李 瀾

（福建省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測中心，福建福州 350003）

近年來，隨著消費者食品安全意識的不斷提高，農(nóng)藥殘留帶來的食品安全問題受到了越來越多的關(guān)注。由于農(nóng)藥品種的不斷增加、農(nóng)藥的頻繁使用，以及對農(nóng)藥專業(yè)知識的不了解，目前農(nóng)藥殘留超標(biāo)問題是社會關(guān)注的一個熱點[1]。為保證食品安全，國家加大了對蔬菜、水果等植物源性食品中農(nóng)藥殘留的監(jiān)測力度，不斷增多的檢測項目和日益嚴(yán)格的限量要求對農(nóng)藥殘留檢測工作提出了更嚴(yán)格的要求[2]。

目前植物源性食品中農(nóng)藥殘留常用的檢測方法有液相色譜法[3]、氣相色譜法[4-5]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[6-7]和氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[8-9]等。但液相色譜法和氣相色譜法在檢測器的靈敏度及檢測時間上存在不足，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法靈敏度高、重現(xiàn)性好。但液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法存在成本高，對環(huán)境的污染程度更大。目前氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法在樣品前處理凈化過程中常用的凈化方法有凝膠滲透色譜法、固相萃取柱凈化法、QuEChERS方法等，凝膠滲透色譜法在使用過程中因需要時間長、溶劑消耗量大，導(dǎo)致試劑浪費和造成環(huán)境污染[10-11]。固相萃取柱凈化法對某些樣品凈化效果不理想。QuEChERS方法因簡單快速，可處理大批量樣品，在農(nóng)藥殘留分析、獸藥殘留分析以及環(huán)境污染物的分析等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用[12-14]。本研究將QuEChERS方法與氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法技術(shù)相結(jié)合，建立了同時快速高效檢測植物源性食品中50種農(nóng)藥殘留的分析方法，優(yōu)化了測定條件，實現(xiàn)了簡便、快捷、準(zhǔn)確檢測大批量植物源性食品樣品。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

TSQ 9000三重四極桿氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀，賽默飛公司（Thermo Scientific）；離子源，EI（電子轟擊）源；千分之一分析天平；高速勻漿機(jī)（轉(zhuǎn)速≥15 000 r/min）；離心機(jī)（轉(zhuǎn)速≥4 200 r/min）；搗碎機(jī)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；氮吹儀，可控溫；渦旋振蕩器；乙腈；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品為農(nóng)業(yè)部有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（質(zhì)量濃度均為 100 μg/mL）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)儲備液配制

從50種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液100 μg/mL的安口瓶內(nèi)取1 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，用乙腈稀釋至10 mL，既為10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。密封避光保存在-18 ℃冰箱。

1.3 儀器工作條件

氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：色譜柱：HP-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；載氣：氬氣（純度≥99.999%），載氣流速：1.0 mL/min；碰撞氣：氦氣（純度≥99.999%）；總壓大于2 MPa，氦氣壓力為0.4～0.6 MPa，氬氣氣壓應(yīng)為0.4 MPa；進(jìn)樣口溫度：280 ℃，不分流進(jìn)樣。

1.4 樣品前處理

稱取青瓜樣品10 g（精確至0.01 g）至50 mL塑料離心管中，加入20 mL C2H3N、2 g NaCl，勻漿后4 200 r/min離心5 min。吸取上清液6 mL加到內(nèi)含900 mg MgSO4、150 mg PSA的15 mL離心管中，對于顏色較深的試樣，15 mL離心管中加885 mg MgSO4、150 mg PSA及15 mg GCB，渦旋混勻1 min，4 200 r/min離心5 min，精確吸取2 mL上清液過微孔濾膜，待GC-MS/MS測定。

1.5 測定

1.5.1 標(biāo)準(zhǔn)樣品的線性試驗

精密量取10 μg/mL的50種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)液500 μL、100 μL、50 μL、10 μL 和 5 μL 分別置于容量瓶中，用乙腈將其稀釋成含量分別為0.500 μg/g、0.100 μg/g、0.050 μg/g、0.010 μg/g、0.005 μg/g 的混合標(biāo)準(zhǔn)液。

1.5.2 陽性添加樣品的制備

精密量取 10 μg/mL 的工作液 500 μL、100 μL、10 μL，分別置于空白樣品中，使之成為0.50 μg/g、0.10 μg/g、0.01 μg/g 的陽性添加樣品。

1.5.3 空白樣品、陽性添加樣品的提取和凈化

同試樣一同進(jìn)行提取凈化。

1.5.4 回收率試驗

選取青瓜品種，做3個樣品濃度添加量（0.01 mg/kg、0.10 mg/kg、0.50 mg/kg），每個濃度做6個平行樣。標(biāo)準(zhǔn)樣和樣品處理液依次進(jìn)樣氣相色譜測定，進(jìn)行定量和定性分析。

1.5.5 農(nóng)藥殘留量計算公式

農(nóng)藥殘留量計算公式如下：

式中：ω為試樣中被測物殘留量，mg/kg；ρ為基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測物的質(zhì)量濃度，mg/L；A為試樣溶液中被測物的色譜峰面積；As為基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中被測物的色譜峰面積；V為試樣溶液最終定容體積，mL；m為試樣溶液所代表試樣的質(zhì)量，g。

回收率計算公式如下：

2 結(jié)果與分析

2.1 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀方法的建立

將50種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制為5 μg/mL的溶劑標(biāo)準(zhǔn)工作溶液來進(jìn)行全掃描，確定每種農(nóng)藥參數(shù)的保留時間（RT值），并從每種農(nóng)藥參數(shù)的質(zhì)譜圖中選擇靈敏度高的3對離子為子離子，其中一對離子對作為定量離子，另外兩對作為定性離子[15]，從而分別得出50種農(nóng)藥參數(shù)的RT值、質(zhì)譜條件及檢出限。

2.2 線性范圍和檢出限

用溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液添加濃度分別為0.500 μg/mL、0.100 μg/mL、0.050 μg/mL、0.010 μg/mL 和0.005 μg/mL的50種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，在設(shè)定好的色譜和質(zhì)譜條件下進(jìn)樣，以峰面積對各種農(nóng)藥的濃度進(jìn)行回歸分析。由表1知，50種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣的濃度與峰面積間呈良好的正相關(guān)線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（r2）均大于0.99[14]，儀器檢出限（LOD）為0.010～0.001 mg/kg，定量限為0.01 mg/kg。

表1 50種農(nóng)藥的線性相關(guān)系數(shù)(r2)

2.3 準(zhǔn)確度

選取青瓜品種，分別添加0.01 mg/kg、0.10 mg/kg、0.50 mg/kg的50種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.4樣品前處理的方法提取、凈化和上機(jī)，每個濃度做6個平行樣。測得青瓜平均回收率在68.6%～120.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.05%～12.97%（見表2），準(zhǔn)確度達(dá)到了《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018）中農(nóng)藥殘留檢測的要求。

表2 50種農(nóng)藥的加標(biāo)回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

續(xù)表2

3 結(jié)論

本文研究構(gòu)建蔬菜水果產(chǎn)品中甲拌磷等50種農(nóng)藥及其代謝物殘留量檢測的氣相色譜/串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜分析方法。本試驗采用QuEChERS方法，通過乙腈提取、凈化，配基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液校準(zhǔn)法定量，實現(xiàn)了蔬菜水果類樣品中50種農(nóng)藥殘留含量的確證及定量分析。