張稚淳 孫力超 孫秋月 田 古

1.北京中醫(yī)藥大學東直門醫(yī)院重點實驗室，北京 100700；2.國家癌癥中心 國家腫瘤臨床醫(yī)學研究中心中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院腫瘤醫(yī)院分子腫瘤學國家重點實驗室，北京 100021；3.國家癌癥中心國家腫瘤臨床醫(yī)學研究中心 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院腫瘤醫(yī)院國際交流處，北京 100021

肝癌是我國第四大常見惡性腫瘤，第二大致死惡性腫瘤[1]。目前，針對肝癌的治療手段主要包括手術(shù)切除、靶向治療、放化療、介入治療等，但這些治療手段療效有限，肝癌5 年生存率不到10%[2]。腫瘤干細胞是腫瘤細胞中的一群特殊細胞，具有自我復制、多細胞分化和抵抗治療的能力[3]，腫瘤干細胞被認為是腫瘤治療失敗、復發(fā)及轉(zhuǎn)移的關鍵原因[4]。因此，肝癌干細胞（liver cancer stem cells，LCSCs）被認為是最有希望的肝癌治療靶標。為進一步了解LCSCs 領域的研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢，本研究對近10 年Web of Science 數(shù)據(jù)庫收錄的LCSCs 領域的文獻進行分析，以期為研究人員從事相關研究提供參考。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

數(shù)據(jù)來源于Web of Science 核心數(shù)據(jù)庫，檢索策略：#1 TS=（“l(fā)iver cancer”O(jiān)R“l(fā)iver carcinoma”O(jiān)R“l(fā)iver neoplasm”O(jiān)R“l(fā)iver tumor”O(jiān)R“hepatoma”O(jiān)R“hepatocellular carcinoma”O(jiān)R“Hepatocellular Cancer”O(jiān)R“HCC”O(jiān)R“hepatic cancer”O(jiān)R“hepatic neoplasm”O(jiān)R“hepatic tumor”）AND #2 TS=（“Neoplastic Stem Cells”O(jiān)R“Neoplastic Stem Cell*”O(jiān)R“Cancer Stemness”O(jiān)R“cancer stem cell*”O(jiān)R“tumor-initiating cell*”O(jiān)R“neoplastic stem like cell*”O(jiān)R“cancer stem like cell*”O(jiān)R CSC* OR“CSLC*”）；時間跨度：2011—2020 年；文獻類型：Article；語種：English；索引：SCI-EXPANDED。共檢索到1481 篇文獻。

1.2 統(tǒng)計學方法

Web of Science 核心數(shù)據(jù)庫中檢索到1481 篇文獻，通過人工剔除無效文獻472 篇，對數(shù)據(jù)Web of Science 格式數(shù)據(jù)進行去重。最終獲得1000 篇研究論文作為研究樣本，以“RefWorks”格式將文獻數(shù)據(jù)導入CiteSpace（version 5.7.R5）[5]和VOSviewer[6]獲取LCSCs知識圖譜。設置每1 年為1個分區(qū)，時間跨度為2011—2020 年，利用VOSviewer 對國家、機構(gòu)、作者進行可視化分析，采用CiteSpace 軟件對文獻進行關鍵詞突現(xiàn)分析，結(jié)合Excel 軟件對檢索結(jié)果的年份、國家、機構(gòu)、作者、期刊、被引文獻及關鍵詞的頻次進行統(tǒng)計性描述。

2 結(jié)果

2.1 年度發(fā)文量

2011—2020 年LCSCs 相關文獻發(fā)表量為1000 篇，2011 年的發(fā)文量為30 篇，2018 年以前發(fā)文量持續(xù)增長，2018—2020 年發(fā)文量呈波動式增長。LCSCs 相關文獻發(fā)文量總體呈增長趨勢。見圖1。

2.2 國家網(wǎng)絡分析

全球共有46個國家開展LCSCs的相關研究，該領域發(fā)文量前5 位的國家分別是中國（702 篇，70.2%）、美國（163 篇，16.3%）、日本（104 篇，10.4%）、韓國（63 篇，0.63%）和意大利（28 篇，0.28%）。該領域中心性居于前5 位的國家分別是美國（0.51）、意大利（0.34）、法國（0.34）、中國（0.32）和日本（0.29）。運行VOSviewer 設置頻次閾值為1，創(chuàng)建國家網(wǎng)絡地圖見圖2，國家網(wǎng)絡圖中有46個節(jié)點和678個鏈接，46個國家組成了7個集群。

2.3 機構(gòu)網(wǎng)絡分析

全球共有305個機構(gòu)開展LCSCs的相關研究，該領域發(fā)文量前5 位的研究機構(gòu)分別是第二軍醫(yī)大學（81 篇）、中山大學（47 篇）、復旦大學（46 篇）、香港大學（45 篇）和上海交通大學（33 篇）。該領域中心性排名前5 位的機構(gòu)分別是浙江大學（0.31）、復旦大學（0.18）、北京大學（0.17）、中國醫(yī)學科學院（0.16）和第二軍醫(yī)大學（0.14）。運行VOSviewer 設置頻次閾值為5，創(chuàng)建機構(gòu)網(wǎng)絡地圖見圖3，在機構(gòu)網(wǎng)絡圖中有107個節(jié)點和1392個鏈接。107 所機構(gòu)組成了10個集群。

2.4 作者網(wǎng)絡分析

全球總共有438 位作者涉及LCSCs的相關研究，發(fā)文量前5 位的作者分別是Stephanie Ma（17 篇）、Taro Yamashita（15 篇）、Jia Fan（14 篇）、Hongyang Wang（14 篇）和Shuichi Kaneko（13 篇）。共同被引前5 位的作者分別是Taro Yamashita（657 次）、Stephanie Ma（562 次）、Zhen Fan Yang（314 次）、Josep M Llovet（262 次）和Tsutomu Chiba（234 次）。運行VOSviewer設置頻次閾值為5，創(chuàng)建作者網(wǎng)絡地圖見圖4，在作者網(wǎng)絡圖中有185個節(jié)點和4772個鏈接。

2.5 期刊分布

1000 篇LCSCs 文獻總共分布于291 種期刊中。該領域發(fā)文量前5 位的期刊分別是Oncotarget（63 篇）、Hepatology（44 篇）、Cancer letters（38 篇）、PLoS One（36 篇）和Scientific reports（29 篇）。共被引前5 位的期刊分別是Hepatology（2391 次）、Cancer research（1796 次）、Gastroenterology（1272 次）、Nature（1267 次）和Cell（1093 次）。

2.6 被引文獻分析

運行VOSviewer，進行被引頻次統(tǒng)計，共同被引前5 位的參考文獻見表1。其中，Taro 等[7]2009 年發(fā)表的“EpCAM-positive hepatocellular carcinoma cells are tumor-initiating cells with stem/progenitor cell features”被引頻次最高。

表1 共被引前5 位的文獻

2.7 研究熱點分析

運行VOSviewer，創(chuàng)建關鍵詞網(wǎng)絡圖見圖5，LCSCs 鑒定的干性標志物的研究，調(diào)控LCSCs的轉(zhuǎn)錄因子、長鏈非編碼RNA、微小RNAs、癌基因和信號通路的研究，LCSCs 與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相互作用促進轉(zhuǎn)移的機制研究；LCSCs 防御藥物攻擊的耐受研究，靶向LCSCs的藥物治療研究，LCSCs的代謝重編程和有氧糖酵解的代謝研究是LCSCs 領域研究的熱點。

2.8 研究趨勢分析

運行CiteSpace，在關鍵詞聚類的基礎上通過“Burstness”獲得突顯詞（圖6），LCSCs 干性研究-靶向LCSCs 治療研究-LCSCs 生物學機制研究是LCSCs 研究趨勢，靶向LCSCs的抑制劑研究是LCSCs的重點研究方向。

3 討論

我國不到30%的肝癌患者能夠早發(fā)現(xiàn)和早診斷[8]，晚期肝癌患者平均生存期不足1 年[9]。肝癌仍然是一項威脅我國居民健康的挑戰(zhàn)[10]。雖然，分子靶向治療[11]和化療[12]可用于部分肝癌患者，但臨床獲益仍不令人滿意。因此，探索新的肝癌全身治療方法至關重要。肝癌的轉(zhuǎn)移、復發(fā)是導致肝癌患者高死亡率的重要原因。腫瘤干細胞在腫瘤生長、轉(zhuǎn)移、耐藥、復發(fā)及預后中發(fā)揮重要作用，靶向LCSCs的治療手段將可能有效治療肝癌，有望提高肝癌的5 年生存率。因此，靶向LCSCs的研究成為了肝癌領域的研究熱點。

通過CiteSpace 發(fā)現(xiàn)，近10 年的LCSCs 發(fā)文量呈增長趨勢，中國在該領域發(fā)文量居世界首位，占全球發(fā)文量的70.2%，中國投入了大量的資金和精力從事LCSCs的研究，表明LCSCs 是肝癌領域研究的重點。進一步通過關鍵詞聚類分析LCSCs的研究熱點。Ma 等[13]從人類肝細胞系中鑒定和分離出表達CD133 表面表型的CSCs 群體。Yang 等[14]發(fā)現(xiàn)CD90 陽性肝細胞癌細胞是具有干/祖細胞特征的腫瘤起始細胞。Shan等[15]研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子NANOG 是肝癌中干細胞的生物標志物，它可以通過IGF1R 信號通路維持干細胞自我更新。研究發(fā)現(xiàn)，LncHDAC2 通過激活Hedgehog 信號驅(qū)動LCSCs的自我更新[16]。Nault 等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在肝細胞癌的基因型-表型關系中，p53 失活促進了LCSCs的特征。Kuo 等[18]研究發(fā)現(xiàn)，OCT4和c-JUN的正反饋調(diào)節(jié)導致c-JUN 癌基因的持續(xù)表達，增強了肝癌細胞的干性。Huang 等[19]研究發(fā)現(xiàn)減弱Wnt/βcatenin 信號通路，可消除肝癌中索拉非尼耐藥的干細胞樣細胞。研究發(fā)現(xiàn)，LCSCs 有利于糖酵解并抑制氧化磷酸化，以促進干性和對治療的抵抗力[20]，用線粒體ROS 誘導劑處理的LCSCs 抑制自我更新能力[21]。基于以上研究和熱點分析發(fā)現(xiàn)LCSCs的鑒定，調(diào)控LCSCs的轉(zhuǎn)錄因子、癌基因和信號通路等是LCSCs領域研究的熱點。

通過關鍵詞突顯圖發(fā)現(xiàn)，靶向LCSCs的藥物治療研究是LCSCs 近幾年研究的重點。Liu 等[22]研究發(fā)現(xiàn)，一種新的苦參堿衍生物通過抑制PI3K/AKT 信號通路抑制肝癌細胞和LCSCs。Sun 等[23]研究發(fā)現(xiàn)，鹽霉素通過去磷酸化的FAK和ERK1/2 通路抑制LCSCs的遷移和侵襲。Maehara 等[24]研究發(fā)現(xiàn)，二甲雙胍通過AMPK-CEBPβ 通路調(diào)節(jié)肝癌細胞系中CD133的表達。Tsai 等[25]研究發(fā)現(xiàn)姜黃素通過抑制肝細胞癌中的AhR/ERK/SK1 信號傳導抑制轉(zhuǎn)移和癌癥干細胞的比例。Wang 等[26]研究發(fā)現(xiàn)，三氧化二砷通過靶向SRF/MCM7 復合物抑制LCSCs和轉(zhuǎn)移?；谝陨涎芯?，靶向調(diào)控LCSCs的基因或者信號通路是肝癌治療的新靶點。

綜上所述，LCSCs 是肝癌研究的熱點和重點方向，靶向LCSCs 治療肝癌的藥物研發(fā)將進一步提高肝癌的臨床療效，成為臨床治療肝癌的新選項，在臨床上發(fā)揮更重要的作用。