朱劉丹 趙夢(mèng)月

鄭州市疾病控制中心檢驗(yàn)科 (河南 鄭州 450000)

人類(lèi)免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)是致使人們感染艾滋病的主要原因，其傳播途徑包含血液傳播、性傳播、母嬰傳播等，一經(jīng)感染會(huì)破壞機(jī)體免疫功能，繼而造成機(jī)會(huì)性感染以及腫瘤等疾病，該病毒傳播速度較快，且治愈率較差，致死率較高。因此及早確診艾滋病患者，對(duì)防控艾滋病具有積極意義[1-3]。金標(biāo)快速檢測(cè)法檢測(cè)速度較快，3～20min即可完成檢測(cè)，對(duì)于急診患者友好度較高，但檢測(cè)時(shí)需使用新鮮血液樣本；時(shí)間分辨免疫法屬非放射微量分析技術(shù)，具有標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍較廣、自動(dòng)化檢測(cè)、可重復(fù)高等優(yōu)勢(shì)，且其篩查效率較高，但在臨床實(shí)際應(yīng)用時(shí)，常會(huì)檢出弱陽(yáng)性標(biāo)本；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)操作較為簡(jiǎn)便，所用試劑穩(wěn)定性更佳，且診斷限制較少，應(yīng)用價(jià)值較高。基于此，選取我院152例艾滋病患者，分析三種不同免疫檢驗(yàn)法診斷的可靠性。具體分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料本研究選取2018年1月至2020年2月我院收治艾滋病患者152例。

納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)免疫印痕跡法被確診為艾滋??；無(wú)肢體功能障礙或內(nèi)科疾??；意識(shí)清醒。排除標(biāo)準(zhǔn)：病情不穩(wěn)定；存在嚴(yán)重代謝異常疾??；存在嚴(yán)重精神疾病。男性83例，女性69例；年齡27～44歲，平均年齡(33.15±4.20)歲。

1.2 方法所有患者均行金標(biāo)快速檢測(cè)法、時(shí)間分辨免疫法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷。

1.2.1 金標(biāo)快速檢測(cè)法 選用購(gòu)自上海科華生物工程股份有限公司的金免疫試紙，抽取血液樣本，置于金免疫試紙加樣區(qū)，10s后，其被樣本全部浸沒(méi)，仔細(xì)查看試紙顏色變化，若結(jié)果顯示1條紅線，表示受檢者陰性；若結(jié)果顯示2條紅線，表示受檢者陽(yáng)性。

1.2.2 時(shí)間分辨免疫法 于清晨抽取3mL空腹靜脈血，以3000r/min的速度離心，置于低溫環(huán)境下冷藏待檢。選用購(gòu)自上海新波公司的Easy Cuta時(shí)間分辨免疫熒光儀檢測(cè)，并予以其配套試劑。

1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 于清晨抽取3mL空腹靜脈血，以3000r/min的速度離心，置于低溫環(huán)境下冷藏待檢。予以酶復(fù)合物稀釋液將血清稀釋?zhuān)缓筮M(jìn)行孵育、洗板、加底物共60min，予以Bio Tek ELx800自動(dòng)化酶免分析儀診斷。

1.3 觀察指標(biāo)(1)診斷結(jié)果，以免疫印痕跡法確診為“金標(biāo)準(zhǔn)”，統(tǒng)計(jì)金標(biāo)快速檢測(cè)法、時(shí)間分辨免疫法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的診斷結(jié)果。(2)診斷檢出率，對(duì)比金標(biāo)快速檢測(cè)法、時(shí)間分辨免疫法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的診斷敏感度、特異度、準(zhǔn)確度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0分析，計(jì)數(shù)資料n(%)表示，χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 診斷結(jié)果免疫印痕跡法診斷HIV真陽(yáng)性99例，真陰性53例；金標(biāo)快速檢測(cè)法診斷真陽(yáng)性82例，真陰性38例；時(shí)間分辨免疫法診斷真陽(yáng)性83例，真陰性39例；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷真陽(yáng)性92例，真陰性48例，見(jiàn)表1。

表1 診斷結(jié)果(例)

2.2 診斷檢出率酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)敏感度92.93%、特異度90.57%、準(zhǔn)確度92.11%較金標(biāo)快速檢測(cè)法82.83%、73.58%、78.95%，時(shí)間分辨免疫法83.84%、75.47%、80.26%高(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 診斷檢出率[n(%)]

3 討 論

雖我國(guó)醫(yī)療科技快速發(fā)展，但艾滋病仍為棘手病癥，而HIV則是導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生免疫力功能障礙，引發(fā)艾滋病的主要因素[4-6]。目前，臨床對(duì)其并無(wú)有效治療方法，且因該疾病傳染性較高，故社會(huì)當(dāng)前對(duì)其防治性重視度較高，只有及時(shí)將確診艾滋病的患者進(jìn)行有效隔離，才可避免其大范圍傳染，而可對(duì)艾滋病進(jìn)行準(zhǔn)確判斷的診斷方式便顯得尤為重要[7-8]。

金標(biāo)快速檢測(cè)法所用膠體金為紅色，在檢測(cè)期間安全性較高，且紅色標(biāo)記線的穩(wěn)定性較佳，檢驗(yàn)過(guò)程也相對(duì)簡(jiǎn)單，檢測(cè)血清的反應(yīng)時(shí)間＜30min，且其無(wú)須處理血液，可減少血液受濕度、溫度的影響，且在操作時(shí)無(wú)需儀器，但此方式的特異度較低，且血液樣本需維持新鮮狀態(tài)，具有局限性。時(shí)間分辨免疫法的自動(dòng)化操作程度較高，對(duì)于高通量、快速檢測(cè)較為友好，適宜大批量標(biāo)本篩查，可利用熒光強(qiáng)度，依據(jù)產(chǎn)物熒光強(qiáng)度以及相對(duì)應(yīng)熒光強(qiáng)度的比值，對(duì)反應(yīng)體系中所具有的分析物濃度進(jìn)行判斷，進(jìn)而可定量分析，且此種檢測(cè)方式并無(wú)放射性污染，操作流程較為簡(jiǎn)便，但具有時(shí)間局限性[9]。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)包含雙抗體夾心法、間接法，其中雙抗夾心法可用于大分子抗原檢測(cè)，而間接法可用于特定抗體檢測(cè)，但兩者的顯色反應(yīng)均較為清晰，肉眼可見(jiàn)，且因抗體或抗原的選擇性，抗原抗體結(jié)合位置，在空間構(gòu)型、化學(xué)結(jié)構(gòu)上具有一定互補(bǔ)關(guān)系，故檢出率較高，且其具有快速、易于標(biāo)準(zhǔn)化、簡(jiǎn)便、敏感等優(yōu)勢(shì)，故疾病判斷更為準(zhǔn)確，防治效果更佳[10]。本研究選取152例艾滋病患者作為研究對(duì)象予以金標(biāo)快速檢測(cè)法、時(shí)間分辨免疫法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)三種檢測(cè)方式檢測(cè)，結(jié)果顯示，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)敏感度92.93%、特異度90.57%、準(zhǔn)確度92.11%較金標(biāo)快速檢測(cè)法82.83%、73.58%、78.95%，時(shí)間分辨免疫法83.84%、75.47%、80.26%高(P＜0.05)。當(dāng)血清標(biāo)本中具有HIV抗體時(shí)，應(yīng)用金標(biāo)快速檢測(cè)法，其會(huì)線與金標(biāo)記結(jié)合，又因?qū)游鲎饔?，反?yīng)復(fù)合物會(huì)沿硝酸纖維膜逐漸向前移動(dòng)，而當(dāng)其與包被抗原相遇時(shí)，會(huì)產(chǎn)生Ag-Ab-Ag-Au復(fù)合物，于包被線上聚集，呈現(xiàn)出1條紅色沉淀線，而包被膜上還具有1條質(zhì)控線以作參照，故呈現(xiàn)出2條紅線時(shí)，即可判斷其為陽(yáng)性，但會(huì)存在一定漏診概率。時(shí)間分辨免疫法的檢測(cè)原理是基于雙抗原夾心的非競(jìng)爭(zhēng)免疫分析，可利用鑭系元素標(biāo)記抗體或抗原，并依據(jù)鑭系元素稀土螯合物熒光發(fā)光時(shí)間較長(zhǎng)的特點(diǎn)，延緩測(cè)量時(shí)間，使短壽命背景熒光衰變后，對(duì)螯合物熒光進(jìn)行測(cè)量，即可將非特異熒光干擾排除，進(jìn)行定量分析，但該方式檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)可予以抗體、酶二者結(jié)合，且并未對(duì)抗體免疫性反應(yīng)的特異性造成較大改變，不影響酶活性，而補(bǔ)充相應(yīng)底物，可使基質(zhì)水解呈色，使還原型氫體的顏色發(fā)生變化，由無(wú)色向有色進(jìn)行轉(zhuǎn)變，利用呈色反應(yīng)可察覺(jué)酶，且該檢測(cè)方式還可于細(xì)胞水平上呈現(xiàn)出抗體所在部位，在具有較高敏感度、特異性的同時(shí)，還可利用微克水平或納米水平給予定量，防止假陽(yáng)性，整體診斷結(jié)果較佳。

綜上所述，與金標(biāo)快速檢測(cè)法、時(shí)間分辨免疫法相比，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷HIV的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度更高，臨床應(yīng)用價(jià)值更高。