呂 娟，劉經(jīng)賢，戴風(fēng)龍，王 穎，王清海，張宗俠

(1. 濟(jì)南市園林和林業(yè)科學(xué)研究院，濟(jì)南 250103；2. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院昆蟲(chóng)學(xué)系，廣州 510642；3. 濟(jì)南市萊蕪區(qū)國(guó)有華山林場(chǎng)，濟(jì)南 250218；4. 濟(jì)南市萊蕪區(qū)國(guó)有馬鞍山林場(chǎng)，濟(jì)南 250205；5. 山東省林業(yè)科學(xué)研究院，濟(jì)南 250014)

施氏冠蜂屬SchlettereriusAshmead，1900是膜翅目Hymenoptera冠蜂科Stephanidae的一個(gè)小屬，分布于東古北區(qū)、新北區(qū)和澳洲區(qū)(引進(jìn)種)(Taylor, 1967; Acheterberg, 2002; Aguiar, 2004; Hongetal., 2011; Tanetal., 2015)，目前已知3種：環(huán)足施氏冠蜂S.cinctipesCresson, 1880(該種原產(chǎn)于北美，在上世紀(jì)60年代作為天敵被引入澳洲區(qū)用于防治樹(shù)蜂；Watanabeetal.(2015)記錄日本有分布；本文首次記錄在我國(guó)山東省有分布)(Aguiar, 2004; Hongetal., 2011; Tanetal., 2015; Watanabeetal., 2015)、赫伯特施氏SchlettereriusdeterminatorisMadl, 1991(分布于中國(guó)遼寧、朝鮮)、純丹施氏冠蜂SchlettereriuschundanaeTan & van Achterberg, 2015(分布于中國(guó)陜西)。洪純丹和許再福(2011)首次報(bào)道該屬在我國(guó)分布，并根據(jù)采集于陜西留壩紫柏山的雄性標(biāo)本記述了一新記錄種：赫伯特施氏冠蜂S.determinatorisMadl, 1991(洪純丹和許再福, 2011)(=S.chundanaeTan & van Achterberg, 2015)。Tanetal.(2015)根據(jù)采集于陜西廣貨街的施氏冠蜂屬一雌性標(biāo)本與洪純丹和許再福(2011)發(fā)表的新記錄種雄性標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)學(xué)比較，確定為同一種，并通過(guò)與赫伯特施氏冠蜂(該種原始描述僅知雌性)的正模標(biāo)本比較，認(rèn)為洪純丹和許再福(2011)發(fā)表的新記錄種(赫伯特施氏冠蜂)實(shí)際上是一新種：純丹施氏冠蜂S.chundanaeTan & van Achterberg, 2015。洪純丹和許再福(2011)、Hongetal.(2011)、Tanetal.(2015)先后對(duì)施氏冠蜂屬的種類有詳細(xì)介紹，本文不再贅述。

關(guān)于施氏冠蜂屬的主要寄主，目前可以明確的是：環(huán)足施氏冠蜂能寄生樹(shù)蜂科Siricidae昆蟲(chóng)，該種曾在1967年從美國(guó)加利福尼亞州被引進(jìn)到澳大利亞塔斯馬尼亞州(Tasmania)防治云杉藍(lán)樹(shù)蜂SirexnoctilioFabricius, 1793(又稱：松樹(shù)蜂)；采集于我國(guó)遼寧的赫伯特施氏冠蜂(2頭雄性標(biāo)本)從六星吉丁Chrysobothrissuccedana(Saunders)(鞘翅目吉丁蟲(chóng)科Buprestidae)育出(Tanetal., 2015)。此外，國(guó)外相關(guān)研究者(Kirk, 1975; Meyeretal., 1978; Aguiar and Johnson, 2003)根據(jù)環(huán)足施氏冠蜂的一些標(biāo)本采集環(huán)境以及野外觀察推測(cè)，寄主可能包括鞘翅目Coleoptera天牛科Cerambycidae等鉆蛀性類群，但沒(méi)有直接證據(jù)顯示該蜂寄生這些寄主。

作者在山東省進(jìn)行天牛科昆蟲(chóng)調(diào)查時(shí)，采集被為害的松木段置于室內(nèi)觀察，先后育出11頭冠蜂科昆蟲(chóng)成蟲(chóng)，同時(shí)在木段內(nèi)解剖出松幽天牛AsemumamurenseKraatz, 1879幼蟲(chóng)和1頭冠蜂幼蟲(chóng)(根據(jù)COI基因確定與成蟲(chóng)同種)，由于該冠蜂幼蟲(chóng)并非直接在松幽天牛幼蟲(chóng)體上獲得，未能確定其是否以該天牛為寄主。參考洪純丹和許再福(2011)、Tanetal.(2015)等文獻(xiàn)，根據(jù)形態(tài)特征對(duì)上述標(biāo)本初步鑒定為環(huán)足施氏冠蜂?？紤]到該蜂原產(chǎn)北美，雖然日本后來(lái)也有發(fā)現(xiàn)，但由于冠蜂科種類外形較為相似，僅依據(jù)外部形態(tài)鑒定，容易誤定。因此，取雌雄標(biāo)本各1頭，提取COI基因序列，并通過(guò)在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)里進(jìn)行對(duì)比，最終確認(rèn)根據(jù)形態(tài)學(xué)特征獲得的鑒定結(jié)果是正確的。

為了便于我國(guó)森林保護(hù)一線工作人員的參考以及利用該蜂作為相關(guān)林業(yè)外來(lái)入侵性害蟲(chóng)的監(jiān)測(cè)依據(jù)之一，本文根據(jù)采集于山東的標(biāo)本進(jìn)行了再次描述。

1 材料與方法

標(biāo)本采集：山東省濟(jì)南市萊蕪區(qū)馬鞍山林場(chǎng)，2021年5月，在室內(nèi)養(yǎng)出。

分子實(shí)驗(yàn)：在采集的樣本中，隨機(jī)挑選出雌成蟲(chóng)和雄成蟲(chóng)各1頭用于DNA提取。利用AxyPrep基因組DNA小量試劑盒提取基因組DNA，提取方法參考試劑盒說(shuō)明書步驟進(jìn)行。提取的DNA置于-20℃冰箱保存。PCR擴(kuò)增引物選用COI基因的通用引物MlepF1 (GCTTTCCCACGAATAAATAATA)/LepR1(TAAACTTCTGGATGTCCAAAAAATCA) (Hebertetal., 2004; Hajibabaeietal., 2006)；引物由上海派森諾生物科技有限公司合成。PCR擴(kuò)增反應(yīng)總體系為：30 μL，包括2X Mix 15 μL，正反向引物各1 μL，DNA 2 μL，ddH2O 11 μL。擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性5 min，95℃變性30 s，56℃退火30 s，72℃延伸60 s，35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5 min，4℃保存。PCR產(chǎn)物由上海派森諾生物科技有限公司進(jìn)行雙向測(cè)序。

將測(cè)序所得序列在GenBank中進(jìn)行Blast比對(duì)，選擇新冠蜂屬Neostephanussp.的一個(gè)種為外群，基于Kimura雙參數(shù)模型(Kimura-2-parameter, K2P)計(jì)算種內(nèi)遺傳距離，并采用最大似然法(Maximum Likehood，ML)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，以自展法(Bootstrap)進(jìn)行檢測(cè)，共循環(huán)1 000次。

圖像拍攝和處理：Leica S8APO成像系統(tǒng)、索尼照相機(jī)(Sony 7aII)+老蛙鏡頭100 (Laowa 100m F2.8)WeMacro自動(dòng)拍攝軟件Helicon7.0 軟件，圖片后期處理使用Phoshop CS軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 COI條形碼結(jié)果

通過(guò)與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)收錄的環(huán)足施氏冠蜂SchlettereriuscinctipesCresson的COI系列進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果顯示，分布中國(guó)的標(biāo)本與分布美國(guó)的加利佛尼亞州(CA)、肯塔基州(KY)、日本(JPN)以及澳洲(AUS)構(gòu)成一主要分支，分布美國(guó)佛吉尼亞州(VA)的標(biāo)本獨(dú)立為一分支(圖1)；我國(guó)山東的標(biāo)本與美國(guó)、日本、澳洲等標(biāo)本相似度為99.79%，種內(nèi)遺傳距離為：0.2%～0.6%，其中與美國(guó)加利福尼亞州(CA)和肯塔基州的標(biāo)本遺傳距離最近，約為0.2%，與分布美國(guó)佛吉尼亞州(VA)的標(biāo)本遺傳距離最大，約為0.6%(表1)。結(jié)合GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)分子數(shù)據(jù)和形態(tài)學(xué)特征，均支持該蜂為環(huán)足施氏冠蜂。因此，采集于我國(guó)山東的標(biāo)本應(yīng)為：環(huán)足施氏冠蜂SchlettereriuscinctipesCresson。

表1 基于COI序列的環(huán)足施氏冠蜂Schlettererius cinctipes和新冠蜂Neostephanus sp.的K2P遺傳距離Table 1 Genetic distances between the COI sequences of the Schlettererius cinctipes and Neostephanus sp.

圖1 利用最大似然法基于環(huán)足施氏冠蜂Schlettererius cinctipes的COI數(shù)據(jù)構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.1 Maximum likelihood tree based on the COI sequences of Schlettererius cinctipes注：CN，中國(guó)；JPN，日本；KY，CA，VA，美國(guó)的肯塔基州、加利福尼亞州、弗吉尼亞州；AUS，澳大利亞；OG，外群。Note: CN, China; JPN, Japan; CA, KY, VA, the US; AUS, Australia;OG, Neostephanus sp. as an out-group.

2.2 成蟲(chóng)形態(tài)學(xué)特征

環(huán)足施氏冠蜂Schlettereriuscinctipes(Cresson, 1880) 中國(guó)新記錄(圖2～7)

圖2 環(huán)足施氏冠蜂Fig.2 Schlettererius cinctipes (Cresson, 1880)注：♀，A，整體側(cè)面觀；B，整體背面觀。Note: ♀, A, Habitus, lateral view; B, Habitus, dorsal view.Stephanus cinctipes Cresson, 1880: xviiiSchlettererius cinctipes: Ashmead, 1900: 150; Aguiar, 2004: 75; Hong and Xu, 2011: 71; Tan et al. 2015: 79; Watanabe et al. 2015: 92.

鑒別特征：本種的前胸背板后方相對(duì)陡斜、腹部第2～3節(jié)背板紅褐色、雌性產(chǎn)卵管鞘亞端部白環(huán)長(zhǎng)為端末黑色部分的3.25倍(模式標(biāo)本為3.5倍)等特征與其它兩種區(qū)分。

重新描記：雌：體長(zhǎng)17.0～17.5 mm，前翅長(zhǎng)9.5～11.5 mm，產(chǎn)卵管長(zhǎng)28.0～36.5 mm體色：體黑褐色至黑色，但上唇(外露部分)黃白色，端緣距黃褐色剛毛。前、中足腿節(jié)最末端與脛節(jié)相接處有白色斑，各足脛節(jié)基部白色，其中前足脛節(jié)白斑略長(zhǎng)(圖2-A)；前、后足跗節(jié)黃褐色，中足第1跗節(jié)外側(cè)黃白色，其余各節(jié)黃褐色。翅透明，端半有煙色斑(但翅痣與翅后緣之間有一狹窄的透明帶)(圖2-B)；翅脈黑褐色，翅痣最基部有白斑。腹部(圖2-A, B)第1節(jié)背部后方2/3，第2節(jié)背板和腹板，第3節(jié)背板(后緣黑色)和腹板紅褐色，第1節(jié)腹板端部0.2紅褐色。產(chǎn)卵管鞘亞端白色，約為鞘長(zhǎng)的1/3(圖2-A)。

頭部：觸角鞭節(jié)31節(jié)。上唇外露，端部具黃褐色剛毛(圖3-D)。上顎上半磨砂狀，下半光滑(圖3-D)。額區(qū)(圖3-A, B)中央至觸角窩之間具粗糙橫皺，中央上方與3個(gè)前冠突之間區(qū)域?yàn)闄M網(wǎng)皺(圖3-B)；3個(gè)前冠突鈍尖(圖3-C)，2個(gè)后冠突短，冠突之間區(qū)域具不規(guī)則皺，后單眼與復(fù)眼后緣連接線之間區(qū)域具有5～6條略弧形的長(zhǎng)短不一的強(qiáng)橫脊，強(qiáng)脊向后漸短，其中第3～5條脊中央有間斷，脊間區(qū)域光滑，后方橫脊兩端與復(fù)眼之間的區(qū)域網(wǎng)皺(圖3-A)；頭頂中央具橫脊，后方與兩側(cè)略呈網(wǎng)狀(圖3-A, B)。上頰、頰區(qū)光滑，具稀疏平滑小刻點(diǎn)(圖3-C)。上頰背面觀呈弧形強(qiáng)度凸出(圖3-A)。

胸部：頸較短，約為中胸盾片中央長(zhǎng)度的一半，基方具3條強(qiáng)橫脊。前胸側(cè)板中央大部分光滑，近邊緣處有小刻點(diǎn)。前胸背板背方中央光滑，后方有一中央呈鈍角波曲狀然后兩側(cè)下斜的強(qiáng)橫脊(圖3-E)；前胸背板側(cè)溝具齒痕狀小凹窩，下方區(qū)域具細(xì)斜脊；前胸背板側(cè)溝背側(cè)方略凸出，具細(xì)皮革狀紋(圖4-B)。中胸盾片(圖3-E)側(cè)葉具斜橫皺，中葉的盾中溝兩側(cè)區(qū)域大部分光滑，基方散布平滑刻點(diǎn)，盾中溝由一列小凹窩組成，盾縱溝向后匯攏，中央呈小凹窩狀。中胸背板腋區(qū)具平滑粗刻點(diǎn)。小盾片前側(cè)緣與腋區(qū)相接處呈小凹窩狀(圖3-E)；小盾片背方兩側(cè)具平滑刻點(diǎn)，沿中線有一縱向光滑區(qū)；小盾片側(cè)方具不規(guī)則橫皺。中胸側(cè)板(圖4-B)強(qiáng)度凸出，凸出區(qū)域具不均勻分布平滑刻點(diǎn)，刻點(diǎn)間距約為刻點(diǎn)直徑的0.5～1.0倍，刻點(diǎn)之間光滑，中胸側(cè)板后方具不規(guī)則細(xì)橫皺。后胸側(cè)板凸出(圖4-B)，上方網(wǎng)皺狀，具皮革狀紋，下方光滑，前緣小凹窩狀。并胸腹節(jié)(圖3-F)前溝具小凹窩，中央有一淺縱溝，內(nèi)有短橫脊，兩側(cè)具不規(guī)則皺。

圖3 環(huán)足施氏冠蜂Fig.3 Schlettererius cinctipes (Cresson, 1880)注：♀，A，頭部，背面觀；B，頭部，前背面觀；C，頭部，側(cè)面觀；D，頭部，前面觀；E，胸部，背面觀；F，并胸腹節(jié)，背面觀。Note: ♀, A, Head, dorsal view; B, Head, frontal dorsal view; C, Head, lateral view; D, Head, frontal view; E, Mesosoma, dorsal view; F, Propodeum, dorsal view.

圖4 環(huán)足施氏冠蜂Fig.4 Schlettererius cinctipes (Cresson, 1880)注：♀，A，頭，胸部，背面觀；B，胸部，側(cè)面觀；C，腹部末端第5～8節(jié)，側(cè)面觀；D，腹部第6～8節(jié)背板，背面觀；E，腹部第1節(jié)背板，背面觀；F，后足，側(cè)面觀。Note: ♀, A, Head and mesosoma, dorsal view; B, Mesosoma, lateral view; C, Fifth to eighth metasomal tergites, lateral view; D, Sixth to eighth metasomal tergites, dorsal view; E, First metasomal tergite, dorsal view; F, Hind leg, lateral view.

翅：前翅(圖7-A)1-M脈內(nèi)彎曲，長(zhǎng)為1-SR脈的3.0倍；r脈與翅痣連接處至翅痣末端的距離為翅痣長(zhǎng)度的13/40；第1亞盤室長(zhǎng)為寬的2.0倍，1cu-a脈位于1-M脈稍外方。

足：后足(圖4-F)基節(jié)粗壯，長(zhǎng)為最大寬的2.2倍，為腿節(jié)的0.85倍，具不規(guī)則粗糙皺脊，之間呈細(xì)皮革狀，左右基節(jié)近端方0.4處有小齒突。后足腿節(jié)長(zhǎng)為最大寬的3.25倍，表面呈細(xì)皮革狀，側(cè)面散布小突起，腹緣中央、近末端具2大齒，之間有小齒突。后足脛節(jié)長(zhǎng)為腿節(jié)長(zhǎng)的1.3倍，端部最寬處為基部最窄處的2.0倍，表面為細(xì)皮革狀，腹緣不呈強(qiáng)脊?fàn)?。后足基跗?jié)長(zhǎng)為寬的5.0倍。

腹部：腹部第1節(jié)背板(圖4-E)長(zhǎng)為端寬的2.0倍，背面具不規(guī)則皺，為第2節(jié)背板0.89倍，腹部第2～6節(jié)背部近光滑，第7～8節(jié)背板(圖4-D)細(xì)皮革狀；第3～6節(jié)腹板表面呈細(xì)皮革狀，無(wú)明顯刻點(diǎn)。產(chǎn)卵管鞘白環(huán)為端部黑色部分的3.25倍。

雄(圖5,圖6,圖7-B～E)：體長(zhǎng)15.0～16.0 mm，前翅長(zhǎng)8.0～9.5 mm。與雌性相似，不同之處在于：觸角鞭節(jié)29節(jié)，腹部第1節(jié)背板(圖6-E)長(zhǎng)為寬的1.7倍，背面基部0.3具細(xì)橫皺，其余為細(xì)皮革狀，第7～8節(jié)背板光滑(圖6-F)，不呈細(xì)皮革狀。抱握器(圖7-D)外側(cè)光滑，外生殖器(圖7-F)內(nèi)側(cè)外緣具黃褐色剛毛。體色與雌性相似，但顏面眼眶內(nèi)緣近觸角窩上方有2白斑(圖6-A)。腹部第1節(jié)背板(圖6-E)大部分黃褐色。

圖5 環(huán)足施氏冠蜂Fig.5 Schlettererius cinctipes (Cresson, 1880)注：♂，整體，側(cè)面觀。Note: ♂, Habitus, lateral view.

圖6 環(huán)足施氏冠蜂Fig.6 Schlettererius cinctipes (Cresson, 1880)注：♂，A，頭部，前面觀；B，頭部，背面觀；C，頭部，側(cè)面觀；D，胸部，背面觀；E，腹部第1節(jié)背板，背面觀；F，腹部第7-8節(jié)背板，背面觀。Note: ♂, A, Head, frontal view; B, Head, dorsal view; C, Head, lateral view; D, Mesosoma, dorsal view; E, First metasomal tergite; F, Seventh and eighth metasomal tergites, dorsal view.

圖7 環(huán)足施氏冠蜂 Fig.7 Schlettererius cinctipes (Cresson, 1880)注：A，前翅(雌)；B，后足(雄)；C，后足腿節(jié)(雄)；D，雄性抱握器，外側(cè)；E，雄性外生殖器，腹面觀。Note: A, Fore wing of female; B, Hind leg of male; C, Hind femur of male; D, Male paramere, outer side; E, Male genitalia, ventral view.

生物學(xué)：寄生云杉藍(lán)樹(shù)蜂SirexnoctilioFabricius, 1793(膜翅目：樹(shù)蜂科Siricidae)(Taylor, 1967)。

研究標(biāo)本：7♀♀4♂♂，山東濟(jì)南市萊蕪區(qū)馬鞍山林場(chǎng)，2021-V室內(nèi)養(yǎng)出，采集人：王清海。

分布：中國(guó)(山東)；日本(Watanabeetal., 2015)；美國(guó)(Achterberg, 2002)；加拿大(Achterberg, 2002)；澳大利亞(Taylor, 1967)。

3 結(jié)論與討論

施氏冠蜂屬Schlettererius目前已知的3個(gè)種：環(huán)足施氏冠蜂S.cinctipes(Cresson, 1880)、純丹施氏冠蜂S.chundanaeTan & van Achterberg, 2015、赫伯特施氏冠蜂S.determinatorisMadl, 1991，結(jié)合本研究結(jié)果，該屬所有種類在我國(guó)(古北區(qū)部分)均有分布。

形態(tài)學(xué)分類方面，該屬的已知種類主要根據(jù)頭部背面特征、前胸背板特征、腹部第1節(jié)背板長(zhǎng)度以及形狀、產(chǎn)卵管白環(huán)長(zhǎng)度比例等特征進(jìn)行區(qū)分(Achterberg, 2002; Hongetal., 2011; Tanetal., 2015)。在標(biāo)本數(shù)量豐富和來(lái)源多樣的情況下，尤其是寄主有差異的情況下，上述形態(tài)特征在種內(nèi)可能有一定的變化范圍。環(huán)足施氏冠蜂的標(biāo)本數(shù)量較多，雌雄均有，個(gè)體大小有一定的差異；另外2種的數(shù)量非常少，雌雄標(biāo)本來(lái)源也并非同時(shí)同地點(diǎn)采集。但該屬的正模標(biāo)本以雌性為主，雌雄有一定的形態(tài)差異，對(duì)于來(lái)源不同的標(biāo)本進(jìn)行雌雄配對(duì)，需要綜合運(yùn)用形態(tài)特征和分子數(shù)據(jù)進(jìn)行判斷。

環(huán)足施氏冠蜂屬于容性外寄生蜂，其明確和潛在的寄主卻是一些重要的林業(yè)害蟲(chóng)，它的分布可為相關(guān)林業(yè)害蟲(chóng)尤其是外來(lái)物種的監(jiān)測(cè)提供參考。該蜂原產(chǎn)北美，在1996年前，其地理分布僅限于美國(guó)西部，后來(lái)可能隨鉆蛀性寄主擴(kuò)散到美國(guó)東部和南部(Aguiar and Johnson, 2003; Johansenetal., 2010)。除了作為天敵被引進(jìn)澳大利亞外，Watanabeetal.(2015)在日本也有發(fā)現(xiàn)，推測(cè)其可能與白角大樹(shù)蜂Urocerusalbicornis(Fabricius)(膜翅目，樹(shù)蜂科)有關(guān)(白角大樹(shù)蜂原產(chǎn)北美，目前屬于日本的外來(lái)物種)。目前該蜂在我國(guó)也有發(fā)現(xiàn)，雖然分布我國(guó)的標(biāo)本COI序列遺傳距離與分布美國(guó)加利福尼亞州和肯塔基州的標(biāo)本最為接近，但僅根據(jù)COI序列不足以準(zhǔn)確推斷其來(lái)源，因此對(duì)于該蜂是否隨寄主擴(kuò)散還是其他原因進(jìn)入，或者是否屬于全北區(qū)分布，有待進(jìn)一步研究考證。

致謝：感謝西北大學(xué)譚江麗教授、中山大學(xué)陳華燕博士對(duì)本文提出的寶貴意見(jiàn)。