莊肇朦，陳 怡，余炳取，張益光

(浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬溫州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院消化內(nèi)科，浙江溫州 325000)

結(jié)直腸腺瘤是結(jié)直腸癌患者最重要的癌前病變，結(jié)直腸腺瘤相關(guān)危險(xiǎn)因子的研究、早期診斷和早期治療對(duì)降低結(jié)直腸癌患者死亡風(fēng)險(xiǎn)具有重要意義[1]。幽門螺桿菌(helicobacter pylori，Hp)主要存在于胃黏膜，與胃潰瘍、慢性胃炎、胃癌均密切相關(guān)[2]。Hp分為Ⅰ型高毒力株和Ⅱ型低毒力株，高毒力株表達(dá)空泡毒素A(vacuolating cytotoxin A，VacA)和細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(cytotoxin associated gene，CagA)，高毒力Hp對(duì)各種胃部疾病的危害尤其嚴(yán)重[3]。近年來，有研究表明，Hp感染有可能通過胃泌素血癥及其他作用機(jī)制對(duì)結(jié)直腸腺瘤患者產(chǎn)生誘發(fā)效果[4]。胃泌素主要由胃竇及十二指腸近端黏膜中的細(xì)胞分泌，可促進(jìn)胃竇收縮、消化道黏膜再生、胃酸分泌等[5]。胃動(dòng)素由小腸中的細(xì)胞分泌，可刺激上消化道生理性肌電活動(dòng)和機(jī)械運(yùn)動(dòng)[6]。有研究表明，胃泌素、胃動(dòng)素均與結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)，且Hp感染可能影響二者水平變化[7-8]；但目前并未見關(guān)于高毒力Hp感染對(duì)結(jié)直腸腺瘤患者血清胃泌素、胃動(dòng)素表達(dá)及預(yù)后影響的研究。因此，本研究探討高毒力Hp感染對(duì)結(jié)直腸腺瘤患者預(yù)后及血清胃泌素、胃動(dòng)素表達(dá)水平的影響，以期為降低患者不良預(yù)后發(fā)生率，進(jìn)而有效預(yù)防結(jié)直腸癌的發(fā)生提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年10月至2020年5月本院收治的結(jié)直腸腺瘤患者209例作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合結(jié)直腸腺瘤診斷及分類標(biāo)準(zhǔn)，其要點(diǎn)為結(jié)腸鏡檢查中有鏡下肉眼增生性病灶均取病理活檢，根據(jù)病理檢查和結(jié)腸鏡檢查結(jié)果綜合診斷及分類，進(jìn)展期腺瘤診斷依據(jù)為結(jié)腸鏡檢查有結(jié)直腸息肉增生且息肉或病變直徑大于10 mm或病理診斷中含有絨毛成分或有重度異型增生、高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變[9]；(2)臨床資料完整；(3)無胃鏡、結(jié)腸鏡檢查禁忌證；(4)年齡大于18歲；(5)自愿參加本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有炎癥性腸病、胃部手術(shù)史、家族性腺瘤史者；(2)胃鏡檢查發(fā)現(xiàn)消化性潰瘍、萎縮性胃炎、胃癌等疾病者；(3)2周內(nèi)口服抑酸劑治療或Hp根除治療者；(4)妊娠或哺乳期婦女。本研究經(jīng)本院臨床研究倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1試劑與儀器

胃泌素酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)試劑盒(貨號(hào)：CEB224Gu)購自上海恒斐生物科技有限公司，胃動(dòng)素放射免疫試劑盒(貨號(hào)：xY-098)購自上海信裕生物科技有限公司，Hp檢測試劑盒(貨號(hào)：bzsw-006)購自三明市貝真生物科技有限公司，電子結(jié)腸鏡(型號(hào)：CF-XQ290)購自日本奧林巴斯公司，酶標(biāo)儀(型號(hào)：AMR-100)購自杭州奧盛儀器有限公司。

1.2.2樣品采集及保存

檢測前1 d晚上禁煙、酒，清淡飲食，采集兩組患者第2天早上空腹靜脈血樣，室溫下靜置30 min，3 000 r/min離心15 min后收集上層血清，置于-80 ℃保存待測。

1.2.3高毒力Hp感染檢測[10]及分組

胃鏡檢查時(shí)對(duì)胃竇組織進(jìn)行快速尿素酶試驗(yàn)。由內(nèi)鏡操作醫(yī)師在內(nèi)鏡直視下采用滅菌活檢鉗取距幽門前2～3 cm大彎或小彎處約0.5 cm×0.5 cm胃黏膜組織置入試劑盒，15 min后觀察結(jié)果。若試劑酚紅由黃色變?yōu)榧t色說明pH升高，試驗(yàn)結(jié)果為陽性，提示活檢組織存在Hp陽性。將Hp陽性患者血清標(biāo)本經(jīng)蛋白芯片反應(yīng)后通過閱讀儀對(duì)標(biāo)本中的VacA、CagA進(jìn)行定性檢測。VacA、CagA陽性者為高毒力Hp陽性組(96例)，VacA、CagA陰性為高毒力Hp陰性組(113例)。兩組患者年齡、性別等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2.4血清胃泌素、胃動(dòng)素水平檢測

采用ELISA法檢測兩組患者血清胃泌素水平，采用放射免疫法檢測兩組患者血清胃動(dòng)素水平。操作步驟均嚴(yán)格按儀器及試劑盒使用說明書進(jìn)行。

1.2.5隨訪

兩組患者出院1年內(nèi)以電話、門診、微信等方式進(jìn)行隨訪，隨訪期間出現(xiàn)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移者判定為預(yù)后不良。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 高毒力Hp感染與臨床特征的關(guān)系

高毒力Hp陽性組患者腫瘤多發(fā)、腫瘤最大徑大于或等于0.5 cm、進(jìn)展期腺瘤者比例均大于高毒力Hp陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 高毒力Hp感染與臨床特征的關(guān)系[n(%)]

2.2 兩組患者血清胃泌素、胃動(dòng)素水平比較

高毒力Hp陽性組患者血清胃泌素水平高于高毒力Hp陰性組，胃動(dòng)素水平低于高毒力Hp陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖1。

a：P<0.05，與高毒力Hp陰性組比較。圖1 兩組患者血清胃泌素、胃動(dòng)素水平比較

2.3 高毒力Hp陽性患者血清胃泌素與胃動(dòng)素水平的相關(guān)性

高毒力Hp陽性患者血清胃泌素與胃動(dòng)素水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.513，P<0.05)。見圖2。

圖2 高毒力Hp陽性患者血清胃泌素與胃動(dòng)素水平相關(guān)性分析

2.4 高毒力Hp感染與患者預(yù)后的相關(guān)性

高毒力Hp陽性組患者中預(yù)后不良者比例大于高毒力Hp陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.463，P=0.001)。見表3。

表3 高毒力Hp感染與患者預(yù)后的相關(guān)性[n(%)]

2.5 影響結(jié)直腸腺瘤患者預(yù)后的單因素和多因素Cox回歸模型分析

單因素Cox回歸模型分析結(jié)果顯示，高毒力Hp陽性、胃泌素水平高、胃動(dòng)素水平低、腫瘤病理類型為進(jìn)展期腺瘤是影響結(jié)直腸腺瘤患者發(fā)生不良預(yù)后的危險(xiǎn)因素(P<0.05)；多因素Cox回歸模型分析結(jié)果顯示，高毒力Hp陽性、胃泌素水平高是影響結(jié)直腸腺瘤患者發(fā)生不良預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表4。

表4 影響結(jié)直腸腺瘤患者預(yù)后的單因素和多因素Cox回歸模型分析

3 討 論

結(jié)直腸腺瘤是結(jié)直腸癌的癌前病變，其經(jīng)歷腺瘤、腺癌發(fā)展序列后進(jìn)展為結(jié)直腸癌[11]。尋找其相關(guān)危險(xiǎn)因子有利于及時(shí)、有效地制訂針對(duì)性治療決策，阻止病情發(fā)展為結(jié)直腸癌，改善患者預(yù)后。Hp是一種一端有鞭毛的微需氧革蘭陰性螺旋狀細(xì)菌，與胃炎相關(guān)疾病、胃癌、結(jié)腸癌、結(jié)腸息肉等疾病均有關(guān)[12]。有研究表明，Hp感染可能會(huì)增加發(fā)生結(jié)直腸癌的風(fēng)險(xiǎn)，但其具體機(jī)制目前尚不清楚[13]。本研究159例結(jié)直腸腺瘤患者中高毒力Hp陽性患者96例，提示高毒力Hp陽性可能與結(jié)直腸腺瘤的發(fā)生密切相關(guān)。

胃泌素是人體十分重要的胃腸激素，主要由胃竇、十二指腸中的G細(xì)胞和人胰島的D細(xì)胞分泌，可參與腸道組織的正常生長和惡性生長，胃泌素對(duì)結(jié)腸黏膜具有營養(yǎng)作用，同時(shí)可刺激腫瘤生長[14]。本研究結(jié)果顯示，高毒力Hp陽性組患者血清胃泌素水平明顯高于高毒力Hp陰性組，且高毒力Hp陽性、胃泌素水平高均是影響結(jié)直腸腺瘤患者發(fā)生不良預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與潘偉[15]和陳志濤等[16]研究結(jié)果基本一致。推測其可能機(jī)制為高毒力Hp感染后高毒力Hp酶水解尿素產(chǎn)生氨，造成胃內(nèi)pH升高，刺激G細(xì)胞大量分泌胃泌素，胃泌素水平升高后促進(jìn)消化道黏膜上皮細(xì)胞增生，刺激腫瘤生長，同時(shí)造成胃內(nèi)炎癥增加，胃黏膜屏障損害，進(jìn)而影響結(jié)直腸腺瘤患者病情發(fā)展，出現(xiàn)不良預(yù)后。

胃動(dòng)素是一種胃腸激素，可促進(jìn)胃腸動(dòng)力，通過作用于平滑肌細(xì)胞的特異性受體，使平滑肌細(xì)胞收縮，進(jìn)而促進(jìn)胃部排空，增強(qiáng)胃腸道動(dòng)力[17]。本研究結(jié)果顯示，高毒力Hp陽性組患者血清胃動(dòng)素水平明顯低于高毒力Hp陰性組，與王文光等[18]研究中胃動(dòng)素的變化趨勢一致?；诩韧芯拷Y(jié)果，推測其機(jī)制為高毒力Hp感染可能與結(jié)直腸腺瘤患者血清胃動(dòng)素表達(dá)水平降低有關(guān)，其可能機(jī)制是高毒力Hp感染后通過某些途徑間接作用于小腸，使其收縮作用減弱，進(jìn)一步造成M細(xì)胞分泌胃動(dòng)素較少。且本研究相關(guān)性分析結(jié)果顯示，高毒力Hp感染可能通過影響結(jié)直腸腺瘤患者血清胃泌素、胃動(dòng)素表達(dá)水平，進(jìn)而共同影響患者病情的發(fā)展。推測高毒力Hp感染后通過同時(shí)刺激G細(xì)胞及M細(xì)胞，造成胃泌素表達(dá)升高，胃動(dòng)素表達(dá)降低，而胃泌素、胃動(dòng)素通過調(diào)控消化道炎癥及黏膜上皮細(xì)胞增生，影響腫瘤細(xì)胞生長，加速病情進(jìn)展。此外，本研究結(jié)果顯示，高毒力Hp陽性組患者腫瘤多發(fā)、腫瘤最大徑大于或等于0.5 cm、進(jìn)展期腺瘤、預(yù)后不良者比例均較高，進(jìn)一步提示高毒力Hp感染可能是結(jié)直腸腺瘤患者病情發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素，高毒力Hp感染后腫瘤數(shù)目和直徑增加，同時(shí)增加非進(jìn)展期腺瘤向進(jìn)展期腺瘤發(fā)展的可能性，導(dǎo)致結(jié)直腸腺瘤患者發(fā)生復(fù)發(fā)、死亡等不良預(yù)后。

綜上所述，高毒力Hp感染可能通過影響結(jié)直腸腺瘤患者血清胃泌素、胃動(dòng)素表達(dá)水平，造成患者預(yù)后不良。因此，對(duì)有結(jié)直腸腺瘤甚至腫瘤高危因素及高毒力Hp感染根除困難者建議定期進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查。同時(shí)對(duì)已有高毒力Hp感染的結(jié)直腸腺瘤患者建議及時(shí)行腺瘤摘除術(shù)，預(yù)防腺瘤進(jìn)一步發(fā)展為多發(fā)、大直徑及病理類型風(fēng)險(xiǎn)較高的腺瘤。