspase-3、caspase-8也參與到了細(xì)胞焦亡的非經(jīng)典途徑中[14]。此外，細(xì)胞焦亡又在2015年的一項研究中被稱為gasdermin蛋白介導(dǎo)的程序性死亡[15]，說明gasdermin蛋白家族，尤其是gasdermin D(GSDMD)在焦亡中是必需的，發(fā)揮了執(zhí)行者作用。它能夠被caspase-1及caspase-11/4/5特異性切割為C-末端(C-GSDMD)和N-末端(N-GSDMD)裂解片段，隨后N-GSDMD穿透細(xì)胞膜使其形成孔隙，導(dǎo)致細(xì)胞膜的穿孔，釋放細(xì)胞內(nèi)的促炎內(nèi)容物[16]；而細(xì)胞凋亡時，細(xì)胞不會破裂及釋放炎癥因子，而是進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)容物的包裝及凋亡小體的非炎性吞噬攝取過程[17]?？偟膩碚f，細(xì)胞焦亡是一種炎癥性的細(xì)胞反應(yīng)，這一過程一般在細(xì)胞感應(yīng)到潛在的損傷事件時發(fā)生，包括病原體相關(guān)的分子模式(pathogen-associated molecular patterns，PAMPs)、損傷相關(guān)分子模式(damage associated molecular patterns，DAMPs)、代謝水平改變以及環(huán)境刺激等[18]。

2 細(xì)胞焦亡發(fā)生的機(jī)制

2.1經(jīng)典途徑 細(xì)胞焦亡的經(jīng)典途徑是由caspase-1介導(dǎo)的炎癥小體途徑，能夠由微生物或非微生物刺激激活，是先天免疫的重要組成部分[19]。細(xì)胞焦亡的經(jīng)典途徑是由炎癥小體介導(dǎo)的。它們是一系列結(jié)構(gòu)相似的大型多蛋白復(fù)合物的總稱，較典型的炎癥小體如NLRP1、NLRP3、NLRC4、AIM2一般都包含三部分：①細(xì)胞溶質(zhì)模式識別受體(pattern recognition receptors，PRRs)，如NOD樣受體(NLRs)及AIM2(ALR member absent in melanoma 2)樣受體(ALRs)；②含有半胱天冬酶募集結(jié)構(gòu)域(caspase recruitment domain，CARD)的凋亡相關(guān)斑點樣蛋白(apoptosis-associated speck-like protein，ASC)；③caspase-1前體(pro-caspase-1)[20]。炎癥小體中不同的PRRs能夠識別相應(yīng)的PAMPs或DAMPs后激活，在經(jīng)歷寡聚化后與激活的ASC及pro-caspase-1一同組裝成為炎癥小體[21-22]。炎癥小體激活后被作為半胱氨酸蛋白酶caspase-1的激活平臺，將caspase-1的前體裂解形成激活的二聚體形式。激活的caspase-1隨后對gasdermin家族效應(yīng)蛋白GSDMD進(jìn)行切割[23]。GSDMD由N-端及C-端結(jié)構(gòu)域組成，C端-結(jié)構(gòu)域在分子中起到內(nèi)在抑制劑的作用。一旦C-端結(jié)構(gòu)域被切割，剩下的N-端結(jié)構(gòu)域就會被激活釋放，自由寡聚化并插入質(zhì)膜中，形成10～14 nm的孔隙，導(dǎo)致細(xì)胞滲透壓平衡的喪失，導(dǎo)致細(xì)胞焦亡[24]。此外，caspase-1還能使促炎因子白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)及白細(xì)胞介素-18(IL-18)的前體(pro- IL-1β和pro- IL-18)裂解成熟后通過GSDMD形成的孔隙釋放到胞外，加重炎癥反應(yīng)[25](圖1)。

Canonical pathway:經(jīng)典途徑；Non-canonical pathway：非經(jīng)典途徑；DAMPs(damage associated molecular patterns)：損傷相關(guān)分子模式；PAMPs(pathogen-associated molecular patterns)：病原體相關(guān)的分子模式；LPS(Lipopolysaccharide):細(xì)菌內(nèi)脂多糖；Death stimulation signal：死亡刺激信號；inflammasome：炎癥小體；pro-caspase-1：半胱氨酸蛋白酶-1前體；pro-caspase-11：半胱氨酸蛋白酶-11前體；pro-caspase-3：半胱氨酸蛋白酶-3前體；caspase-11：半胱氨酸蛋白酶-11；caspase-3：半胱氨酸蛋白酶-3；caspase-1：半胱氨酸蛋白酶-1；pro-IL-18：白細(xì)胞介素-18前體；pro-IL-1β：白細(xì)胞介素-1β前體；IL-18：白細(xì)胞介素-18；IL-1β：白細(xì)胞介素-1β；GSDMD：Gasdermin D；GSDME：Gasdermin E。圖1 細(xì)胞焦亡發(fā)生的途徑 Fig.1 Pathways of pyroptosis

2.2非經(jīng)典途徑 焦亡的非經(jīng)典途徑主要是由caspase-11(在人類中為caspase-4/5)介導(dǎo)的，它與caspase-1同屬于促炎caspase家族，具有相似的結(jié)構(gòu)，但序列之間存在差異。這意味著它們在細(xì)胞焦亡的過程中通過不同的途徑發(fā)揮著相似的作用。Caspase-11能夠?qū)-尾端的CARD直接與革蘭陰性菌細(xì)菌內(nèi)脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)結(jié)合，從而變?yōu)榧せ顟B(tài)，隨后切割裂解GSDMD生成N-GSDMD，最終形成質(zhì)膜孔隙[26]。但與caspase-1不同的是，caspase-11無法直接裂解pro- IL-1β和pro- IL-18，它通過將GSDMD裂解后間接地激活NLRP3炎癥小體啟動NLRP3/caspase-1途徑來介導(dǎo)IL-1β和IL-18的成熟與分泌[27](圖1)。此外，過去認(rèn)為凋亡相關(guān)的半胱氨酸蛋白酶caspase-3、caspase-8無法刺激gasdermin家族蛋白誘導(dǎo)焦亡。但近年發(fā)現(xiàn)腫瘤化療藥物能夠作為死亡刺激信號誘導(dǎo)caspase-3 裂解gasdermin家族的另一種蛋白gasdermin E(GSDME)，形成N-GSDME，釋放IL-1β，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的焦亡，這一發(fā)現(xiàn)為化療對癌癥的作用機(jī)制提供了全新的思路[28]。并且在對乳腺癌相關(guān)的研究中也發(fā)現(xiàn)化療藥物如PD-L1能夠誘導(dǎo)caspase-8將乳腺癌細(xì)胞的凋亡轉(zhuǎn)化為GSDME依賴性焦亡[29]。此外，也有研究表明耶爾森氏菌感染能夠誘導(dǎo)小鼠巨噬細(xì)胞中caspase-8相關(guān)的GSDMD裂解[30]。

3 缺血性卒中與焦亡的關(guān)系

大腦的缺血會造成腦組織的缺氧及葡萄糖供應(yīng)不足，從而造成包括神經(jīng)元死亡、腦水腫、血腦屏障損傷、神經(jīng)功能障礙等一系列腦損傷事件[31]。從缺血性卒中發(fā)作的幾分鐘內(nèi)，乃至后幾天內(nèi)的急性期，甚至幾個月的損傷恢復(fù)期，都伴隨著神經(jīng)炎癥的發(fā)生。腦損傷導(dǎo)致炎癥因子的分泌，而炎癥因子又反過來激活神經(jīng)系統(tǒng)的常駐免疫細(xì)胞——小膠質(zhì)細(xì)胞，并募集外周免疫細(xì)胞，加重神經(jīng)炎癥反應(yīng)[32]。在缺血性卒中發(fā)作后損傷或死亡的細(xì)胞還會釋放包括高遷移率族蛋白B1(HMGB1)、腺苷三磷酸(ATP)及熱休克蛋白等內(nèi)源性物質(zhì)的DAMPs，隨后激活存在于先天免疫細(xì)胞表面或內(nèi)部的PRRs，NLRs及Toll樣受體(TLRs)等[33]。一些PRRs的激活使炎癥小體在胞漿形成，誘導(dǎo)半胱氨酸蛋白酶如上述的caspase-1、-4/5/11活化后使炎癥因子IL-1β和IL-18成熟，并通過激活GSDMD蛋白形成細(xì)胞膜孔，使炎癥因子釋放，由此造成細(xì)胞的焦亡[34]。

由于介導(dǎo)焦亡炎癥小體組成部分之一——PRRs主要表達(dá)在小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞等免疫細(xì)胞上介導(dǎo)先天免疫反應(yīng)，故在缺血性腦卒中后引起的細(xì)胞焦亡也主要發(fā)生在小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞中[35-36]。一項研究表明在腦缺血/再灌注的小鼠模型中出現(xiàn)里顯著的小膠質(zhì)細(xì)胞焦亡，而焦亡關(guān)鍵執(zhí)行蛋白GSDMD基因的敲除導(dǎo)致小膠質(zhì)細(xì)胞焦亡程度顯著降低并降低了全腦的神經(jīng)炎癥水平，預(yù)示了小膠質(zhì)細(xì)胞在腦缺血后焦亡及炎癥中的重要作用[37]。除小膠質(zhì)細(xì)胞外，以往研究MCAO體內(nèi)模型及OGD體外模型中都證實了星形膠質(zhì)細(xì)胞中細(xì)胞焦亡的程度顯著增強(qiáng)；并且有報道表明星形膠質(zhì)細(xì)胞中的細(xì)胞焦亡嚴(yán)重?fù)p害了血腦屏障的完整性并對星形膠質(zhì)末端淋巴系統(tǒng)中水通道蛋白-4(aquaporin-4，AQP-4)介導(dǎo)的腦內(nèi)Aβ-(amyloid-beta peptide，Aβ)的清除過程產(chǎn)生不良影響，從而使缺血后腦內(nèi)穩(wěn)態(tài)失衡，并容易造成卒中后的癡呆[38]。

許多研究中都說明了細(xì)胞焦亡過程與缺血性卒中的密切聯(lián)系。炎癥小體作為焦亡通路中的關(guān)鍵蛋白，密切參與了細(xì)胞焦亡啟動及神經(jīng)炎癥發(fā)生過程，POH等[39]在小鼠大腦中動脈閉塞/再灌注(MCAO/R)模型中檢測了NLRP1、NLRP3、NLRC4、AIM2四種典型炎癥小體的狀態(tài)及相關(guān)炎性組分的表達(dá)，并且在BV2小膠質(zhì)細(xì)胞體外缺氧缺糖(OGD)模型敲除BV2細(xì)胞中的NLRC4基因或使用caspase-1、caspase-8的抑制劑對小膠質(zhì)細(xì)胞凋亡及焦亡的情況進(jìn)行了進(jìn)一步驗證，結(jié)果顯示小膠質(zhì)細(xì)胞中炎癥小體及其相關(guān)炎癥組分如IL-1β及IL-18表達(dá)顯著上升，而NLRC4基因的敲除及caspase-1、caspase-8抑制劑的干預(yù)能夠抑制炎性組分的活化，防止小膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡及焦亡；此外，神經(jīng)炎癥的重要調(diào)節(jié)分子——在髓細(xì)胞上表達(dá)的觸發(fā)受體(TREM)-1能夠通過與脾酪氨酸激酶(SYK)相互作用而激活促炎通路CARD9/NF-κB和NLRP3/caspase-1，并上調(diào)小膠質(zhì)細(xì)胞中GSDMD、GSDMD-N的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞膜孔形成并釋放炎癥因子，從而導(dǎo)致小膠質(zhì)細(xì)胞的焦亡[40]。除了對小膠質(zhì)細(xì)胞焦亡的研究外，在針對MCAO大鼠及神經(jīng)細(xì)胞OGD模型的實驗中發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼RNA母源表達(dá)基因-3(MEG3)，miR-485及AIM2炎癥小體的互作通路通過激活caspase-1介導(dǎo)了腦缺血后的神經(jīng)元細(xì)胞焦亡[41]。這些研究說明通過靶向細(xì)胞焦亡的各關(guān)鍵分子來治療缺血性卒中可能是一個十分可行的策略。

4 細(xì)胞焦亡過程作為潛在的缺血性卒中治療靶點

在目前的臨床實踐中，早期溶栓及動脈取栓被認(rèn)為是治療缺血性卒中最有效的方法，但大部分患者因錯過時間窗或合并禁忌證而失去早期治療機(jī)會，故目前臨床對缺血性卒中仍主要以抗血小板聚集、抗凝、神經(jīng)營養(yǎng)、神經(jīng)保護(hù)劑等藥物治療為主[42-43]。由于細(xì)胞焦亡在缺血性卒中中扮演了重要的角色，這使得細(xì)胞焦亡相關(guān)的各個關(guān)鍵節(jié)點成為了潛在的缺血性卒中治療靶點。

4.1靶向炎癥小體 炎癥小體是細(xì)胞焦亡經(jīng)典途徑啟動的關(guān)鍵復(fù)合物。大量的文獻(xiàn)顯示很多藥物能夠通過干預(yù)炎癥小體而對缺血性卒中產(chǎn)生治療作用。例如，一種新型化合物JLX001能夠縮小MCAO大鼠的腦梗死面積，改善缺血性腦損傷，并抑制NLRP3炎癥小體相關(guān)蛋白的表達(dá)，使促炎細(xì)胞因子IL-1β水平降低，并增加抗炎表型小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量[44]。生姜中提取的一種天然產(chǎn)物6-姜酚被證明能夠通過顯著降低NLRP3炎癥小體介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥水平和神經(jīng)元凋亡，并上調(diào)自噬，從而減輕腦缺血/再灌注后造成的損傷[45]。隨著研究的深入，研究者們發(fā)現(xiàn)一些傳統(tǒng)藥物也能夠通過抑制炎癥小體介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡過程產(chǎn)生療效。注射用丹酚酸已被我國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)用于臨床缺血性卒中的治療，MA等[46]的研究表明其能夠通過促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞促炎M1表型向抗炎M2表型轉(zhuǎn)換及抑制NLRP3炎癥小體/細(xì)胞焦亡軸發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。此外，SHE等[47]的研究表明補(bǔ)陽還五湯的主要藥效成分黃芪總皂苷能夠顯著改善MCAO大鼠的神經(jīng)功能障礙及神經(jīng)元損傷，并顯著抑制NLRP3/caspase-1介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡經(jīng)典途徑。人參皂苷Rd及當(dāng)歸提取物Z-藁本內(nèi)酯合用能夠顯著抑制BV2小膠質(zhì)細(xì)胞體外OGD模型的NLRP3炎癥小體激活及細(xì)胞焦亡過程[48]。上述研究都證明了靶向炎癥小體-細(xì)胞焦亡過程能夠有效地改善神經(jīng)炎癥及缺血性腦損傷，具有很大的治療潛力。

4.2靶向半胱氨酸蛋白酶caspase 半胱氨酸蛋白酶caspase家族是細(xì)胞死亡與炎癥反應(yīng)的重要參與者，它在以往的研究中已經(jīng)成為缺血性卒中的治療靶點，研究較多的主要是caspase-3/8、caspase-9及caspase-12。缺血性卒中的神經(jīng)保護(hù)劑丁苯酞及依達(dá)拉奉在臨床上應(yīng)用廣泛，它們的聯(lián)用能夠通過降低細(xì)胞損傷及caspase-3介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，增加神經(jīng)元和血管內(nèi)皮細(xì)胞的數(shù)量，減少星形膠質(zhì)細(xì)胞的形成，從而減少MCAO小鼠的腦梗死體積和神經(jīng)功能缺損，發(fā)揮多靶點作用[49]。另一項研究表明葡萄籽原花青素能夠通過抑制caspase-12減輕MCAO小鼠缺血后誘發(fā)的細(xì)胞凋亡，具有治療缺血性卒中的潛力[50]。我國的名方片仔癀也被報道能夠顯著降低caspase-3和caspase-9的表達(dá)，減輕神經(jīng)元凋亡及缺血后的神經(jīng)炎癥[51]。近年來，許多更進(jìn)一步的研究將caspase家族與細(xì)胞焦亡聯(lián)系起來，其中caspase-1及caspase-11分別介導(dǎo)了細(xì)胞焦亡的經(jīng)典與非經(jīng)典途徑。已有報道在小鼠腦缺血模型中證明了caspase-1的藥理抑制劑Vx765能夠通過下調(diào) caspase-1的表達(dá)顯著降低細(xì)胞焦亡過程中各關(guān)鍵分子的激活水平，并顯著縮小腦梗死體積，恢復(fù)模型小鼠的認(rèn)知與行為功能[52]。經(jīng)典的抗癲癇及抗躁郁藥物丙戊酸也被研究證實其通過調(diào)節(jié)半胱氨酸蛋白酶補(bǔ)充域[32]/caspase-1/IL-18，IL-1β途徑抑制神經(jīng)細(xì)胞的焦亡，產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用[53]。此外，通心絡(luò)被證實能夠下調(diào)caspase-11及caspase-1，緩解MCAO大鼠缺血腦組織星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞焦亡，并減少細(xì)胞周圍Aβ的積聚，對腦組織產(chǎn)生保護(hù)作用。

4.3靶向執(zhí)行蛋白GSDMD gasdermin家族蛋白，特別是GSDMD在細(xì)胞焦亡過程中扮演著執(zhí)行者的重要作用，它能夠在裂解后使細(xì)胞穿孔，以釋放胞漿中的炎性介質(zhì)。WANG等[37]研究發(fā)現(xiàn)，將MCAO小鼠的GSDMD 基因敲除后能夠有效抑制小鼠腦中小膠質(zhì)細(xì)胞IL-1β及IL-18的分泌，抑制缺血區(qū)周圍細(xì)胞焦亡，改善損傷的神經(jīng)功能，說明下調(diào)GSDMD的表達(dá)可能稱為缺血性卒中治療的潛在策略。中藥石斛中提取的有效成分之一石斛生物堿被報道具有抗氧化、抗炎及抗真菌活性，一項研究表明石斛生物堿在體內(nèi)及體外缺血模型中均能夠通過降低焦亡相關(guān)蛋白Caspase-1和GSDMD的表達(dá)，并下調(diào)炎癥因子IL-1β、IL-6和IL-18，從而抑制細(xì)胞焦亡及神經(jīng)炎癥反應(yīng)，發(fā)揮腦保護(hù)作用[54]。中藥姜黃中最主要的有效成分姜黃素被報道能夠通過抑制線粒體凋亡和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激以及刺激神經(jīng)發(fā)生而對腦產(chǎn)生保護(hù)作用，RAN等[55]研究進(jìn)一步表明姜黃素能夠顯著改善MCAO小鼠卒中后的腦白質(zhì)損傷，并顯著降低腦中caspase-1、GSDMD陽性的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量，有效抑制細(xì)胞的焦亡。LI等[56]的研究基于大鼠MCAO/R模型及PC12細(xì)胞的體外OGD模型探究了臨床一線用藥阿司匹林、吲哚布芬分別與氯吡格雷、替卡雷洛聯(lián)用對缺血性腦損傷的保護(hù)作用，結(jié)果表明兩類抗血小板藥聯(lián)用時能夠比單藥更顯著地改善模型組的缺血損傷狀態(tài)，并通過干預(yù) NF-κB/NLRP3信號通路，顯著降低NLRP3，Caspase-1，IL-18，IL-1β及GSDMD的表達(dá)，抑制神經(jīng)炎癥與細(xì)胞焦亡相關(guān)因子的水平，為傳統(tǒng)的缺血性卒中用藥方案增添了全新的機(jī)制闡釋[57]。雖然目前為止還沒有特定的GSDMD抑制劑用于治療缺血性卒中，但越來越多的實驗研究表明GSDMD十分有希望成為未來缺血性卒中的治療靶點。

5 結(jié)束語

目前對于缺血性卒中的研究大多集中于興奮性毒性、氧化應(yīng)激及神經(jīng)炎癥等領(lǐng)域；對于腦缺血后細(xì)胞死亡的研究也大多聚焦于細(xì)胞凋亡、壞死及自噬過程。現(xiàn)行治療缺血性卒中的首選臨床療法仍是采用靜脈溶栓、機(jī)械取栓或使用抗血小板藥物等方法恢復(fù)腦血流；雖然對于缺血性卒中的發(fā)生和進(jìn)展機(jī)制已有較為深入和廣泛的研究，但作用于上述機(jī)制的特異性藥物轉(zhuǎn)化進(jìn)入臨床實踐的比例卻并不樂觀，其主要原因是缺血性卒中的發(fā)生涉及到神經(jīng)、免疫等多個系統(tǒng)的相互作用，針對某一特定通路或蛋白的藥物其靶向性不足，易產(chǎn)生其他系統(tǒng)的非特異性結(jié)合而導(dǎo)致廣泛的不良反應(yīng)；同時由于缺血性卒中的發(fā)生及進(jìn)展是全身多個系統(tǒng)共同作用的復(fù)雜結(jié)果，針對單一通路或蛋白的藥物難以全面的糾正多系統(tǒng)的損傷與紊亂；此外，一些藥物在動物及細(xì)胞實驗上缺少穩(wěn)定的效果，實驗的可重復(fù)性不強(qiáng)，這增大了其從臨床前實驗轉(zhuǎn)化至臨床階段的難度。

細(xì)胞焦亡最初于感染性疾病的進(jìn)程中被發(fā)現(xiàn)，后在其他與炎癥相關(guān)的非感染性疾病中也證實了細(xì)胞焦亡過程的關(guān)鍵作用，它作為與炎癥密切相關(guān)的細(xì)胞程序性死亡方式成為了溝通細(xì)胞死亡及免疫炎癥途徑的一座橋梁，為缺血性卒中這樣同時存在器質(zhì)性損傷及免疫激活反應(yīng)的疾病提供了新的潛在治療思路。缺血性卒中的疾病發(fā)展過程中，細(xì)胞焦亡一方面造成了腦內(nèi)神經(jīng)元及免疫細(xì)胞的丟失，引起神經(jīng)缺損及大腦功能的損害；另一方面，焦亡過程最終導(dǎo)致胞內(nèi)炎癥因子的釋放，使腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞及星形膠質(zhì)細(xì)胞不斷激活，并且造成外周免疫細(xì)胞在腦中的浸潤，加重炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步對大腦造成損傷，形成惡性循環(huán)。所以，靶向細(xì)胞焦亡通路中的關(guān)鍵蛋白可能在減少腦部實質(zhì)損傷的同時降低腦內(nèi)炎癥水平，改善缺血性卒中后造成的神經(jīng)損傷。總之，細(xì)胞焦亡作為一種新型細(xì)胞死亡方式，可能作為治療缺血性卒中的潛在靶點。

然而，細(xì)胞焦亡的相關(guān)研究仍處于實驗室階段，并且缺少相關(guān)通路蛋白的特異性抑制劑用于進(jìn)一步的機(jī)制研究。此外，細(xì)胞焦亡與缺血性卒中其他機(jī)制之間的關(guān)系仍未完全闡明，需要更多的研究將細(xì)胞焦亡與傳統(tǒng)的作用通路聯(lián)系起來，以期開發(fā)出多通路、多靶點的缺血性卒中新療法，達(dá)到提高治愈率，改善預(yù)后的效果。