張稚淳 孫力超 孫秋月 田 古

1.北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100700；2.國家癌癥中心 國家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院分子腫瘤學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100021；3.國家癌癥中心國家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院國際交流處，北京 100021

肝癌是我國第四大常見惡性腫瘤，第二大致死惡性腫瘤[1]。目前，針對(duì)肝癌的治療手段主要包括手術(shù)切除、靶向治療、放化療、介入治療等，但這些治療手段療效有限，肝癌5 年生存率不到10%[2]。腫瘤干細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞中的一群特殊細(xì)胞，具有自我復(fù)制、多細(xì)胞分化和抵抗治療的能力[3]，腫瘤干細(xì)胞被認(rèn)為是腫瘤治療失敗、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵原因[4]。因此，肝癌干細(xì)胞（liver cancer stem cells，LCSCs）被認(rèn)為是最有希望的肝癌治療靶標(biāo)。為進(jìn)一步了解LCSCs 領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì)，本研究對(duì)近10 年Web of Science 數(shù)據(jù)庫收錄的LCSCs 領(lǐng)域的文獻(xiàn)進(jìn)行分析，以期為研究人員從事相關(guān)研究提供參考。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

數(shù)據(jù)來源于Web of Science 核心數(shù)據(jù)庫，檢索策略：#1 TS=（“l(fā)iver cancer”O(jiān)R“l(fā)iver carcinoma”O(jiān)R“l(fā)iver neoplasm”O(jiān)R“l(fā)iver tumor”O(jiān)R“hepatoma”O(jiān)R“hepatocellular carcinoma”O(jiān)R“Hepatocellular Cancer”O(jiān)R“HCC”O(jiān)R“hepatic cancer”O(jiān)R“hepatic neoplasm”O(jiān)R“hepatic tumor”）AND #2 TS=（“Neoplastic Stem Cells”O(jiān)R“Neoplastic Stem Cell*”O(jiān)R“Cancer Stemness”O(jiān)R“cancer stem cell*”O(jiān)R“tumor-initiating cell*”O(jiān)R“neoplastic stem like cell*”O(jiān)R“cancer stem like cell*”O(jiān)R CSC* OR“CSLC*”）；時(shí)間跨度：2011—2020 年；文獻(xiàn)類型：Article；語種：English；索引：SCI-EXPANDED。共檢索到1481 篇文獻(xiàn)。

1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

Web of Science 核心數(shù)據(jù)庫中檢索到1481 篇文獻(xiàn)，通過人工剔除無效文獻(xiàn)472 篇，對(duì)數(shù)據(jù)Web of Science 格式數(shù)據(jù)進(jìn)行去重。最終獲得1000 篇研究論文作為研究樣本，以“RefWorks”格式將文獻(xiàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)入CiteSpace（version 5.7.R5）[5]和VOSviewer[6]獲取LCSCs知識(shí)圖譜。設(shè)置每1 年為1個(gè)分區(qū)，時(shí)間跨度為2011—2020 年，利用VOSviewer 對(duì)國家、機(jī)構(gòu)、作者進(jìn)行可視化分析，采用CiteSpace 軟件對(duì)文獻(xiàn)進(jìn)行關(guān)鍵詞突現(xiàn)分析，結(jié)合Excel 軟件對(duì)檢索結(jié)果的年份、國家、機(jī)構(gòu)、作者、期刊、被引文獻(xiàn)及關(guān)鍵詞的頻次進(jìn)行統(tǒng)計(jì)性描述。

2 結(jié)果

2.1 年度發(fā)文量

2011—2020 年LCSCs 相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)表量為1000 篇，2011 年的發(fā)文量為30 篇，2018 年以前發(fā)文量持續(xù)增長，2018—2020 年發(fā)文量呈波動(dòng)式增長。LCSCs 相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)文量總體呈增長趨勢(shì)。見圖1。

2.2 國家網(wǎng)絡(luò)分析

全球共有46個(gè)國家開展LCSCs的相關(guān)研究，該領(lǐng)域發(fā)文量前5 位的國家分別是中國（702 篇，70.2%）、美國（163 篇，16.3%）、日本（104 篇，10.4%）、韓國（63 篇，0.63%）和意大利（28 篇，0.28%）。該領(lǐng)域中心性居于前5 位的國家分別是美國（0.51）、意大利（0.34）、法國（0.34）、中國（0.32）和日本（0.29）。運(yùn)行VOSviewer 設(shè)置頻次閾值為1，創(chuàng)建國家網(wǎng)絡(luò)地圖見圖2，國家網(wǎng)絡(luò)圖中有46個(gè)節(jié)點(diǎn)和678個(gè)鏈接，46個(gè)國家組成了7個(gè)集群。

2.3 機(jī)構(gòu)網(wǎng)絡(luò)分析

全球共有305個(gè)機(jī)構(gòu)開展LCSCs的相關(guān)研究，該領(lǐng)域發(fā)文量前5 位的研究機(jī)構(gòu)分別是第二軍醫(yī)大學(xué)（81 篇）、中山大學(xué)（47 篇）、復(fù)旦大學(xué)（46 篇）、香港大學(xué)（45 篇）和上海交通大學(xué)（33 篇）。該領(lǐng)域中心性排名前5 位的機(jī)構(gòu)分別是浙江大學(xué)（0.31）、復(fù)旦大學(xué)（0.18）、北京大學(xué)（0.17）、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院（0.16）和第二軍醫(yī)大學(xué)（0.14）。運(yùn)行VOSviewer 設(shè)置頻次閾值為5，創(chuàng)建機(jī)構(gòu)網(wǎng)絡(luò)地圖見圖3，在機(jī)構(gòu)網(wǎng)絡(luò)圖中有107個(gè)節(jié)點(diǎn)和1392個(gè)鏈接。107 所機(jī)構(gòu)組成了10個(gè)集群。

2.4 作者網(wǎng)絡(luò)分析

全球總共有438 位作者涉及LCSCs的相關(guān)研究，發(fā)文量前5 位的作者分別是Stephanie Ma（17 篇）、Taro Yamashita（15 篇）、Jia Fan（14 篇）、Hongyang Wang（14 篇）和Shuichi Kaneko（13 篇）。共同被引前5 位的作者分別是Taro Yamashita（657 次）、Stephanie Ma（562 次）、Zhen Fan Yang（314 次）、Josep M Llovet（262 次）和Tsutomu Chiba（234 次）。運(yùn)行VOSviewer設(shè)置頻次閾值為5，創(chuàng)建作者網(wǎng)絡(luò)地圖見圖4，在作者網(wǎng)絡(luò)圖中有185個(gè)節(jié)點(diǎn)和4772個(gè)鏈接。

2.5 期刊分布

1000 篇LCSCs 文獻(xiàn)總共分布于291 種期刊中。該領(lǐng)域發(fā)文量前5 位的期刊分別是Oncotarget（63 篇）、Hepatology（44 篇）、Cancer letters（38 篇）、PLoS One（36 篇）和Scientific reports（29 篇）。共被引前5 位的期刊分別是Hepatology（2391 次）、Cancer research（1796 次）、Gastroenterology（1272 次）、Nature（1267 次）和Cell（1093 次）。

2.6 被引文獻(xiàn)分析

運(yùn)行VOSviewer，進(jìn)行被引頻次統(tǒng)計(jì)，共同被引前5 位的參考文獻(xiàn)見表1。其中，Taro 等[7]2009 年發(fā)表的“EpCAM-positive hepatocellular carcinoma cells are tumor-initiating cells with stem/progenitor cell features”被引頻次最高。

表1 共被引前5 位的文獻(xiàn)

2.7 研究熱點(diǎn)分析

運(yùn)行VOSviewer，創(chuàng)建關(guān)鍵詞網(wǎng)絡(luò)圖見圖5，LCSCs 鑒定的干性標(biāo)志物的研究，調(diào)控LCSCs的轉(zhuǎn)錄因子、長鏈非編碼RNA、微小RNAs、癌基因和信號(hào)通路的研究，LCSCs 與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相互作用促進(jìn)轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究；LCSCs 防御藥物攻擊的耐受研究，靶向LCSCs的藥物治療研究，LCSCs的代謝重編程和有氧糖酵解的代謝研究是LCSCs 領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。

2.8 研究趨勢(shì)分析

運(yùn)行CiteSpace，在關(guān)鍵詞聚類的基礎(chǔ)上通過“Burstness”獲得突顯詞（圖6），LCSCs 干性研究-靶向LCSCs 治療研究-LCSCs 生物學(xué)機(jī)制研究是LCSCs 研究趨勢(shì)，靶向LCSCs的抑制劑研究是LCSCs的重點(diǎn)研究方向。

3 討論

我國不到30%的肝癌患者能夠早發(fā)現(xiàn)和早診斷[8]，晚期肝癌患者平均生存期不足1 年[9]。肝癌仍然是一項(xiàng)威脅我國居民健康的挑戰(zhàn)[10]。雖然，分子靶向治療[11]和化療[12]可用于部分肝癌患者，但臨床獲益仍不令人滿意。因此，探索新的肝癌全身治療方法至關(guān)重要。肝癌的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)是導(dǎo)致肝癌患者高死亡率的重要原因。腫瘤干細(xì)胞在腫瘤生長、轉(zhuǎn)移、耐藥、復(fù)發(fā)及預(yù)后中發(fā)揮重要作用，靶向LCSCs的治療手段將可能有效治療肝癌，有望提高肝癌的5 年生存率。因此，靶向LCSCs的研究成為了肝癌領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

通過CiteSpace 發(fā)現(xiàn)，近10 年的LCSCs 發(fā)文量呈增長趨勢(shì)，中國在該領(lǐng)域發(fā)文量居世界首位，占全球發(fā)文量的70.2%，中國投入了大量的資金和精力從事LCSCs的研究，表明LCSCs 是肝癌領(lǐng)域研究的重點(diǎn)。進(jìn)一步通過關(guān)鍵詞聚類分析LCSCs的研究熱點(diǎn)。Ma 等[13]從人類肝細(xì)胞系中鑒定和分離出表達(dá)CD133 表面表型的CSCs 群體。Yang 等[14]發(fā)現(xiàn)CD90 陽性肝細(xì)胞癌細(xì)胞是具有干/祖細(xì)胞特征的腫瘤起始細(xì)胞。Shan等[15]研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子NANOG 是肝癌中干細(xì)胞的生物標(biāo)志物，它可以通過IGF1R 信號(hào)通路維持干細(xì)胞自我更新。研究發(fā)現(xiàn)，LncHDAC2 通過激活Hedgehog 信號(hào)驅(qū)動(dòng)LCSCs的自我更新[16]。Nault 等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在肝細(xì)胞癌的基因型-表型關(guān)系中，p53 失活促進(jìn)了LCSCs的特征。Kuo 等[18]研究發(fā)現(xiàn)，OCT4和c-JUN的正反饋調(diào)節(jié)導(dǎo)致c-JUN 癌基因的持續(xù)表達(dá)，增強(qiáng)了肝癌細(xì)胞的干性。Huang 等[19]研究發(fā)現(xiàn)減弱Wnt/βcatenin 信號(hào)通路，可消除肝癌中索拉非尼耐藥的干細(xì)胞樣細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)，LCSCs 有利于糖酵解并抑制氧化磷酸化，以促進(jìn)干性和對(duì)治療的抵抗力[20]，用線粒體ROS 誘導(dǎo)劑處理的LCSCs 抑制自我更新能力[21]。基于以上研究和熱點(diǎn)分析發(fā)現(xiàn)LCSCs的鑒定，調(diào)控LCSCs的轉(zhuǎn)錄因子、癌基因和信號(hào)通路等是LCSCs領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。

通過關(guān)鍵詞突顯圖發(fā)現(xiàn)，靶向LCSCs的藥物治療研究是LCSCs 近幾年研究的重點(diǎn)。Liu 等[22]研究發(fā)現(xiàn)，一種新的苦參堿衍生物通過抑制PI3K/AKT 信號(hào)通路抑制肝癌細(xì)胞和LCSCs。Sun 等[23]研究發(fā)現(xiàn)，鹽霉素通過去磷酸化的FAK和ERK1/2 通路抑制LCSCs的遷移和侵襲。Maehara 等[24]研究發(fā)現(xiàn)，二甲雙胍通過AMPK-CEBPβ 通路調(diào)節(jié)肝癌細(xì)胞系中CD133的表達(dá)。Tsai 等[25]研究發(fā)現(xiàn)姜黃素通過抑制肝細(xì)胞癌中的AhR/ERK/SK1 信號(hào)傳導(dǎo)抑制轉(zhuǎn)移和癌癥干細(xì)胞的比例。Wang 等[26]研究發(fā)現(xiàn)，三氧化二砷通過靶向SRF/MCM7 復(fù)合物抑制LCSCs和轉(zhuǎn)移?；谝陨涎芯?，靶向調(diào)控LCSCs的基因或者信號(hào)通路是肝癌治療的新靶點(diǎn)。

綜上所述，LCSCs 是肝癌研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)方向，靶向LCSCs 治療肝癌的藥物研發(fā)將進(jìn)一步提高肝癌的臨床療效，成為臨床治療肝癌的新選項(xiàng)，在臨床上發(fā)揮更重要的作用。