董萬慶，尹艷瓊，鄭麗萍，趙雪晴，李向永，張紅梅，馮鵬飛，劉 瑩，宋文宏，諶愛東*

(1. 大理州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心，云南 大理 671000；2. 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境資源研究所云南省農(nóng)業(yè)跨境有害生物綠色防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650205；3. 云南省大理州彌渡縣植保站，云南 大理 671000)

小菜蛾P(guān)lutellaxylostellaL.，屬鱗翅目Lepidoptera菜蛾科Plutellidae，是一種寡食性害蟲，主要為害十字花科蔬菜。小菜蛾的發(fā)生已成為世界范圍內(nèi)蔬菜生產(chǎn)的重大障礙(李騰武等, 2000)，并且在未來相當(dāng)長的一段時間內(nèi)仍然是十字花科作物最重要的害蟲之一(李振宇等, 2020)，伴隨著化學(xué)農(nóng)藥的長期使用，我國小菜蛾已經(jīng)對90%以上的藥劑產(chǎn)生了抗藥性(馮夏等, 2011)，近年來小菜蛾對化學(xué)殺蟲劑的抗性日趨嚴(yán)重，抗藥性的綜合治理也越發(fā)困難(徐巨龍等, 2021)。

云南省小菜蛾抗藥性監(jiān)測的研究最早見于1998年，報(bào)道了其對溴氰菊酯和氰戍菊脂產(chǎn)生極高的抗藥性(張雪燕和何婕, 1998)。2001年楊德良等報(bào)道了1993-1994年彌渡縣小菜蛾的發(fā)生與防控情況(楊德良等, 2001)。2009-2015年，在公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)“小菜蛾可持續(xù)防控技術(shù)研究與示范”項(xiàng)目的支持下，持續(xù)開展了云南菜區(qū)種群的抗藥性、田間藥效(尹艷瓊等, 2011; 2015;2016)，滇東北、滇西南和滇中等區(qū)域小菜蛾發(fā)生規(guī)律和關(guān)鍵影響因子等的研究工作(李向永等, 2016; 趙雪晴等, 2016; 尹艷瓊等, 2019; 趙雪晴等, 2019)，豐富了云南省小菜蛾的研究成果，但仍缺乏滇西菜區(qū)小菜蛾種群發(fā)生規(guī)律和抗藥性相關(guān)的研究報(bào)道。

滇西菜區(qū)屬中亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)，陽光充足，冬春干旱，夏秋多雨，年平均氣溫17.3℃，屬小菜蛾常發(fā)區(qū)。滇西菜區(qū)常年種植蔬菜約6 000 hm2，其中十字花科蔬菜種植面積占一半以上，菜區(qū)生產(chǎn)模式以散戶生產(chǎn)經(jīng)營為主，種植大戶、合作社占比不到5%，散戶生產(chǎn)經(jīng)營模式防控小菜蛾對化學(xué)殺蟲劑的依賴性高，而且用藥盲目，混配混用，見蟲就防。掌握菜區(qū)小菜蛾種群發(fā)生規(guī)律和抗藥性水平，指導(dǎo)菜農(nóng)科學(xué)用藥，降低農(nóng)藥用量，對延緩抗藥性的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 成蟲系統(tǒng)調(diào)查

監(jiān)測點(diǎn)設(shè)在彌渡縣彌城鎮(zhèn)雙海村委會(E25.34°，N100.47°，海拔1 726.54 m)，種植模式：冬春季主要以葉芥、甘藍(lán)Brassicaoleraceavar.capitataL.、白菜Brassicapekinensis(Lour.) Rupr.、花椰菜Brassicaoleraceavar.botrytisLinnaeus等十字花科蔬菜為主，間作蔥AlliumfistulosumL.、蒜AlliumsativumL.、芹菜ApiumgraveolensL.；夏秋季以水稻OryzasativaL.、煙草NicotianatabacumL.、豆類、瓜類為主，十字花科蔬菜種植面積相對減少。

采用性信息素誘集法(馮夏等, 2014)，于2009-2015年全年定點(diǎn)調(diào)查，誘捕器用水盆型(直徑25 cm)。誘芯2009-2010年，采用寧波紐康生物技術(shù)有限公司的產(chǎn)品；2011-2015年，使用中國科學(xué)院動物研究所害蟲無公害防控項(xiàng)目組提供的橡膠型小菜蛾專用誘芯。每7 d收集1次誘盆中的成蟲，并計(jì)數(shù)，每月更換1次誘芯。

1.2 抗藥性監(jiān)測

1.2.1供試藥劑

(1)3% 蘇云金芽胞桿菌可濕性粉劑WP(Bacillusthuringiensis，Bt)

(2)10.85% 溴蟲腈乳油EC(chlorfenapyr)

(3)2.5% 多殺菌素懸浮劑SC(spinosad)

(4)4.28% 茚蟲威乳油EC(indoxacarb)

(5)3.73% 氯蟲苯甲酰胺乳油EC(chloran-traniliprole)

(6)21.08% 高效氯氰菊酯乳油EC(β-cypermethrin)

(7)2.39% 阿維菌素乳油EC(abamection)

供試藥劑由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所用原藥配制而成，并分析檢測標(biāo)定其有效含量。

1.2.2室內(nèi)毒力測定

采用浸葉法，參照《十字花科小菜蛾抗藥性監(jiān)測技術(shù)規(guī)程》(邵振潤等, 2013)，準(zhǔn)備試蟲、供試植物，并配制藥劑。用含0.05% Triton X-100的蒸餾水稀釋藥液，按等比級數(shù)稀釋法，順次配制成5個系列濃度，每濃度藥液量200 mL。用潔凈的甘藍(lán)BrassicaoleraceaL.葉片取直徑6.5 cm的圓片(避免主葉脈)。將葉片置于不同濃度的溶液中浸泡10 s后取出晾干，放入直徑6.5 cm的培養(yǎng)皿中，接入10頭3齡初期幼蟲，每個濃度重復(fù)4次。以含0.05% Triton X-200水溶液浸漬的葉片作為對照。所有處理覆蓋雙層吸水卷紙，蓋上培養(yǎng)皿上蓋。將其正面向上置于(RXZ-380B型)培養(yǎng)箱中，于25℃±1℃、RH 65%～70%、光周期L ∶D=8 h ∶16 h的條件下培養(yǎng)。除Bt藥后96 h調(diào)查外，其余藥劑48 h調(diào)查，以小毛筆輕觸蟲體，不能協(xié)調(diào)運(yùn)動視為死亡。

1.2.3計(jì)算方法

測定結(jié)果用Polo軟件計(jì)算毒力回歸方程的斜率、LD50值及其95%置信限，并與室內(nèi)敏感品系的LD50相比較，計(jì)算出抗藥性倍數(shù)。

抗藥性倍數(shù)(RR)=各藥劑的LD50/各藥劑相應(yīng)的相對敏感基線的LD50

LD50敏感毒力基線(邵振潤等, 2013)：氯蟲苯甲酰胺0.23 mg/L，阿維菌素0.02mg/L，蘇云金芽孢桿菌0.26mg/L，多殺菌素0.12 mg/L，高效氯氰菊酯3.55 mg/L，溴蟲腈0.40 mg/L，茚蟲威0.52 mg/L。

1.2.4抗藥性水平的分級標(biāo)準(zhǔn)

抗藥性分級標(biāo)準(zhǔn)(邵振潤等, 2013)：抗藥性倍數(shù)(RR)<10.0為低水平抗藥性，10.0≤RR<100.0為中等水平抗藥性，RR≥100.0為高水平抗藥性。

2 結(jié)果與分析

2.1 田間種群的發(fā)生規(guī)律

2009-2015年種群監(jiān)測的結(jié)果表明，滇西菜區(qū)年度間小菜蛾發(fā)生規(guī)律相似，全年均有發(fā)生，發(fā)生為害期有9個月，高峰期是3-6月(圖1)，春夏季危害重，田間種群每年早春均存在激增現(xiàn)象，到7月份高峰期過后，種群消減較快。

圖1 滇西菜區(qū)小菜蛾成蟲田間消長動態(tài)(2009-2015年)Fig.1 Population dynamics of adult Plutella xylostella in Western Yunnan (2009-2015)

2009年和2010年發(fā)生高峰期為1月21日-4月30日，峰期誘蛾量分別為100～416頭/7 d和54～686頭/7 d，最高誘蛾量分別在3月26日和3月19日。2011-2012年小菜蛾發(fā)生較輕，高峰期持續(xù)時間短，2011年高峰期為4月30日-6月25日，誘蛾量151～290頭/7 d，最高誘蛾量是6月18日，2012年高峰期為3月19日-5月14日，誘蛾量達(dá)51～431頭/7 d，最高誘蛾量出現(xiàn)在4月9日。2013年發(fā)生量最大，峰期明顯，高峰期是3月12日-5月27日，單周誘蛾量達(dá)200～905頭/7 d，最高誘蛾量出現(xiàn)在4月23日。2014年，發(fā)生量不大但高峰期持續(xù)時間長，3月5日-10月22日持續(xù)發(fā)生，誘蛾量172～367頭/7 d，發(fā)生高峰期是為4月16日。2015年發(fā)生量大，高峰期為3月5日-7月16日，誘蛾量為335～672頭/7 d，最高誘蛾量出現(xiàn)在4月2日(圖1)。

2.2 抗藥性監(jiān)測

2009-2015年的抗藥性監(jiān)測結(jié)果表明：滇西菜區(qū)小菜蛾種群對阿維菌素和多殺菌素產(chǎn)生了不同水平抗藥性，2012年對阿維菌素的抗藥性達(dá)47.38 mg/L，RR值2 369倍，對多殺菌素達(dá)中等水平抗藥性，RR值7～55倍，對微生物類Bt制劑敏感。2009-2012年阿維菌素LD50值與2013-2015年LD50值的95%置信限不重疊，說明阿維菌素的抗藥性從2013年開始顯著下降，RR值由2012年的2369倍下降至2015年的255倍(圖2)。多殺菌素維持中抗水平，LD50值年度間波動大，95%置信限不重疊，差異顯著(圖3)。Bt藥劑持續(xù)敏感(圖4)，這與使用量少有關(guān)。

圖2 滇西菜區(qū)小菜蛾對阿維菌素的抗藥性變化趨勢(2009-2015年)Fig.2 Resistance variation tendency of Plutella xylostella to abamectin in Western Yunnan (2009-2015)注：線段表示各LD50值的95%置信限，虛線表示敏感基線。下圖同。Note: Line segment meant that 95% confidence of each LD50.Dotted line indicated susceptibility baseline. The same with the figures below.

圖3 滇西菜區(qū)小菜蛾對多殺菌素的抗藥性變化趨勢(2009-2015年)Fig.3 Resistance variation tendency of Plutella xylostella to spinosad in Western Yunnan (2009-2015)

圖4 滇西菜區(qū)小菜蛾對Bt的抗藥性變化趨勢(2009-2015年)Fig.4 Resistance variation tendency of Plutella xylostella to Bt in Western Yunnan (2009-2015)

2009-2015年的抗藥性監(jiān)測結(jié)果表明：滇西菜區(qū)小菜蛾種群對茚蟲威和高效氯氰菊酯產(chǎn)生了抗藥性。對茚蟲威維持中等水平抗藥性，RR值12～133倍，2011年上升到高抗水平，2012-2015年，顯著下降(圖5)。對高效氯氰菊酯LD50值476.91～3 616.35mg/L，RR值134～1 019倍，處于高抗水平，2009-2014年持續(xù)上升，到2015年出現(xiàn)下降趨勢，由2014年的1 019倍下降至134倍，下降趨勢顯著(圖6)。

圖5 滇西菜區(qū)小菜蛾對茚蟲威的抗藥性變化趨勢(2009-2015年)Fig.5 Resistance variation tendency of Plutella xylostella toindoxacarb in Western Yunnan (2009-2015)

圖6 滇西菜區(qū)小菜蛾對高效氯氰菊酯的抗藥性變化趨勢(2009-2015年)Fig.6 Resistance variation tendency of Plutella xylostella to β-cypermethrin in Western Yunnan (2009-2015)

2009-2015年滇西菜區(qū)小菜蛾種群對氯蟲苯甲酰胺的抗藥性上升后恢復(fù)敏感，再上升的變化趨勢(圖7)。2009-2011年LD50值由0.30 mg/L上升至2.38 mg/L，即RR值由4倍上升到28倍，由敏感達(dá)到中抗水平。2012-2014年恢復(fù)敏感，RR值2～6倍。2015年又出現(xiàn)上升趨勢，LD50值達(dá)3.92mg/L，RR值52倍。

圖7 滇西菜區(qū)小菜蛾對氯蟲苯甲酰胺的抗藥性變化趨勢(2009-2015年)Fig.7 Resistance variation tendency of Plutella xylostella to chlorantraniliprole in Western Yunnan (2009-2015)

滇西菜區(qū)小菜蛾種群對溴蟲腈產(chǎn)生了中等水平抗藥，RR值16～58倍，維持在中等抗藥性水平。2011-2015年度間LD50值有波動，95%置信限重疊，差異不顯著(圖8)。

圖8 滇西菜區(qū)小菜蛾對溴蟲腈的抗藥性變化趨勢(2009-2015年)Fig.8 Resistance variation tendency of Plutella xylostella to chlorfenapyr in Western Yunnan (2009-2015)

綜上，滇西菜區(qū)小菜蛾對7種不同作用機(jī)理的常用殺蟲劑的抗藥性水平與田間使用頻率密切相關(guān)。阿維菌素和高效氯氰菊酯防控譜廣，菜農(nóng)大量應(yīng)用于蔬菜多種害蟲的防控，導(dǎo)致小菜蛾種群對其產(chǎn)生了極高的抗藥性。2009年，氯蟲苯甲酰胺開始大面積推廣應(yīng)用，到2013年后，部分替代了阿維菌素和高效氯氰菊酯在生產(chǎn)中的應(yīng)用，小菜蛾對阿維菌素和高效氯氰菊酯的抗藥性開始呈現(xiàn)下降趨勢，與此同時氯蟲苯甲酰胺的抗藥性在2015年出現(xiàn)了上升趨勢，由2013年的2倍上升到2015年的52倍。多殺菌素、茚蟲威和溴蟲腈是防控小菜蛾的備選輪換藥劑，田間用量不大，抗藥性維持中等水平。

3 結(jié)論與討論

2009-2015年，采用性信息素誘集法對滇西菜區(qū)小菜蛾發(fā)生動態(tài)開展調(diào)查，調(diào)查結(jié)果表明年度間發(fā)生規(guī)律相似，而且其種群的發(fā)生規(guī)律與1993-1994年調(diào)查的結(jié)果基本一致(楊德良等, 2001)，全年均有發(fā)生，發(fā)生為害期有9個月，高峰期是3-6月，春季為害較秋季重。研究結(jié)果證明逐日性信息素誘蟲量可較好反映田間小菜蛾種群發(fā)育動態(tài)(戴建青等, 2010; 李振宇等, 2011)。借助性信息素誘蟲量的監(jiān)測結(jié)果，根據(jù)監(jiān)測地的氣象數(shù)據(jù)和小菜蛾在不同溫度下的發(fā)育歷期，可推測幼蟲發(fā)生高峰期(章金明等, 2015)，提出最佳防控時期和防控區(qū)域。因此，區(qū)域內(nèi)長期設(shè)立性信息素監(jiān)測網(wǎng)點(diǎn)，監(jiān)測小菜蛾田間種群發(fā)生動態(tài)，不僅省工省力，對區(qū)域防控具有重要的指導(dǎo)意義，是田間的綜合防控的重要依據(jù)。

害蟲抗藥性的產(chǎn)生是導(dǎo)致防控失效、產(chǎn)量損失、藥量增量使用等的重要原因，小菜蛾已經(jīng)對90%以上的藥劑產(chǎn)生了抗藥性(馮夏等, 2011)，因此進(jìn)行小菜蛾的抗藥性監(jiān)測對指導(dǎo)小菜蛾防治尤為重要。本研究對滇西菜區(qū)小菜蛾種群開展了7年的抗藥性監(jiān)測，監(jiān)測結(jié)果表明其種群對常用的7種化學(xué)殺蟲劑均產(chǎn)生了抗藥性，經(jīng)過7年的時間，小菜蛾對供試藥劑的抗性水平呈現(xiàn)出不同的變化趨勢，其中對阿維菌素、高效氯氰菊酯和茚蟲威的抗藥性呈下降趨勢，對多殺菌素和溴蟲腈的抗藥性維持中抗水平，對氯蟲苯甲酰胺的抗藥性又有了發(fā)展和蔓延的趨勢。氯蟲苯甲酰胺抗藥性的變化引起重視，如廣州小菜蛾種群2011年對氯蟲苯甲酰胺抗藥性倍數(shù)就達(dá)到了606.00倍，7-8月，當(dāng)?shù)匦〔硕臧l(fā)生猖獗，選用氯蟲苯甲酰胺防控基本失效(胡珍娣等, 2012)，應(yīng)注意減少氯蟲苯甲酰胺的使用次數(shù)，降低產(chǎn)生高水平抗藥性的風(fēng)險(xiǎn)。小菜蛾對溴蟲腈抗藥性增加10倍，僅需要6.6～8.3代(賈變桃等, 2015)，應(yīng)多與其它不同機(jī)理的藥劑輪換使用。此外，滇西菜區(qū)小菜蛾種群與云南其它菜區(qū)種群對供試藥劑的抗性水平具有較大差異，滇西菜區(qū)種群抗藥性水平低于滇中種群(沐衛(wèi)東等, 2014)，高于滇西南種群(尹艷瓊等, 2019)。不同年份不同區(qū)域的小菜蛾種群對不同藥劑產(chǎn)生不同水平的抗藥性，與藥劑種類、選擇壓力、地區(qū)氣候、栽培模式及使用時間、頻率、強(qiáng)度等不同具有重要關(guān)系(姜興印等, 2000; 尤民生等, 2007; 羅雁婕等, 2009)。應(yīng)建立常態(tài)化抗藥性監(jiān)測，根據(jù)不同地區(qū)小菜蛾抗性檢測結(jié)果，采用相應(yīng)的治理措施，如交替輪換敏感與低抗藥劑，合理混用和使用增效劑，增加生物農(nóng)藥使用等(徐巨龍等, 2021)，可減緩抗藥性的發(fā)展速度，實(shí)現(xiàn)抗藥性的綜合治理。

滇西菜區(qū)小菜蛾種群的發(fā)生存在年度間的差異，對不同藥劑抗藥性水平也存在年度間差異。因此，長期監(jiān)測小菜蛾發(fā)生規(guī)律和抗藥性水平，因地制宜制定區(qū)域性小菜蛾科學(xué)合理的用藥措施，可能是解決問題的關(guān)鍵。本研究通過7年滇西菜區(qū)小菜蛾田間種群動態(tài)和抗藥性監(jiān)測研究，并提出滇西菜區(qū)小菜蛾綜合防控建議，如每年2-5月加大性誘劑和粘蟲板的使用，壓低成蟲的蟲口基數(shù)；3-6月份選用茚蟲威和氯蟲苯甲酰胺等藥劑防控小菜蛾卵和低齡幼蟲；7-10月根據(jù)田間的發(fā)生情況適當(dāng)防控1～2次，有計(jì)劃的輪換選用溴蟲腈、茚蟲威、氯蟲苯甲酰胺和多殺菌素進(jìn)行防控，每季最多使用2次；全年注重菜田的生態(tài)調(diào)控，推薦種植蜜源植物(如菜心、芥菜等)，保護(hù)小菜蛾天敵可切實(shí)減輕小菜蛾為害。