付春芳 趙鑫

肺結(jié)核是一種因結(jié)核分枝桿菌感染引起的慢性傳染性疾病,該病具有強(qiáng)烈傳染性,除肺臟外還可累及全身多個(gè)器官,對(duì)人體生命健康構(gòu)成巨大威脅。肺結(jié)核通常呈慢性發(fā)病,極少患者呈急性發(fā)病,病理學(xué)研究證實(shí)［1］,肺結(jié)核主要病理特點(diǎn)為肺組織的干酪樣壞死,最終發(fā)展為肺空洞,疾病發(fā)展期間患者可見(jiàn)咳嗽、低熱、全身無(wú)力等癥狀,隨著病情進(jìn)展,患者可出現(xiàn)咯血等氣道出血癥狀,對(duì)生活質(zhì)量產(chǎn)生影響同時(shí)還造成較大經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。對(duì)于肺結(jié)核患者而言,進(jìn)行早期治療干預(yù)、對(duì)病情進(jìn)行有效評(píng)估對(duì)于患者的預(yù)后具有重要意義。相關(guān)研究證實(shí)［2］,結(jié)核分枝桿菌屬于一種細(xì)胞內(nèi)病原菌,人體血清中產(chǎn)生的抗體較難與菌體形成免疫復(fù)合物,因此細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)在機(jī)體抵抗結(jié)核分枝桿菌過(guò)程中具有重要作用。CD4+、CD8+、CD3+淋巴細(xì)胞是評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo),多項(xiàng)研究者證實(shí)［3,4］,肺結(jié)核患者的病情發(fā)展及疾病嚴(yán)重程度與上述指標(biāo)具有明顯的相關(guān)性。降鈣素原(procalcitonin,PCT)作為感染性疾病常用的檢測(cè)指標(biāo),已被廣泛應(yīng)用于炎癥性免疫性疾病的診斷及病情評(píng)估。前清蛋白(prealbumin,PA)是一種合成于肝臟的血漿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,已被證實(shí)與多種呼吸系統(tǒng)疾病相關(guān),同時(shí)也可作為評(píng)價(jià)人體營(yíng)養(yǎng)狀況的指標(biāo)之一［5］。本研究中對(duì)肺結(jié)核患者免疫功能及PCT、PA 進(jìn)行檢測(cè),與健康者進(jìn)行比較,同時(shí)根據(jù)患者病情發(fā)展情況進(jìn)行分組,探討免疫功能指標(biāo)及PCT、PA 在肺結(jié)核患者中的臨床意義,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年6 月～2020 年6 月本院收治的55例肺結(jié)核患者作為肺結(jié)核組,年齡18～76歲,平均年齡(43.2±14.8)歲；男30 例,25 例；平均患病時(shí)間(8.2±3.5)個(gè)月。同期選取50 例體檢健康者作為對(duì)照組,年齡18～78歲,平均年齡(42.8±13.6)歲；男28 例,女22 例。兩組研究對(duì)象的年齡、性別等一般資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。肺結(jié)核組納入標(biāo)準(zhǔn)：①參照《肺結(jié)核診斷和治療指南》［6］(中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì)制定)符合肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)；②經(jīng)結(jié)核菌素試驗(yàn)、X 線檢查或痰涂片檢測(cè)確診；③簽訂知情同意書。肺結(jié)核組排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并感染性、血液系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)疾病者；②伴有嚴(yán)重臟器功能受損者；③廣泛耐藥肺結(jié)核者；④近1 個(gè)月內(nèi)服用免疫抑制劑者；⑤妊娠期或哺乳期婦女。

1.2 方法 對(duì)照組受試者于體檢日,肺結(jié)核組患者于治療前后,采集5 ml 靜脈血置于乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)抗凝管,采用流式細(xì)胞儀測(cè)定T 淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)。另取5 ml 靜脈血,采用低速離心機(jī)進(jìn)行離心,取上清液置于-80℃冰箱內(nèi)保存,采用免疫透射比濁法檢測(cè)血清PA 水平,雙抗體夾心免疫發(fā)光法檢測(cè)血清PCT 水平。

肺結(jié)核組患者給予藥物治療,均口服異煙肼片(湖北廣濟(jì)藥業(yè)股份有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H42022809),0.3 g/d；吡嗪酰胺(特一藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H44020947),1.5 g/d；鹽酸乙胺丁醇片(廣東華南藥業(yè)集團(tuán)有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H44020758),0.75 g/d；利福噴丁膠囊(無(wú)錫福祈制藥有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H10940012),0.45 g/d,治療時(shí)間為2周。痰結(jié)核桿菌轉(zhuǎn)陰設(shè)為轉(zhuǎn)歸組(42 例),痰結(jié)核桿菌未轉(zhuǎn)陰設(shè)為未轉(zhuǎn)歸組(13 例)。

1.3 觀察指標(biāo) 比較肺結(jié)核組與對(duì)照組的T淋巴細(xì)胞亞群及血清PA、PCT 水平。比較肺結(jié)核組不同轉(zhuǎn)歸患者的T 淋巴細(xì)胞亞群及血清PA、PCT 水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺結(jié)核組與對(duì)照組的T 淋巴細(xì)胞亞群比較 肺結(jié)核組CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平明顯低于對(duì)照組,CD8+水平明顯高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 肺結(jié)核組與對(duì)照組的T 淋巴細(xì)胞亞群比較()

表1 肺結(jié)核組與對(duì)照組的T 淋巴細(xì)胞亞群比較()

注：與對(duì)照組比較,aP<0.05

2.2 肺結(jié)核組與對(duì)照組的血清PCT、PA 水平比較肺結(jié)核組血清PCT 顯著高于對(duì)照組,血清PA 水平顯著低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 肺結(jié)核組與對(duì)照組的血清PCT、PA 水平比較()

表2 肺結(jié)核組與對(duì)照組的血清PCT、PA 水平比較()

注：與對(duì)照組比較,aP<0.05

2.3 肺結(jié)核組不同轉(zhuǎn)歸患者的T淋巴細(xì)胞亞群及血清PCT、PA 水平比較 轉(zhuǎn)歸組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及血清PA 水平明顯高于未轉(zhuǎn)歸組,CD8+、血清PCT 水平明顯低于未轉(zhuǎn)歸組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 肺結(jié)核組不同轉(zhuǎn)歸患者的T 淋巴細(xì)胞亞群及血清PCT、PA 水平比較()

表3 肺結(jié)核組不同轉(zhuǎn)歸患者的T 淋巴細(xì)胞亞群及血清PCT、PA 水平比較()

注：與未轉(zhuǎn)歸組比較,aP<0.05

3 討論

肺結(jié)核作為威脅公共衛(wèi)生安全的重要傳染性疾病,其發(fā)病率在近年來(lái)有逐漸回升的趨勢(shì)［7］。結(jié)核分枝桿菌在進(jìn)入人體后主要引發(fā)人體內(nèi)細(xì)胞介導(dǎo)的非特異性反應(yīng)及特異性免疫炎癥,在結(jié)核分枝桿菌數(shù)量不斷增長(zhǎng)的同時(shí),其毒性也在不斷增加,炎癥介質(zhì)反應(yīng)及細(xì)胞免疫在肺結(jié)核的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要作用。目前尚未完全闡明肺結(jié)核的發(fā)病機(jī)制,關(guān)于肺結(jié)核發(fā)病機(jī)制的研究指出［8］,T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫是機(jī)體抵抗結(jié)核分枝桿菌感染的主要措施,也是機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌感染防御的主要免疫機(jī)制。其中CD4+T 淋巴細(xì)胞發(fā)揮主要作用,研究顯示［9］,CD4 分子為一種單鏈糖蛋白結(jié)構(gòu),分布于細(xì)胞膜表面,在多種T 淋巴細(xì)胞膜上均有表達(dá),此外也分布于少數(shù)B 細(xì)胞、胸腺細(xì)胞及單核巨噬細(xì)胞表面。CD4+T 淋巴細(xì)胞具有放大免疫反應(yīng)的作用,通過(guò)分泌的多種細(xì)胞因子可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞活化、增強(qiáng)B 淋巴細(xì)胞抗體產(chǎn)生功能。此外有研究證實(shí)［10］,CD4+T 淋巴細(xì)胞屬于一種誘導(dǎo)/輔助T 淋巴細(xì)胞,能夠輔助及誘導(dǎo)具有細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞前身轉(zhuǎn)化成為成熟細(xì)胞的作用。隨著目前關(guān)于結(jié)核病研究的不斷深入,多項(xiàng)研究證實(shí)了CD8+T 淋巴細(xì)胞在防御結(jié)核菌感染時(shí)的功能。CD8+T 淋巴細(xì)胞是一種T 殺傷/抑制細(xì)胞,其發(fā)揮的作用與CD4+T淋巴細(xì)胞相反,CD8+T 淋巴細(xì)胞通過(guò)分泌抑制性因子發(fā)揮負(fù)向調(diào)節(jié)作用,能夠抑制B 淋巴細(xì)胞及CD4+T 淋巴細(xì)胞的功能,進(jìn)而達(dá)到抑制細(xì)胞免疫及抗體形成的作用。在一般情況下機(jī)體的CD8+T 淋巴細(xì)胞與CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)量保持一定的比例,二者相互促進(jìn)及制約,使機(jī)體免疫功能保持平衡。CD3 分子幾乎表達(dá)于所有成熟的T 淋巴細(xì)胞表面,研究顯示［11］,CD3 分子由6 條不同肽鏈組成,其中δ、γ 及ε 鏈主要功能是激活T 淋巴細(xì)胞,發(fā)揮信號(hào)傳導(dǎo)作用,達(dá)到誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫的目的,且不直接參與特異性抗原的識(shí)別過(guò)程。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道［12］,CD3+T 淋巴細(xì)胞的數(shù)量降低與CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)量降低具有密切聯(lián)系。在肺結(jié)核患者中通常可檢測(cè)到明顯的免疫紊亂,表現(xiàn)為細(xì)胞免疫功能的下降,CD4+T淋巴細(xì)胞與CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量比例失衡。本研究結(jié)果顯示,肺結(jié)核組CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平明顯低于對(duì)照組,CD8+水平明顯高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)量的下降提示結(jié)核桿菌的殺傷過(guò)程受到影響,機(jī)體無(wú)法將結(jié)核桿菌殺滅或局限,CD8+T 淋巴細(xì)胞數(shù)量的增加提示受抗原作用和溶解已吞噬結(jié)核桿菌的巨噬細(xì)胞功能增強(qiáng),機(jī)體結(jié)核桿菌釋放、擴(kuò)散及暴露,與目前文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致。

PCT 作為臨床常用的檢測(cè)感染性疾病的指標(biāo),在各種感染性疾病的早期即可檢出。相關(guān)研究證實(shí)［13］,PCT 表達(dá)水平會(huì)隨著肺結(jié)核患者的病情加重而增高。故臨床上常用PCT 作為延展性和感染性疾病的診斷及監(jiān)測(cè)指標(biāo),具有較好的敏感性及特異性,同時(shí)還能評(píng)估患者的預(yù)后。本研究結(jié)果顯示,肺結(jié)核組血清PCT 顯著高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與目前文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致［14］。PA 是一種由肝臟合成的低分子量血漿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,其不僅參與了機(jī)體的多種組織修復(fù)過(guò)程,同時(shí)具有一定的運(yùn)載功能,在呼吸系統(tǒng)疾病患者中表達(dá)水平異常。PA 表達(dá)水平一般不受免疫抑制、抗感染藥物、激素等因素的影響,被廣泛應(yīng)用于評(píng)估營(yíng)養(yǎng)不良及肝臟受損程度。目前研究證實(shí)［15］,PA 與機(jī)體C反應(yīng)蛋白類似,均是急性時(shí)相蛋白,半衰期短且與炎癥程度呈負(fù)相關(guān)。本研究結(jié)果顯示,肺結(jié)核組PA水平顯著低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。分析后認(rèn)為可能與以下因素有關(guān)：①PA 作為一種防御性物質(zhì),具有清除炎癥反應(yīng)過(guò)程中各種代謝物質(zhì)的作用,在此過(guò)程中被持續(xù)性消耗,故血液中表達(dá)水平逐漸降低。②肺結(jié)核可影響患者的呼吸功能,引起缺氧進(jìn)而導(dǎo)致肝臟受損,故PA合成受到影響,表現(xiàn)為水平下降。本研究中將不同疾病轉(zhuǎn)歸的患者進(jìn)行分組,結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)歸組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及血清PA 水平明顯高于未轉(zhuǎn)歸組,CD8+、血清PCT 水平明顯低于未轉(zhuǎn)歸組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示機(jī)體免疫功能指標(biāo)及PCT、PA 表達(dá)水平與患者病情的轉(zhuǎn)歸具有一定聯(lián)系,與目前文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致［15］。

綜上所述,肺結(jié)核患者免疫功能指標(biāo)及PCT、PA水平與健康者比較存在明顯異常,且與患者病情的轉(zhuǎn)歸具有一定聯(lián)系。