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        葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78、可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1、STOX1在子癇前期患者血清中表達(dá)及相關(guān)性研究

        2022-05-14 07:16:16黃莉莉黃秀敏馬玉平
        臨床軍醫(yī)雜志 2022年4期
        關(guān)鍵詞:血清水平研究

        黃莉莉,黃秀敏,杜 瑜,馬玉平

        廈門大學(xué)附屬中山醫(yī)院1.婦產(chǎn)科;2.藥學(xué)部,福建 廈門 361004

        子癇作為孕婦在圍產(chǎn)期的特發(fā)性疾病,常會伴隨水腫、頭痛、惡心、嘔吐等臨床癥狀。子癇前期(preeclampsia,PE)會對孕婦器官功能甚至大腦功能造成損傷,同時(shí)威脅孕婦以及胎兒的生命健康[1]。有研究顯示,我國PE發(fā)病率高達(dá)10%左右,且呈不斷升高趨勢[2]。目前,PE的發(fā)病機(jī)制尚不清楚,臨床預(yù)防及治療難度較大[3]。有研究指出,血清中細(xì)胞因子水平變化與PE發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[4]。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)能夠與蛋白質(zhì)進(jìn)行折疊甚至組裝,從而維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定[5]??扇苄匝軆?nèi)皮生長因子受體1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)水平出現(xiàn)異常時(shí),能夠間接影響到滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖,促進(jìn)疾病的發(fā)展[6]。STOX1作為易感基因,能夠隨著孕周的增長而增長,進(jìn)而參與到PE的發(fā)生、發(fā)展之中[7]。本研究旨在探討GRP78、sFlt-1、STOX1在PE患者血清中的表達(dá)及相關(guān)性?,F(xiàn)報(bào)道如下。

        1 對象與方法

        1.1 研究對象 選取廈門大學(xué)附屬中山醫(yī)院自2020年4月至2021年4月收治的77例PE患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn):符合《婦產(chǎn)科學(xué)》[8]中PE診斷標(biāo)準(zhǔn);孕周≥20周;單胎妊娠;存在高血壓、尿蛋白癥狀;經(jīng)血壓、心電圖、24 h尿蛋白等檢查確診;妊娠前無高血壓病史。排除標(biāo)準(zhǔn):惡性腫瘤;合并其他妊娠相關(guān)疾??;心腎功能障礙;凝血功能障礙、免疫功能障礙;妊娠前存在糖尿病、高血壓史;合并肝炎、結(jié)核等傳染疾病。根據(jù)《婦產(chǎn)科學(xué)》[8]中病情嚴(yán)重程度將其分為輕度PE組(n=42)與重度PE組(n=35)。另選取50例同期于我院孕檢的健康妊娠女性為健康組。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。所有孕婦均簽署知情同意書。

        1.2 研究方法 收集3組研究對象24 h尿液,準(zhǔn)確量取后送檢,采用全自動生化分析儀及配套試劑盒(利德曼生化股份有限公司)測定24 h尿蛋白定量。嚴(yán)格遵循試劑說明書進(jìn)行操作。計(jì)算并比較3組研究對象的平均動脈壓。體檢當(dāng)天,分別采集3組空腹外周靜脈血5 ml。常溫靜置,以3 000 r/min離心10 min,分離上清。采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附法測定血清GRP78、sFlt-1、STOX1水平。設(shè)置酶標(biāo)板為空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,每孔內(nèi)均加入50 μl稀釋液,空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔內(nèi)依次加入樣品稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣片各50 μl,輕晃均勻,酶標(biāo)板覆膜,室溫孵育2 h。棄孔內(nèi)液體,甩干,清洗反應(yīng)板。分別加入GRP78、sFlt-1、STOX1檢測液,100 μl/孔,覆膜,常溫孵育1.0 h,棄液體,甩干、洗滌反應(yīng)板,加入100 μl/孔底物溶液,遮光顯色0.5 h,加入終止液,輕彈酶標(biāo)板終止反應(yīng)。酶標(biāo)儀(型號iMark,Bio-RAD公司)450 nm處測定吸光值。嚴(yán)格遵循試劑說明書進(jìn)行操作。

        2 結(jié)果

        2.1 3組研究對象一般資料比較 3組研究對象年齡、孕次、孕周、體質(zhì)量指數(shù)(body mass index,BMI)比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。輕度PE組、重度PE組24 h尿蛋白定量、平均動脈壓均高于健康組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);重度PE組24h尿蛋白定量、平均動脈壓均高于輕度PE組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

        表1 3組研究對象一般資料比較

        2.2 3組研究對象血清GRP78、sFlt-1、STOX1水平比較 輕度PE組、重度PE組患者GRP78、sFlt-1、STOX1水平均高于健康組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。重度PE組患者GRP78、sFlt-1、STOX1水平均高于輕度PE組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

        表2 3組研究對象血清GRP78、sFlt-1、STOX1水平比較

        2.3 血清GRP78、sFlt-1、STOX1與PE發(fā)生相關(guān)性分析 血清GRP78、sFlt-1、STOX1與PE發(fā)生呈正相關(guān)性(r=0.671、0.594、0.714,P<0.05)。

        2.4 GRP78、sFlt-1、STOX1對PE的診斷價(jià)值 與GRP78、sFlt-1、STOX1單項(xiàng)診斷相比,三項(xiàng)聯(lián)合對PE的診斷價(jià)值較高(P<0.05)。見表3。血清GRP78、sFlt-1、STOX1診斷PE的ROC曲線見圖1。

        圖1 血清GRP78、sFlt-1、STOX1診斷PE的ROC曲線

        表3 GRP78、sFlt-1、STOX1對PE診斷指標(biāo)比較

        3 討論

        有學(xué)者指出,PE的發(fā)生發(fā)展與免疫調(diào)節(jié)功能、血管內(nèi)皮損傷、遺傳等因素密切相關(guān)[9]。以上原因雖然與PE的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),但單獨(dú)任一因素均不能夠?qū)е翽E的發(fā)生,所以,PE的發(fā)生發(fā)展受多因素共同影響[10-11]。因此,及早有效地對PE病情作出判斷,能夠?yàn)镻E的預(yù)防以及治療起到積極作用。有研究發(fā)現(xiàn),GRP78在真核生物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上以非共價(jià)鍵形式短暫的結(jié)合新生多肽,從而促進(jìn)蛋白質(zhì)的正確折疊以及裝配,并且協(xié)助其運(yùn)送[12-13]。有研究顯示,對PE胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行檢測,GRP78蛋白在各種子癇中均呈現(xiàn)高表達(dá)[14]。GRP78與PE密切相關(guān),可能參與了PE的發(fā)生發(fā)展。sFlt-1可抑制胎盤生長因子,對滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖及血管生成產(chǎn)生影響,進(jìn)而引發(fā)妊娠期高血壓[15-16]。sFlt-1在機(jī)體中能夠與血管內(nèi)皮生長因子相結(jié)合,進(jìn)而阻斷血管內(nèi)皮生長因子的生物學(xué)反應(yīng),促使胎盤局部出現(xiàn)缺氧的狀態(tài),加重PE發(fā)展[17]。當(dāng)STOX1出現(xiàn)異常上升時(shí),會導(dǎo)致細(xì)胞間的α-T-鏈接蛋白表達(dá)上調(diào),對滋養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行負(fù)性的調(diào)節(jié),進(jìn)而導(dǎo)致胎盤的前置、早剝等情況發(fā)生,嚴(yán)重威脅孕婦以及胎兒的身心健康[18-19]。有研究顯示,當(dāng)STOX1蛋白呈現(xiàn)出異常表達(dá)時(shí),會在一定程度上抑制細(xì)胞的增殖,促進(jìn)PE進(jìn)展[20]。

        本研究結(jié)果顯示,輕度PE組、重度PE組患者GRP78、sFlt-1、STOX1水平均高于健康組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。重度PE組患者GRP78、sFlt-1、STOX1水平均高于輕度PE組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這表明,GRP78、sFlt-1、STOX1均與PE病情嚴(yán)重程度相關(guān),推測可能通過影響子宮螺旋動脈重鑄,滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖與分化等機(jī)制參與PE病情的發(fā)生與發(fā)展。本研究結(jié)果顯示,血清GRP78、sFlt-1、STOX1與PE發(fā)生呈正相關(guān)性(r=0.671、0.594、0.714,P<0.05)。這表明,GRP78、sFlt-1、STOX1的高水平表達(dá)可能嚴(yán)重影響滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲,導(dǎo)致螺旋動脈重鑄障礙,從而在PE的發(fā)生發(fā)展中起到作用。此外,與GRP78、sFlt-1、STOX1單項(xiàng)診斷相比,三項(xiàng)聯(lián)合對PE的預(yù)測價(jià)值較高(P<0.05)。這表明,PE的發(fā)生發(fā)展為多因素共同影響,GRP78、sFlt-1、STOX1的高水平表達(dá),通過多方面的機(jī)制導(dǎo)致胎盤供血困難,從而引發(fā)PE。因此,3個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測能夠避免單個(gè)指標(biāo)檢測診斷PE的不足,有望對PE病因?qū)W研究及早期干預(yù)提供一個(gè)全新的平臺。

        綜上所述,血清GRP78、sFlt-1、STOX1在PE中異常表達(dá),并與病情嚴(yán)重程度相關(guān),測定GRP78、sFlt-1、STOX1表達(dá)水平可輔助診斷孕婦PE及病情嚴(yán)重程度。

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