韋忠廳，覃培栩，高 楊

1.廣西科技大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西柳州 545001；2.柳州市婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣西柳州 545001；3.柳州市婦幼保健院輸血科，廣西柳州 545001

流感嗜血桿菌是引起兒童細(xì)菌性感染的常見病原菌，其檢出率在革蘭陰性菌中位于第3位，并且呈逐年上升趨勢(shì)[1]。流感嗜血桿菌主要寄居于人體的鼻咽部，當(dāng)機(jī)體抵抗力下降時(shí)，其便可引起多種器官或組織的感染。目前，關(guān)于柳州地區(qū)兒童呼吸道感染流感嗜血桿菌的季節(jié)分布、感染兒童性別分布特點(diǎn)及菌株耐藥性的研究較少，為了給臨床診療及流行病學(xué)研究提供數(shù)據(jù)支撐，本研究對(duì)此進(jìn)行了相關(guān)分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年7月至2021年6月在柳州市婦幼保健院住院治療的年齡≤14歲的呼吸道感染患兒5 241例為研究對(duì)象，所有患兒均符合呼吸道感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]，其中男1 999例，女3 242例；0～1歲1 441例，>1～3歲1 607例，>3～6歲1 118例，>6～9歲656例，>9～12歲376例，>12～14歲43例；春季就診1 237例，夏季就診1 284例，秋季就診942例，冬季就診1 778例。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本釆集 釆用一次性吸痰器從鼻腔進(jìn)入，在咽部抽吸出痰液置于痰液收集器中，并于2 h內(nèi)送檢。痰液標(biāo)本涂片鏡檢以鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè)/低倍視野，白細(xì)胞>25個(gè)/低倍視野，或兩者比值<2/5視為合格，剔除不合格標(biāo)本。

1.2.2流感嗜血桿菌鑒定及藥敏試驗(yàn) 將痰液標(biāo)本接種于血平板和巧克力平板，于35 ℃、5.0% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h,如菌株在血平板上不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不良,而在巧克力平板上生長(zhǎng)出灰白、濕潤(rùn)、透明或半透明、中等大小的菌落，且染色鏡檢為革蘭陰性短小桿菌，則考慮為嗜血桿菌,進(jìn)一步做因子篩查試驗(yàn)(Ⅹ、Ⅴ、Ⅴ+Ⅹ因子),只在Ⅴ+Ⅹ因子紙片周圍生長(zhǎng)者鑒定為流感嗜血桿菌,如結(jié)果為可疑則用VITEK2-Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)、配套鑒定卡(NH卡)進(jìn)一步鑒定。對(duì)檢出的流感嗜血桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。質(zhì)控菌株為流感嗜血桿菌ATCC 49247。

1.2.3β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè) 采用頭孢硝噻吩紙片法，將待檢菌落涂在濕潤(rùn)紙片上，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)紙片變紅為陽性,不變色為陰性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 釆用WHONET5.6軟件和SPSS20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分?jǐn)?shù)表示，組間比較釆用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1病原菌分布情況 從5 241份標(biāo)本中檢出流感嗜血桿菌1 179株，檢岀率為22.50%，位于所檢出病原菌的第2位；肺炎鏈球菌檢出率高于流感嗜血桿菌，為24.94%，見表1。

表1 檢出率位于前5位的病原菌

2.2不同性別、年齡及季節(jié)流感嗜血桿菌檢出情況 男性患兒中檢出流感嗜血桿菌的有477例，女性患兒中檢出流感嗜血桿菌的有702例，不同性別患兒流感嗜血桿菌檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。不同年齡患兒流感嗜血桿菌檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中>12～14歲年齡組檢出率低于其余各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。春季與夏季、秋季與冬季流感嗜血桿菌檢出率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而春季、夏季流感嗜血桿菌檢出率高于秋季與冬季，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同性別、年齡及季節(jié)流感嗜血桿菌檢出情況

2.3β-內(nèi)酰胺酶陽性率 在檢出的1 179株流感嗜血桿菌中，β-內(nèi)酰胺酶陽性630株，陽性率為53.44%。

2.4流感嗜血桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果 流感嗜血桿菌對(duì)頭孢噻肟、利福平、氧氟沙星、氯霉素、四環(huán)素的敏感率>90.0%；對(duì)氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸、頭孢呋辛、頭孢克洛、復(fù)方磺胺甲噁唑的敏感率<50.0%，見表3。

表3 流感嗜血桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果(%)

續(xù)表3 流感嗜血桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果(%)

3 討 論

流感嗜血桿菌是引起兒童呼吸道感染的重要病原菌，本研究5 241份標(biāo)本中，檢出流感嗜血桿菌1 179株，檢岀率為22.50%，位于所檢出病原菌的第2位。>12～14歲年齡組流感嗜血桿菌檢出率低于其余各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說明該年齡段兒童感染流感嗜血桿菌的風(fēng)險(xiǎn)較低，而0～12歲兒童是感染流感嗜血桿菌的高風(fēng)險(xiǎn)人群。但相關(guān)研究報(bào)道，5歲以下兒童的流感嗜血桿菌檢出率最高[3-4]，與本研究結(jié)果略有差異，考慮與納入研究的人群及地區(qū)差異有關(guān)。年齡較小的兒童更易感染流感嗜血桿菌可能與該部分兒童機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未成熟有關(guān)。

進(jìn)一步分析不同季節(jié)流感嗜血桿菌的檢出率，結(jié)果顯示，春季、夏季流感嗜血桿菌檢出率高于秋季與冬季，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說明春季、夏季是流感嗜血桿菌感染的高發(fā)季節(jié)，這和賴國(guó)祥等[5]報(bào)道的冬季流感嗜血桿菌檢出率最高的結(jié)果不符，但與田俊華等[6]報(bào)道的春季流感嗜血桿菌的檢出率最高一致，不同研究間結(jié)果存在差異可能與各地的氣候、地理環(huán)境不同有關(guān)。本研究中，春季、夏季檢出率高可能與該季節(jié)柳州地區(qū)的空氣濕度較大、溫度較高，有利于流感嗜血桿菌的生長(zhǎng)與傳播有關(guān)，也提示臨床應(yīng)在春季、夏季重視兒童流感嗜血桿菌感染的防治，加強(qiáng)宣傳教育[7]。

本研究中，檢出的1 179株流感嗜血桿菌中β-內(nèi)酰胺酶陽性率為53.44%，陽性率較高，提示臨床在治療兒童流感嗜血桿菌感染時(shí)應(yīng)使用帶有酶抑制劑的抗菌藥物，但阿莫西林/克拉維酸除外(耐藥率較高)。同時(shí)藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，本研究檢出的流感嗜血桿菌對(duì)二代頭孢菌素頭孢呋辛和頭孢克洛的耐藥率>70%，臨床經(jīng)驗(yàn)性抗感染治療時(shí)應(yīng)慎重選擇。此外，本研究中流感嗜血桿菌對(duì)氧氟沙星、氯霉素、四環(huán)素的敏感性高，與呂志勇[8]的研究結(jié)果類似，推測(cè)出現(xiàn)該結(jié)果可能與兒童具有該類藥物的使用禁忌證，臨床較少應(yīng)用有關(guān)。

綜上所述，柳州地區(qū)呼吸道感染患兒中，0～12歲患兒流感嗜血桿菌的檢出率較高，春季和夏季是流感嗜血桿菌檢出率較高的季節(jié)；所檢出的流感嗜血桿菌中，產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌株檢出率較高。在經(jīng)驗(yàn)性抗感染治療的基礎(chǔ)上積極完善藥敏試驗(yàn)，合理選擇抗菌藥物是治療流感嗜血桿菌感染的關(guān)鍵。