郭麗華 許小歡 賴晨暉 梁玉華 孟偉偉

深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院產(chǎn)科，廣東深圳 518100

妊娠期糖尿?。╣estational diabetes mellitus，GDM）指孕期初次出現(xiàn)一定程度的糖代謝問題，是孕產(chǎn)婦一種獨(dú)有的疾病[1]，發(fā)病率高且有逐年升高的發(fā)展趨勢[2]。GDM 會(huì)對母嬰健康產(chǎn)生不良影響[3]，會(huì)造成孕婦出現(xiàn)代謝功能障礙[4]，繼而引起子癇前期、產(chǎn)后出血、產(chǎn)褥感染以及胎兒宮內(nèi)窘迫、窒息等不良后果[5]，應(yīng)引起高度重視，積極防治。近年來，GDM 越來越受到學(xué)者的關(guān)注，如何早期發(fā)現(xiàn)、診斷及預(yù)防GDM 的發(fā)生，并減少GDM對母嬰的損害成為研究的熱點(diǎn)。 目前GDM 的發(fā)病機(jī)制不清， 尚無一種可有效預(yù)測GDM 母嬰結(jié)局的參考指標(biāo)， 因此尋找一種可早期預(yù)測GDM 母嬰結(jié)局的臨床指標(biāo)迫在眉睫。有研究顯示，腸道菌群紊亂是導(dǎo)致GDM 的發(fā)病及病情進(jìn)展的影響因素之一[6]。 基于此，本研究分析GDM 患者腸道菌群的變化及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年9月至2021年6月于深圳市寶安區(qū)石巖人民醫(yī)院產(chǎn)檢和分娩的100 例GDM 患者作為GDM 組；另選取同期80 例正常孕婦作為正常妊娠組。正常妊娠組孕婦年齡18～40 歲，平均（29.11±5.87）歲；孕齡37～41 周，平均（39.23±0.96）周；產(chǎn)次0～3 次，平均（1.33±0.45）次；糖尿病家族史16 例。 GDM 組孕婦年齡18～40 歲，平均（29.17±5.82）歲；孕齡37～41 周，平均（39.28±0.94）周；產(chǎn)次0～3 次，平均（1.35±0.43）次；糖尿病家族史19 例。兩組的年齡、孕齡、產(chǎn)次、糖尿病家族史等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。 根據(jù)妊娠結(jié)局將GDM 組產(chǎn)婦分為正常分娩組（84 例）與不良妊娠組（16 例）。 正常分娩組孕婦年齡18～39 歲，平均（29.20±5.80）歲；孕齡37～41周，平均（39.30±0.92）周；產(chǎn)次0～3 次，平均（1.37±0.42）次；糖尿病家族史16 例。不良妊娠組孕婦年齡18～40 歲，平均（29.15±5.83）歲；孕齡37～41 周，平均（39.26±0.95）周；產(chǎn)次0～3 次，平均（1.34±0.44）次；糖尿病家族史3 例。 兩組的年齡、孕齡、產(chǎn)次、糖尿病家族史等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。 本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批，患者和家屬均簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：①無孕前糖尿病、主要臟器疾病、高血壓者；②無其他代謝性疾病及內(nèi)分泌疾病者；③入組前4 周內(nèi)未使用過抗生素、微生態(tài)活菌制劑等、近4 周內(nèi)無胃腸道疾病者；④18～40 歲，單胎，計(jì)劃在醫(yī)院分娩。排除標(biāo)準(zhǔn)：①曾接受不孕治療者；②合并傳染性疾病者；③神志不清、溝通障礙者；④孕期服用抗生素者。

1.2 方法

腸道菌群檢測：于孕晚期進(jìn)行檢測，運(yùn)用糞便微生物DNA 采集保存套裝（上海維基生物科技有限公司；TinyGene 型），晨起采集糞便標(biāo)本，置于含有DNA保存液的塑料管內(nèi)。 0.5 h 內(nèi)運(yùn)送回實(shí)驗(yàn)室，-80℃冰箱保存，采用培養(yǎng)法進(jìn)行檢測，記錄腸桿菌、腸球菌、雙歧桿菌、乳桿菌、梭桿菌的菌落數(shù)。

母嬰不良妊娠結(jié)局分析：對產(chǎn)婦的妊娠結(jié)局進(jìn)行觀察并記錄， 根據(jù)妊娠結(jié)局將GDM 組產(chǎn)婦分為正常分娩組與不良妊娠組。

1.3 觀察指標(biāo)及評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

比較正常妊娠組與GDM 組孕婦的腸道菌群檢測結(jié)果、母嬰妊娠結(jié)局、正常分娩組與不良妊娠組的腸道菌群檢測結(jié)果。 ①正常妊娠組與GDM 組孕婦的腸道菌群檢測結(jié)果。 具體菌落的鑒定方法：腸桿菌采用計(jì)算發(fā)酵乳糖、染色鏡檢為G-桿菌的所有菌落；腸球菌采用計(jì)數(shù)有明顯褐色圈、 染色鏡檢為G-球菌的所有菌落； 雙歧菌采用食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)雙歧菌檢驗(yàn)；乳桿菌采用G+無芽孢桿菌、觸酶陰性、APICH50；梭桿菌采用G+芽孢桿菌。 ②正常妊娠組與GDM 組孕婦的母嬰的不良妊娠發(fā)生率。不良妊娠指不明原因的異常情況造成的孕期胚胎發(fā)育異常， 包括子癇前期、產(chǎn)后出血、產(chǎn)褥感染、過期產(chǎn)兒、胎兒宮內(nèi)窘迫、巨大兒、新生兒窒息、新生兒低血糖。 計(jì)算公式：不良妊娠發(fā)生率=不良妊娠發(fā)生例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPPS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，方差齊時(shí)采用t 檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)采用校正t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 正常妊娠組與GDM 組孕婦腸道菌群檢測結(jié)果的比較

GDM 組孕婦的腸桿菌、 腸球菌菌落數(shù)大于正常妊娠組，雙歧桿菌、乳桿菌菌落數(shù)小于正常妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組的梭桿菌菌落數(shù)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表1）。

表1 正常妊娠組與GDM 組孕婦腸道菌群檢測結(jié)果的比較（logN/g，±s）

表1 正常妊娠組與GDM 組孕婦腸道菌群檢測結(jié)果的比較（logN/g，±s）

注 GDM：妊娠期糖尿病

組別 例數(shù) 腸桿菌 腸球菌 雙歧桿菌 乳桿菌 梭桿菌正常妊娠組GDM 組t 值P 值80 100 8.32±0.89 9.64±1.14 8.490＜0.001 7.02±0.79 8.40±1.23 8.699＜0.001 8.09±0.37 7.41±0.52 9.866＜0.001 6.82±0.91 5.39±0.74 11.629＜0.001 3.34±1.01 3.38±0.46 0.353 0.362

2.2 正常妊娠組與GDM 組孕婦母嬰妊娠結(jié)局的比較

GDM 組孕婦的不良妊娠發(fā)生率高于正常妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

表2 正常妊娠組與GDM 組孕婦母嬰妊娠結(jié)局的比較[n（%）]

2.3 正常分娩組與不良妊娠組腸道菌群檢測結(jié)果的比較

不良妊娠組孕婦的腸桿菌、腸球菌菌落數(shù)大于正常分娩組，雙歧桿菌、乳桿菌菌落數(shù)小于正常分娩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組的梭桿菌菌落數(shù)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表3）。

表3 正常分娩組與不良妊娠組腸道菌群檢測結(jié)果的比較（logN/g，±s）

表3 正常分娩組與不良妊娠組腸道菌群檢測結(jié)果的比較（logN/g，±s）

組別 例數(shù) 腸桿菌 腸球菌 雙歧桿菌 乳桿菌 梭桿菌正常分娩組不良妊娠組t 值P 值84 16 9.25±0.71 10.12±0.83 4.371<0.001 7.98±0.93 9.14±1.12 4.423<0.001 7.60±0.59 6.83±0.48 4.913<0.001 5.72±0.80 5.01±0.66 3.336<0.001 3.35±0.48 3.40±0.45 0.385 0.350

3 討論

人體腸道中寄居著大量的微生物，這些微生物可通過腸道上皮屏障作用、免疫進(jìn)化、營養(yǎng)利用等影響機(jī)體健康[7]。有報(bào)道指出，腸道菌群和代謝功能有明顯的關(guān)聯(lián)[8]。 近年來，腸道菌群與GDM 的關(guān)系也得到研究學(xué)者的認(rèn)可[9]，為預(yù)測GDM 母嬰結(jié)局新指標(biāo)提供了一種思路、方向[10]。 Crusell 等[11]報(bào)道指出，相比于正常血糖的孕婦，GDM 孕婦腸道中多種菌群豐度更高，且其差異常延續(xù)到分娩后。 然而，有關(guān)該病腸道菌群的變化過程尚不明確[12]，較多人認(rèn)為，細(xì)菌脂多糖代謝參加了胰島素抵抗及糖耐量受損的過程[13]。

本研究結(jié)果顯示，GDM 組孕婦的腸桿菌、腸球菌菌落數(shù)大于正常妊娠組，雙歧桿菌、乳桿菌菌落數(shù)小于正常妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示GDM孕婦存在一定程度的腸道菌群失衡。膳食對GDM 腸道菌群會(huì)產(chǎn)生一定程度的影響。 遵循飲食建議的GDM患者表現(xiàn)出更好的代謝和炎癥模式，并且與高脂飲食相關(guān)的擬桿菌數(shù)量顯著減少， 因此， 臨床應(yīng)加強(qiáng)對GDM 孕婦的膳食指導(dǎo)，以改善其腸道菌群。

本研究結(jié)果還顯示，GDM 組孕婦的不良妊娠發(fā)生率高于正常妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示GDM 會(huì)對孕婦的分娩結(jié)局產(chǎn)負(fù)面影響，會(huì)導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)升高， 因此及早診斷并治療GDM非常重要。 對不同母嬰分娩結(jié)局的腸道菌群比較顯示，不良妊娠組孕婦的腸桿菌、腸球菌菌落數(shù)大于正常分娩組，雙歧桿菌、乳桿菌菌落數(shù)小于正常分娩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示腸道菌群失衡與不良妊娠之間存在一定的相關(guān)性，說明腸道菌群檢測結(jié)果可作為評估GDM 產(chǎn)婦不良母嬰妊娠結(jié)局的參考指標(biāo)，與陳悅?cè)旱萚14-15]的相關(guān)報(bào)道基本一致。

綜上所述，GDM 患者存在腸道菌群紊亂， 且母嬰不良妊娠結(jié)局發(fā)生率較高； 檢測GDM 患者的腸道菌群變化，對臨床防治GDM、改善母嬰結(jié)局有一定的意義。