劉 敏，孫程鵬，黃海廣，劉愛萍*，韓海斌*

(1. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院草原研究所，呼和浩特 010010；2. 內(nèi)蒙古自治區(qū)林業(yè)科學(xué)研究院，呼和浩特 010000)

滯育(diapause)是節(jié)肢動(dòng)物中廣泛存在的一種適應(yīng)不利生存環(huán)境的遺傳現(xiàn)象(Tauberetal., 1986; Saunders, 2012)。滯育對(duì)于昆蟲來說，有著積極的意義。昆蟲可以通過進(jìn)入滯育狀態(tài)來度過不良環(huán)境，從而使個(gè)體在不利條件下仍能繼續(xù)存活，還可以保持種群發(fā)育整齊，使交配率得以提高，以確保種群的繁衍(王滿囷和李周直, 2004)。滯育的昆蟲，在較長一段時(shí)間內(nèi)會(huì)處于發(fā)育緩慢或發(fā)育停滯的狀態(tài)，具體表現(xiàn)為不食不動(dòng)。環(huán)境的變化會(huì)引起昆蟲體內(nèi)生化物質(zhì)的改變，正是由于這樣的原因，才導(dǎo)致了昆蟲發(fā)育速度的減緩(徐衛(wèi)華, 2008)。昆蟲的滯育與生化物質(zhì)的種類及濃度密切相關(guān)，這些生化物質(zhì)包括糖、醇類物質(zhì)、蛋白質(zhì)、酶等。當(dāng)昆蟲處于不利于其生存的環(huán)境條件，這些生化物質(zhì)能夠?yàn)闄C(jī)體的發(fā)育需求提供保障(王滿囷和李周直, 2004)。有研究認(rèn)為，滯育和滯育解除可以依靠昆蟲體內(nèi)生化物質(zhì)濃度的變化來進(jìn)行區(qū)分(高玉紅等, 2006)。明確茶足柄瘤蚜繭蜂Lysiphlebustestaceipes滯育過程中體內(nèi)生化物質(zhì)濃度的變化和保護(hù)酶活性的差異，為進(jìn)一步探索茶足柄瘤蚜繭蜂滯育調(diào)控的分子機(jī)制提供依據(jù)。

作為重要的能源物質(zhì)，糖類與昆蟲的生命活動(dòng)密不可分，同時(shí)糖類也是一些代謝途徑中的中間產(chǎn)物。研究發(fā)現(xiàn)，糖類物質(zhì)與昆蟲滯育也存在著一定的關(guān)系，糖原與海藻糖在滯育階段就有明顯變化。滯育狀態(tài)的昆蟲，體內(nèi)的主要能源物質(zhì)就是糖原，而糖原也重要的抗凍保護(hù)劑；海藻糖在維持蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定與保持細(xì)胞膜完整方面起到重要作用(任小云等, 2016)。隨著滯育時(shí)長的變化，昆蟲體內(nèi)的糖類物質(zhì)也會(huì)發(fā)生變化。糖原濃度在煙蚜繭蜂Aphidiusgifuensis滯育期間呈線性下降，海藻糖濃度呈倒“U”型變化(李玉艷, 2011)。鞭角華扁葉蜂Chinolydaflagellicornis在滯育過程中，血淋巴中的糖原逐漸減少，海藻糖濃度逐漸增加，在滯育前期，海藻糖與糖原相互轉(zhuǎn)化，同時(shí)發(fā)現(xiàn)滯育階段及溫度與這種轉(zhuǎn)化關(guān)系有關(guān)(王滿囷和李周直, 2002)。斑蛾Zygaentrlfolii進(jìn)入滯育后糖原是最重要的能源物質(zhì)，在滯育蟲體中糖原濃度是非滯育蟲體的2倍多(Wipkingetal., 1995)。糖原是棉鈴蟲Helicoverpaarmigera滯育蛹生命活動(dòng)的主要能量來源，隨著滯育強(qiáng)度的深入，糖原濃度逐漸降低(張韻梅, 1994)。

昆蟲在滯育期間通過積累甘油、山梨醇等醇類物質(zhì)來實(shí)現(xiàn)過冷卻點(diǎn)的降低、細(xì)胞膜的固定、滲透壓的減少，以此來維持內(nèi)穩(wěn)態(tài)，使蟲體免受低溫?fù)p傷(Baust, 1982)。在滯育昆蟲體內(nèi)，甘油是變化最明顯的醇類物質(zhì)之一，也是重要的抗凍保護(hù)劑，使昆蟲能夠抵御低溫環(huán)境(陳永杰, 2005)。桑螟Diaphaniapyloalis幼蟲體內(nèi)甘油濃度從越冬早期到越冬末期呈現(xiàn)先升高后降低的現(xiàn)象(陳永杰, 2005)。非滯育灰飛虱Laodelphaxstriatellus幼蟲體內(nèi)的甘油濃度明顯低于滯育幼蟲，通過提高甘油濃度來抵抗滯育期間的低溫(宋菁菁等, 2017)。但有研究顯示，有些昆蟲在滯育期間并不會(huì)合成甘油，甘油的積累并不是昆蟲滯育所必需的(Joneetal., 1984)。對(duì)歐洲玉米螟Ostrinianubilalis低溫誘導(dǎo)的分析顯示，甘油累積的能力并不是所有過程的固有屬性，王智渝(1998)等對(duì)滯育和非滯育棉鈴蟲蛹的甘油濃度展開對(duì)比，發(fā)現(xiàn)二者甘油濃度無明顯區(qū)別，在滯育期間不存在甘油積累現(xiàn)象。

不同滯育昆蟲體內(nèi)山梨醇的濃度變化也不相同。隨著滯育時(shí)長的增加，大斑芫菁Mylabrisphalerata的山梨醇濃度呈增加趨勢(朱芬等, 2008)。越冬過程中的麥紅吸漿蟲Sitodiplosismosellana，隨環(huán)境溫度下降，山梨醇濃度呈現(xiàn)逐漸增加的發(fā)展趨勢(王洪亮, 2007)。桃小食心蟲Carposinaniponensis在整個(gè)滯育過程中，僅在15℃條件下處理45 d和5℃條件下處理15 d能夠檢測到山梨醇，猜測可以通過山梨醇是否存在定性評(píng)價(jià)該蟲的滯育深度(丁惠梅等, 2011)。

蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者，處于滯育狀態(tài)的昆蟲為提高抵御惡劣環(huán)境的能力，通常會(huì)通過增加蛋白濃度來達(dá)到保護(hù)自身的目的。對(duì)棉鈴蟲進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，進(jìn)入滯育后，血淋巴中的蛋白濃度平穩(wěn)增加，脂肪體中的蛋白卻呈現(xiàn)先上升緩慢，后顯著下降(王方海等, 1998)。滯育棉鈴蟲體內(nèi)的蛋白濃度要顯著高于非滯育蟲態(tài)，在化蛹后的15～60 d內(nèi)，蛋白質(zhì)濃度始終處于比較平穩(wěn)的狀態(tài)，說明蛋白濃度與棉鈴蟲滯育的發(fā)生與解除密切相關(guān)(Salama and Miller, 1992)，由此推測蛋白濃度與其它昆蟲的滯育也相關(guān)。

目前對(duì)于昆蟲的保護(hù)酶系的研究主要集中在CAT、POD以及SOD，在昆蟲體內(nèi)的這幾種酶在生長發(fā)育、代謝活動(dòng)、抗逆性等方面具有重要作用，可以保護(hù)昆蟲順利越冬(Felton and Summers, 1995)。有研究顯示，松黃葉蜂Neodiprionsertifer在越夏期間，滯育蛹中的過氧化氫酶活性降低(Trofimov, 1975)；對(duì)黑紋粉蝶Pierismelete的滯育展開分析注意到，與非滯育蛹進(jìn)行比較，滯育蛹體內(nèi)的過氧化氫酶與過氧化物酶活力明顯更低(薛芳森, 1996; 1997)；在對(duì)二化螟Chilosuppressalis進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，與非滯育幼蟲相比，滯育蟲體內(nèi)的過氧化氫酶、過氧化物酶、超氧化物歧化酶3種酶活性較高(林煒等, 2007)；草地螟Loxostegesticticalis在滯育過程中上述3種酶活性會(huì)提高，以順利度過惡劣環(huán)境(張曉燕等, 2015)。

目前對(duì)于茶足柄瘤蚜繭蜂的滯育研究中，涉及生理生化物質(zhì)的研究較少，其滯育的生理機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)對(duì)茶足柄瘤蚜繭蜂滯育期間的生理生化物質(zhì)進(jìn)行測定，著重分析與非滯育蟲態(tài)相比，這些生理生化物質(zhì)的改變，以期為深入進(jìn)行滯育研究提供一定的指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

寄生性天敵茶足柄瘤蚜繭蜂、寄主蚜蟲苜蓿蚜AphiscraccivoraKoch.采自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院草原研究所沙爾沁基地，供試寄主植物為蠶豆Viciafaba。

苜蓿蚜采自基地的羊柴Hedysarummongolicum植株上，并轉(zhuǎn)接在室內(nèi)的水培蠶豆苗上繁殖，接蟲后對(duì)蠶豆苗進(jìn)行籠罩(100目防蟲網(wǎng)籠，55 cm×55 cm×55 cm)，確保苜蓿蚜未被天敵寄生。試驗(yàn)用苜蓿蚜2～3齡若蚜作為寄主，在溫室內(nèi)飼養(yǎng)5代以上作為供試蟲源。

從基地采集被寄生的苜蓿蚜僵蚜，從中挑取未羽化破殼的僵蚜置于人工氣候箱溫度25℃±1℃，相對(duì)濕度70%±1%，光周期L ∶D=14 h ∶10 h條件下培養(yǎng)，待蜂羽化后，挑選茶足柄瘤蚜繭蜂轉(zhuǎn)移至試管(長10 cm×直徑3 cm)內(nèi)，用20%蜂蜜水作為補(bǔ)充營養(yǎng)，接入具有苜蓿蚜的蠶豆苗上，建立茶足柄瘤蚜繭蜂種群作為供試蟲源，并在室溫下用苜蓿蚜有效擴(kuò)繁10代以上。取羽化24 h內(nèi)的成蜂待用。

1.2 滯育蛹與非滯育蛹的獲取

在室溫下養(yǎng)蟲籠中將剛羽化成蜂按1 ∶100的蜂蚜比釋放成對(duì)茶足柄瘤蚜繭蜂。根據(jù)試驗(yàn)前期研究可知，苜蓿蚜若蚜被茶足柄瘤蚜繭蜂寄生后，寄生蜂卵繼續(xù)發(fā)育120 h，此時(shí)僵蚜體內(nèi)寄生蜂處于高齡幼蟲(3～4齡)階段，高齡幼蟲是茶足柄瘤蚜繭蜂感受到滯育訊號(hào)的敏感蟲態(tài)，將此時(shí)的僵蚜放入人工氣候箱中進(jìn)行滯育誘導(dǎo)。高齡幼蟲處于滯育環(huán)境條件時(shí)，并不會(huì)立刻停止發(fā)育，而是繼續(xù)發(fā)育一段時(shí)間，經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，當(dāng)發(fā)育至蛹時(shí)，便不再繼續(xù)發(fā)育(孫程鵬, 2008)。

本試驗(yàn)中，誘導(dǎo)茶足柄瘤蚜繭蜂滯育的溫光組合為，溫度8℃、光周期L ∶D=8 h ∶16 h，誘導(dǎo)時(shí)長為30 d、45 d、60 d、75 d，共設(shè)4個(gè)滯育處理組，每個(gè)處理30頭蛹。選取經(jīng)過滯育誘導(dǎo)的僵蚜進(jìn)行解剖，對(duì)茶足柄瘤蚜繭蜂蛹進(jìn)行收集，以獲得滯育組樣品，將解剖出的茶足柄瘤蚜繭蜂活蛹放入液氮中速凍暫時(shí)保存，以獲得滯育組樣品，將樣品放入-80℃冰箱中保存，以備使用；苜蓿蚜若蚜被茶足柄瘤蚜繭蜂寄生后，放置在25℃±0.5℃、RH 70%±5%、光周期L ∶D=14 h ∶10 h、光照強(qiáng)度8 800 Lx(人工氣候箱，上海一恒公司MGC-HP系列)條件下，寄生蜂卵繼續(xù)發(fā)育168 h(此時(shí)蚜繭蜂處于蛹態(tài))，將正常發(fā)育組樣本記為滯育處理0 d，以方便后續(xù)統(tǒng)計(jì)。設(shè)置1個(gè)非滯育處理組，每個(gè)處理30頭蛹。對(duì)僵蚜進(jìn)行解剖，挑選飽滿、有活力的蛹作為正常發(fā)育組樣品放入液氮中速凍暫時(shí)保存，作為正常發(fā)育組樣品，將收集好的樣品放入-80℃冰箱中保存，方便后續(xù)試驗(yàn)使用。

1.3 茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體糖類和醇類的提取與測定

將收集好的滯育蛹與正常發(fā)育蛹樣品各30頭從冰箱中取出，用蒸餾水對(duì)蟲體進(jìn)行沖洗，體表水分用吸水紙吸干備用。對(duì)蛹體稱重并記錄，蟲體質(zhì)量(g) ∶提取液體積(mL)=1 ∶5，倒入研缽中對(duì)蛹進(jìn)行研磨，將勻漿冰浴，將該組織勻漿在4℃、8 000g情況下，離心10 min，取上清液。參照試劑盒說明書對(duì)5組樣品進(jìn)行糖類和醇類的測定，每組樣品重復(fù)測定3次。

1.4 茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體總蛋白濃度的提取與測定

將收集好的滯育蛹與正常發(fā)育蛹樣品各30頭從冰箱中取出，放于2 mL離心管中稱重并記錄，每0.1 g樣品中加入1 000 μL工作液，倒入研缽中對(duì)蛹進(jìn)行研磨，用勻漿器在冰上勻漿，冰浴10 min，設(shè)離心機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)速度為8 000 r/min，離心10 min，取上清液。根據(jù)SOD、CAT和POD試劑盒(蘇州科銘生物技術(shù)公司)說明書對(duì)試樣完成測定，每組樣品重復(fù)測定3次。

1.5 酶液提取與保護(hù)酶活性測定

將收集好的滯育蛹與正常發(fā)育蛹樣品各30頭從冰箱中取出，放于2 mL離心管中稱重并記錄，倒入研缽中加入液氮進(jìn)行研磨，蟲體質(zhì)量(g) ∶磷酸鹽緩沖溶液(0.05 mol/L，pH 7.0)體積(mL)=1 ∶9，冰浴勻漿，設(shè)置離心機(jī)轉(zhuǎn)速為5 000 rpm/min，在4℃下離心10 min，取上清液即為酶液。對(duì)SOD活性來進(jìn)行測定時(shí)，將勻漿稀釋10倍;對(duì)POD及CAT完成活性測定時(shí)，直接用上清液。根據(jù)蛋白定量測試盒說明書對(duì)樣品進(jìn)行總蛋白測定，每組樣品重復(fù)測定3次。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

運(yùn)用DPS統(tǒng)計(jì)分析軟件完成數(shù)據(jù)分析和模型模擬，使用Duncan’s氏新復(fù)極差法完成差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 滯育期間茶足柄瘤蚜繭蜂糖類濃度的變化

2.1.1滯育期間茶足柄瘤蚜繭蜂總糖濃度的變化

滯育期間的茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)總糖濃度要高于非滯育狀態(tài)下蛹體內(nèi)的總糖濃度。在5個(gè)處理中，滯育30 d時(shí)總糖濃度最高，平均濃度為120.47 μg/mg，隨著滯育時(shí)間的延長，總糖濃度逐漸降低(圖1)。

圖1 不同滯育時(shí)間下茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)總糖濃度Fig.1 Contents of total sugars of the diapausing pupa of Lysiphlebus testaceipes注：圖中數(shù)據(jù)為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤，不同字母者表示不同滯育時(shí)間之間總糖濃度差異顯著(Duncan’s氏新復(fù)極差法，P<0.05)，下同。Note: Data in the figure were mean±standard error. Different letters meant that there was significant difference in total sugar concentration between different diapause times (Duncan’s new multiple range test, P<0.05), same below.

2.1.2滯育期間茶足柄瘤蚜繭蜂海藻糖濃度的變化

與其它4個(gè)滯育組處理相比，非滯育的茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)海藻糖濃度最低，為5.62 μg/mg，且隨著滯育時(shí)間的延長，海藻糖濃度呈現(xiàn)增加趨勢，當(dāng)滯育時(shí)長為75 d時(shí)，海藻糖濃度最高，為15.06 μg/mg。由此可以發(fā)現(xiàn)，在滯育期間，茶足柄瘤蚜繭蜂屬海藻糖累積型(圖2)。

圖2 不同滯育時(shí)間下茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)海藻糖濃度Fig.2 Contents of trehalose of the diapausing pupa of Lysiphlebus testaceipes

2.1.3滯育過程中茶足柄瘤蚜繭蜂糖原濃度的變化

滯育蛹體內(nèi)的糖原濃度高于非滯育蛹，且隨著滯育時(shí)間的延長，糖原濃度逐漸減少，與滯育蛹體內(nèi)的海藻糖濃度變化呈相反的發(fā)展趨勢，茶足柄瘤蚜繭蜂在滯育30 d時(shí)，糖原濃度最高，約為非滯育個(gè)體的5倍多，當(dāng)滯育時(shí)間達(dá)到75 d時(shí)，與非滯育個(gè)體相比，糖原濃度無顯著差異(圖3)。

圖3 不同滯育時(shí)間下茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)糖原濃度Fig.3 Contents of glycogen of the diapausing pupa of Lysiphlebus testaceipes

2.2 滯育時(shí)間對(duì)茶足柄瘤蚜繭蜂醇類代謝的影響

2.2.1滯育過程中茶足柄瘤蚜繭蜂甘油濃度的變化

甘油在非滯育蛹體內(nèi)濃度最低，為3.60 μg/mg，隨著滯育時(shí)間的增加，甘油濃度也呈現(xiàn)上升趨勢，當(dāng)滯育75 d時(shí)，甘油濃度最高，為16.16 μg/mg，是非滯育蛹的4倍多(圖4)。

圖4 不同滯育時(shí)間下茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)甘油濃度Fig.4 Contents of glycerol of the diapausing pupa of Lysiphlebus testaceipes

2.2.2滯育過程中茶足柄瘤蚜繭蜂山梨醇濃度的變化

隨著滯育時(shí)間的增加，山梨醇的濃度出現(xiàn)先增加后減少的趨勢，當(dāng)滯育45 d時(shí)，出現(xiàn)山梨醇濃度的最大值，82.55 μg/mg?？傮w來看，非滯育蛹體內(nèi)的山梨醇濃度低于滯育蟲體，但與滯育30 d相比，濃度差異不大。同時(shí)，滯育60 d與75 d的蛹，山梨醇濃度也無差異差異(圖5)。

圖5 不同滯育時(shí)間下茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)山梨醇濃度Fig.5 Contents of sorbitol of the diapausing pupa of Lysiphlebus testaceipes

2.3 滯育時(shí)長對(duì)茶足柄瘤蚜繭蜂蛋白濃度的變化

非滯育的茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)的蛋白濃度與滯育組的4個(gè)處理相比，非滯育組顯著高于滯育組。隨著滯育時(shí)間的增加，蛋白濃度越來越低。當(dāng)滯育誘導(dǎo)時(shí)間為30 d時(shí)，蛋白濃度仍有18.31 μg/mg，但是當(dāng)滯育時(shí)間延長到75 d時(shí)，蛋白濃度僅有8.80 μg/mg(圖6)。

圖6 不同滯育時(shí)間下茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)蛋白濃度Fig.6 Contents of protein of the diapausing pupa of Lysiphlebus testaceipes

2.4 滯育時(shí)間對(duì)茶足柄瘤蚜繭蜂體內(nèi)保護(hù)酶活力的影響

非滯育蛹體內(nèi)POD、SOD、CAT3種保護(hù)酶活性均最低，隨著滯育時(shí)間的延長，活性均呈現(xiàn)上升趨勢(表1)。

表1 不同滯育時(shí)間下茶足柄瘤蚜繭蜂體內(nèi)的保護(hù)酶活性Table 1 Activities of protective enzymes of of the diapausing pupa of Lysiphlebus testaceipes

3 結(jié)論與討論

昆蟲在滯育期間代謝減弱，但仍需要大量能源物質(zhì)來維持基本的生命活動(dòng)，包括糖、醇、蛋白質(zhì)等物質(zhì)。有研究顯示，麥紅吸漿蟲在不同滯育年份下，滯育蟲態(tài)幼蟲，體內(nèi)的總糖濃度無顯著差異，表明該蟲在滯育狀態(tài)下，耗能極少，從滯育過程中的能量消耗來看，能夠證明該蟲滯育12年的可能性(仵均祥和袁鋒, 2004)。在本實(shí)驗(yàn)中，非滯育茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)的糖原濃度顯著低于滯育30 d糖原濃度，說明了在滯育期間糖原與抵抗低溫有關(guān)。隨著滯育時(shí)長的增加，總糖的濃度呈現(xiàn)降低的趨勢，這也說明處于滯育狀態(tài)的茶足柄瘤蚜繭蜂蛹仍需要較多能量維持生命活動(dòng)。在茶足柄瘤蚜繭蜂滯育試驗(yàn)中觀察到的滯育持續(xù)時(shí)間約3個(gè)月，可能與其滯育過程中耗能較大有關(guān)。

在冬滯育的昆蟲中，大多數(shù)體內(nèi)都會(huì)有濃度較高的甘油，甘油能夠使昆蟲體液冰點(diǎn)降低，使其具有較高的抗凍能力(Barnes, 1969; Wu and Yuan, 2004)。本研究結(jié)果表明，滯育狀態(tài)下的茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)甘油濃度高于非滯育狀態(tài)，表明在滯育期間茶足柄瘤蚜繭蜂體內(nèi)合成大量甘油，推測滯育期間茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)甘油濃度的增加是蟲體自身應(yīng)對(duì)低溫而引起的體內(nèi)物質(zhì)代謝轉(zhuǎn)化，最終達(dá)到提高抗寒性的目的。而山梨醇隨滯育時(shí)間的延長呈現(xiàn)濃度先增加后減少的趨勢，推測在糖醇轉(zhuǎn)化的過程中可能存在某種障礙，而使滯育時(shí)間為45～60 d的山梨醇濃度降低，具體原因需進(jìn)一步研究。

處于滯育狀態(tài)的多數(shù)昆蟲是消耗蛋白質(zhì)的，或?qū)⒌鞍踪|(zhì)轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)來參與一些代謝過程(Denlinger and Lee, 2010)。在本次實(shí)驗(yàn)中也得出了類似結(jié)論，非滯育茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)有較高濃度的蛋白質(zhì)，而在滯育情況下，蛹體內(nèi)蛋白濃度降低，可能是為抵御不利環(huán)境而將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)，提供能量。而草地螟幼蟲、棉紅鈴蟲在滯育期間蛋白濃度會(huì)增加，從而提高蟲體的防護(hù)能力，以順利度過滯育階段，因此在滯育過程中需要更多地蛋白來滿足正常生命活動(dòng)(Salama and Miller, 1992; 張健華等, 2012)。

昆蟲體內(nèi)的POD、CAT、SOD是重要的防御系統(tǒng)保護(hù)酶，處于滯育狀態(tài)的昆蟲通過調(diào)節(jié)這些酶的活性來保護(hù)自身在不利條件下能夠繼續(xù)生存。研究發(fā)現(xiàn)，CAT、SOD和POD在滯育的幼蟲體內(nèi)，隨著滯育時(shí)長的延長，酶活性會(huì)呈現(xiàn)增強(qiáng)趨勢(楊光平, 2013)。在滯育二化螟幼蟲中發(fā)現(xiàn)，這3種酶的活性均高于非滯育幼蟲(張曉燕等, 2015)。本研究中，POD，CAT和SOD這3種酶在滯育過程中，隨著滯育時(shí)間的延長，活性會(huì)逐漸增強(qiáng)，當(dāng)滯育時(shí)間達(dá)到60 d時(shí)，酶活性最高，昆蟲通過調(diào)節(jié)這3種保護(hù)酶的活性達(dá)到自我保護(hù)的作用。

本研究測定了滯育與非滯育茶足柄瘤蚜繭蜂蛹體內(nèi)的總糖、海藻糖、糖原、甘油、山梨醇、總蛋白的濃度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，總糖、海藻糖、甘油、總蛋白濃度在滯育蛹與非滯育蛹中存在顯著差異，而糖原與山梨醇則沒有明顯差異。在茶足柄瘤蚜繭蜂滯育過程中，滯育時(shí)間的不同，蟲體內(nèi)的生理生化物質(zhì)的濃度、種類也不完全相同，這些物質(zhì)的變化，與在逆境下保證蟲體的生存密切相關(guān)，通過物質(zhì)濃度變化的幅度，可以衡量茶足柄瘤蚜繭蜂蛹的抗寒性能力，但上述物質(zhì)對(duì)滯育昆蟲所起的作用，以及濃度發(fā)生變化的原因與變化機(jī)制仍需要進(jìn)行進(jìn)一步的研究。