高永強(qiáng)，施鵬偉，劉曉曉，師文楷

(1.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院牙周科，河南 鄭州 450052；2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院口腔頜面外科，河南 鄭州 450052；3.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院肝膽胰外科，河南 鄭州 450052)

口腔鱗癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)是口腔最常見的惡性腫瘤，約占口腔頜面部惡性腫瘤的80%，多由癌前病變發(fā)展而來(lái)[1]。OSCC具有局部浸潤(rùn)性強(qiáng)、易發(fā)生頸部淋巴結(jié)及全身轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)，且多數(shù)患者確診時(shí)已經(jīng)處于中晚期階段，嚴(yán)重危害患者的身體健康[2]。隨著治療手段的不斷發(fā)展，OSCC的總體治療效果得到了很大的進(jìn)展，但晚期患者的5 a生存率仍較低[3]。因此尋找有效的診斷性腫瘤標(biāo)志物對(duì)OSCC的早期發(fā)現(xiàn)及預(yù)后改善具有重要意義。基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)是降解基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白水解酶，在多種惡性腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用[4-6]。本研究通過(guò)檢測(cè)OSCC、癌前病變患者血清、唾液MMP-9水平，初步探討MMP-9是否可作為指示口腔癌變過(guò)程的生物學(xué)指標(biāo)，以期為OSCC的臨床診治提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2017年6月至2019年12月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的63例OSCC患者為OSCC組，年齡30～75(54.7±11.6)歲，男36例、女27例。納入標(biāo)準(zhǔn)：1)經(jīng)病理學(xué)檢測(cè)確診為OSCC；2)未合并牙周黏膜疾病或其他系統(tǒng)性疾?。?)無(wú)長(zhǎng)期服藥史；4)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)合并其他腫瘤或其他系統(tǒng)性疾病；2)伴有嚴(yán)重肝、腎功能異常。另收集30例OSCC癌前病變(白斑、紅斑及扁平苔蘚)患者為癌前病變組，年齡32～76(55.4±12.0)歲，男16例、女14例。同時(shí)收集無(wú)任何口腔病變的健康體檢者30例為對(duì)照組，年齡31～77(55.9±11.8)歲，男17例、女13例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2 觀察指標(biāo)統(tǒng)計(jì)OSCC患者的臨床資料，包括年齡、性別、腫瘤直徑、腫瘤部位、腫瘤分化程度、TNM分期及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。分別于術(shù)前、治療前及體檢時(shí)收集OSCC、癌前病變及健康體檢者的清晨空腹靜脈血、唾液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒檢測(cè)MMP-9水平，操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 3組受試者M(jìn)MP-9水平比較3組受試者血清、唾液MMP-9水平總體體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=42.289，P<0.001；F=47.594，P<0.001)。OSCC 組、癌前病變組血清、唾液MMP-9水平均明顯高于對(duì)照組，OSCC組血清、唾液MMP-9水平明顯高于癌前病變組(P均<0.05)。見表1。

表1 3組受試者M(jìn)MP-9水平比較 ng/mL

2.2 MMP-9水平與OSCC患者臨床病理特征的關(guān)系血清、唾液MMP-9水平與腫瘤大小、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(血清：t=2.258，P=0.028；t=2.219，P=0.037；t=2.097，P=0.040；唾液：t=2.707，P=0.009；t=2.496，P=0.015；t=2.410，P=0.019)。見表2。

表2 MMP-9水平與OSCC患者臨床病理特征的關(guān)系 ng/mL

2.3 MMP-9對(duì)癌前病變、OSCC的診斷價(jià)值以對(duì)照組為參照分析血清、唾液MMP-9對(duì)癌前病變、OSCC的診斷價(jià)值。結(jié)果顯示，血清、唾液MMP-9診斷OSCC的曲線下面積(area under curve,AUC)分別為0.944和0.947，診斷癌前病變的AUC分別為0.779和0.810。以癌前病變組患者為參照分析血清、唾液MMP-9對(duì)OSCC的診斷價(jià)值。結(jié)果顯示，AUC分別為0.749和0.795。見圖1、表3。

圖1 血清及唾液MMP-9診斷癌前病變及OSCC的ROC曲線分析

表3 血清、唾液MMP-9對(duì)癌前病變、OSCC診斷效能

3 討論

OSCC是發(fā)生在口腔黏膜最常見的惡性腫瘤，具有發(fā)病率高、存活率低、預(yù)后不良的特點(diǎn)[7]。侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是OSCC患者死亡的重要原因。MMP-9是MMPs中的重要成員，與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[8-10]。國(guó)外研究[11-12]發(fā)現(xiàn)，MMP-9在OSCC患者血清、唾液及組織中高表達(dá)，因此推斷MMP-9在OSCC的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。本研究發(fā)現(xiàn)，OSCC和癌前病變患者血清、唾液MMP-9水平明顯高于對(duì)照組，且OSCC患者明顯高于癌前病變組，說(shuō)明MMP-9與OSCC的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。本研究分析MMP-9與OSCC臨床病理特征的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，血清、唾液MMP-9水平與腫瘤大小、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)，提示MMP-9表達(dá)的上調(diào)可能通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，從而參與疾病發(fā)生、進(jìn)展。

目前OSCC的臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)主要依賴于活檢及組織病理學(xué)檢查，然而其有創(chuàng)且耗時(shí)限制了臨床應(yīng)用[13]。血清腫瘤標(biāo)志物雖然在OSCC早期診斷中具有一定的診斷價(jià)值，但敏感性和特異性有限，漏診率和誤診率較高。唾液是存在于口腔內(nèi)的體液，包括口腔黏膜脫落細(xì)胞及其分泌代謝產(chǎn)物，當(dāng)口腔黏膜組織發(fā)生癌變時(shí)，唾液中的組分也發(fā)生改變，因此可作為口腔癌早期診斷的有效檢測(cè)目標(biāo)[14-15]。本研究發(fā)現(xiàn)，OSCC組、癌前病變組及對(duì)照組，唾液中MMP-9水平都高于血清MMP-9。為了評(píng)價(jià)唾液和血清中MMP-9的診斷性能，根據(jù)上述結(jié)果進(jìn)行ROC曲線分析，結(jié)果顯示，血清、唾液MMP-9水平診斷OSCC的AUC分別為0.944和0.947，診斷癌前病變的AUC分別為0.779和0.810，表明MMP-9對(duì)OSCC和癌前病變具有一定診斷價(jià)值，且對(duì)OSCC的診斷效能較高，有望成為OSCC的早期診斷腫瘤標(biāo)志物。進(jìn)一步以癌前病變患者為參照，分析血清、唾液MMP-9對(duì)OSCC診斷效能發(fā)現(xiàn)，AUC分別為0.749和0.795，提示在MMP-9對(duì)癌前病變和OSCC具有一定區(qū)分能力。與血清MMP-9相比，唾液中MMP-9可能更適合作為診斷OSCC的單項(xiàng)指標(biāo)。唾液因子檢測(cè)具有標(biāo)本收集簡(jiǎn)單、安全、無(wú)創(chuàng)、可反復(fù)取樣及檢查快捷等優(yōu)點(diǎn)，具有較強(qiáng)的可行性。此外，唾液中不僅含有蛋白質(zhì)，還有從口腔中脫落的腫瘤細(xì)胞。因此唾液更有利于口腔疾病的診斷。

綜上所述，癌前病變和OSCC患者血清、唾液MMP-9水平均明顯升高，且與OSCC患者腫瘤大小、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(guān)，其對(duì)癌前病變和OSCC具有一定的診斷價(jià)值。然而，本研究所納入樣本量較少，研究對(duì)象來(lái)源有一定局限性，可能導(dǎo)致研究結(jié)果存在選擇性偏倚，后續(xù)還需擴(kuò)大樣本量進(jìn)行多中心深入研究。