李真，趙勇，李俊杰，李和樓，劉慶華

（1.山東第一醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東泰安 271000；2.山東黃河河務(wù)局山東黃河醫(yī)院，山東濟(jì)南 250000；3.山東第一醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院新生兒科，山東泰安 271000）

細(xì)菌感染性是新生兒常見的疾病之一，同時(shí)也是引起新生兒死亡的主要原因[1-2]。新生兒細(xì)菌感染性起病較急，早期診斷較為困難，若不及時(shí)治療，極易危及患兒生命[3]，但是目前臨床缺乏該類疾病早期特異性的診斷性指標(biāo)。病原學(xué)檢查耗時(shí)較長(zhǎng)，不能及時(shí)反映患兒的感染情況，且由于標(biāo)本取材的原因，容易干擾細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果，影響醫(yī)生判斷[4]。白細(xì)胞計(jì)數(shù)（white blood cell count,WBC）是傳統(tǒng)感染性疾病檢測(cè)的手段，隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷提高，超敏C 反應(yīng)蛋白（hypersensitive CReactive protein, hs-CRP）、 血清降鈣素原（Procalcitonin, PCT）和白細(xì)胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）逐漸應(yīng)用于臨床診斷。本文通過分析新生兒細(xì)菌感染性早期WBC、PCT、hs-CRP 和IL-6 的變化，探討其對(duì)新生兒細(xì)菌感染性疾病早期診斷的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年6月—2018年10月在山東第一醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院新生兒科住院診斷為細(xì)菌感染性疾病的69 例新生兒作為感染組。依據(jù)實(shí)用新生兒學(xué)（第4 版）相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)診斷[5]。選取同期該院收治的45 例非感染性疾病的新生兒作為對(duì)照組。

1.2 標(biāo)本采集

各患兒均在用藥前采集外周靜脈血3 mL，以3 500 r/min 離心5 min，取血清并檢測(cè)IL-6、PCT、hs-CRP 水平。EDTA-K2 抗凝靜脈血2 mL 用于測(cè)定WBC。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)

應(yīng)用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法測(cè)定血清IL-6 水平（DPC2000 化學(xué)發(fā)光分析儀，深圳市達(dá)科為生物工程有限公司），IL-6 ＞5.90 pg/mL 為陽性。應(yīng)用酶聯(lián)免疫熒光法測(cè)定血清PCT 水平（VIDAS 免疫發(fā)光分析儀，上海梅里埃生物工程有限公司），PCT＞0.06 ng/mL 為陽性。應(yīng)用乳膠免疫比濁法測(cè)定血清hs-CRP 水平[AU5800 全自動(dòng)生化分析儀，貝克曼庫爾特商貿(mào)（中國）有限公司]，hs-CRP＞3 mg/L 為陽性。應(yīng)用XN2000 血細(xì)胞分析儀[希森美康醫(yī)用電子（上海）有限公司]測(cè)定WBC，WBC＞10×109/L 為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以構(gòu)成比或率表示，比較用χ2檢驗(yàn)；繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic curve，ROC）曲線。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒一般資料比較

兩組患兒性別、日齡、胎齡及出生時(shí)體重比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組患兒一般資料比較

2.2 兩組患兒WBC、hs-CRP、PCT 和IL-6 水平比較

兩組患兒WBC、hs-CRP、PCT 和IL-6 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），感染組高于對(duì)照組。見表2。

表2 兩組患兒WBC、hs-CRP、PCT和IL-6水平比較 （±s）

表2 兩組患兒WBC、hs-CRP、PCT和IL-6水平比較 （±s）

組別n對(duì)照組感染組t 值P 值45 69 WBC/（×109/L）7.68±2.34 13.27±4.42 7.799 0.000 hs-CRP/（mg/L）1.28±1.05 10.21±8.44 7.013 0.000 PCT/（ng/mL）0.26±0.81 3.83±5.05 4.700 0.000 IL-6/（pg/mL）3.93±1.75 16.10±11.52 7.019 0.000

2.3 兩組患兒WBC、hs-CRP、PCT和IL-6陽性率比較

兩組患兒WBC、hs-CRP、PCT 和IL-6 陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），感染組高于對(duì)照組。見表3。

表3 兩組患兒WBC、hs-CRP、PCT和IL-6陽性率比較 %

2.4 WBC、hs-CRP、PCT、IL-6 及各指標(biāo)聯(lián)合的診斷效能分析

以新生兒細(xì)菌感染性標(biāo)準(zhǔn)作為診斷依據(jù)，計(jì)算各指標(biāo)的敏感性和特異性并繪制ROC 曲線。單個(gè)指標(biāo)中PCT 敏感性最高，其次為IL-6；hs-CRP 特異性最高，其次為WBC；IL-6 約登指數(shù)最大，其次為WBC。聯(lián)合檢測(cè)以WBC+hs-CRP 作為基礎(chǔ)檢驗(yàn)指標(biāo)，依次添加PCT、IL-6 和PCT+IL-6，其中WBC+hs-CRP 特異性最高，其次為IL-6+WBC+hs-CRP；PCT+IL-6+WBC+hs-CRP 敏感性最高，其次為IL-6+WBC+hs-CRP；IL-6+WBC+hs-CRP 約登指數(shù)最高，其次為WBC+hs-CRP。單個(gè)指標(biāo)中IL-6 的曲線下面積（area under curve,AUC）最大，PCT 次之，且都＞0.9；而聯(lián)合指標(biāo)中PCT+IL-6+WBC+hs-CRP 的AUC 最高，為0.970（95% CI：0.945，0.994），其次為IL-6+WBC+hs-CRP，為0.968（95% CI：0.943，0.993）。見表4和圖1、2。

圖1 WBC、hs-CRP、PCT和IL-6的ROC曲線

表4 WBC、hs-CRP、PCT、IL-6及各指標(biāo)聯(lián)合的診斷效能分析

圖2 各指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線

3 討論

我國兒科門診有70%的兒科疾病由細(xì)菌感染引起[6]，而新生兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不完全，故更易受到細(xì)菌侵襲發(fā)生感染，這嚴(yán)重威脅著新生兒的生命健康[7]?，F(xiàn)臨床上對(duì)判斷細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)仍然是細(xì)菌培養(yǎng)陽性[8]，但是由于檢查周期長(zhǎng)，往往錯(cuò)過最佳治療時(shí)間。而在不明感染的情況下，臨床醫(yī)生如若憑經(jīng)驗(yàn)使用抗菌藥物進(jìn)行治療，這在很大程度上造成了抗菌藥物的濫用[9]。因此尋找一種既準(zhǔn)確又快速的檢測(cè)方法是現(xiàn)在臨床合理使用抗菌藥物治療新生兒細(xì)菌感染性的研究重點(diǎn)研究。

WBC 是診斷新生兒感染性疾病最常用的指標(biāo)，從本研究也可看出感染組WBC 明顯高于對(duì)照組，說明WBC 在早期診斷中有一定的意義。WBC 約登指數(shù)為0.643，低于IL-6；AUC 為0.862 低于PCT 和IL-6。因此針對(duì)于新生兒細(xì)菌感染性而言早期診斷效能不高。且WBC 個(gè)體差異較大，更容易受進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)等影響[10]。

CRP 是一種由肝臟合成的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白[11]，hs-CRP 則是采用超敏感技術(shù)將測(cè)定范圍擴(kuò)大，從而更好地反映CRP 在微小范圍內(nèi)的變化[12]。在本研究中CRP 的敏感性最低（65.22%），可能與多種原因可引起CRP 水平升高有關(guān)，但有文章提出CRP 水平在病毒感染、支原體、真菌感染中的升高程度均低于細(xì)菌感染性[13-14]，故CRP 水平升高可為細(xì)菌感染早期診斷提供有意義線索，這也與本文研究結(jié)論一致。

PCT 是一種由116 個(gè)氨基酸組成的糖蛋白，PCT 在健康機(jī)體內(nèi)含量極低，一旦發(fā)生感染可導(dǎo)致PCT 水平迅速升高[15]。本研究中PCT 在所有檢測(cè)指標(biāo)中敏感性最高（94.20%），結(jié)果同李仁華等[16]的研究一致。由于PCT 水平在新生兒出生第1 天可有生理性升高[13]，因此由于本研究的研究對(duì)象為出生第0～5 天的新生兒，因此本研究PCT 特異性較低（57.78%），可能與其他研究結(jié)論不符[17-18]，說明因此不建議單獨(dú)使用單一指標(biāo)評(píng)估感染，應(yīng)結(jié)合其他指標(biāo)聯(lián)合診斷[19]。

IL-6 由184 個(gè)氨基酸組成，是急性時(shí)相蛋白形成的主要誘導(dǎo)物，IL-6 作為重要的炎癥因子[20]，其生物效應(yīng)廣泛，近年來越來越多地應(yīng)用于臨床疾病診療中。當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥、感染等病理刺激狀況時(shí)，細(xì)胞因子等刺激巨噬細(xì)胞，進(jìn)一步激活T、B 細(xì)胞，促使IL-6 迅速升高，其水平高低隨患者病情變化而變化[21]。還有研究也表明，患兒在感染前期血液中的IL-6 已有升高跡象，且升高速度快[22]。在本研究中IL-6 的約登指數(shù)（0.743）和AUC（0.967）均在各檢測(cè)指標(biāo)前列，說明該指標(biāo)對(duì)細(xì)菌感染性疾病的診斷有較高的臨床意義。

本研究將WBC+hs-CRP 作為基礎(chǔ)聯(lián)合檢測(cè)指標(biāo)，依次添加PCT、IL-6 和PCT+IL-6，各聯(lián)合指標(biāo)的特異性、敏感性及約登指數(shù)，結(jié)果提示，在新生兒細(xì)菌感染性時(shí)，機(jī)體應(yīng)對(duì)病原體出現(xiàn)一系列生理、病理反應(yīng)，刺激巨噬細(xì)胞釋放白細(xì)胞介素等炎癥物質(zhì)，使IL-6 水平升高，由于單獨(dú)的IL-6檢測(cè)敏感性不夠高，所以使用各指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可以為臨床提供更加明確的新生兒細(xì)菌感染的早期診斷依據(jù)。

綜上所述，WBC、hs-CRP、PCT 和IL-6 檢測(cè)在新生兒細(xì)菌感染性疾病的早期診斷中都具有重要的評(píng)估價(jià)值，但是單一指標(biāo)的敏感性和特異性有明顯不同，故單一指標(biāo)的檢測(cè)均不適用于新生兒細(xì)菌感染性疾病的診斷。本研究建議采用IL-6+WBC+hs-CRP 聯(lián)合檢測(cè)能更好地做出診斷，從而選擇合適的抗生素以達(dá)到降低新生兒細(xì)菌感染性疾病的病死率的目的。