葛家成，張永芳，閆欣欣，王麗穎，張立新*

（1.海利爾藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，山東青島 266109；2.沈陽化工大學(xué)功能分子研究所，沈陽 110142)

氟氯蟲雙酰胺（Fluchlordiniliprole）是海利爾藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司自主創(chuàng)制的一種新型的苯甲酰胺類化合物，其IUPAC中文名稱為：3-溴-4′,6′-二氯-1-(3-氯-2-吡啶基)-3′-氟-2′-(甲基氨基甲?；?-1H-吡唑-5-甲酰苯胺；CAS登錄號為：2129147-03-9；分子式為：C17H10BrCl3FN5O2；結(jié)構(gòu)式如圖1。氟氯蟲雙酰胺作用機(jī)理獨特，對環(huán)境友好，對哺乳動物低毒，殺蟲譜廣，持效期長，對害蟲具有觸殺、胃毒作用，對多種鱗翅目害蟲高效，對纓翅目薊馬如蘭花薊馬、煙薊馬、棕櫚薊馬等也有較高的防治活性，并且合成工藝簡單，成本低，復(fù)配效果好，具有廣闊的市場前景[1-2]。有關(guān)利用高效液相色譜分析方法測定農(nóng)藥有效成分的研究頗多[3-5]，但目前關(guān)于氟氯蟲雙酰胺制劑產(chǎn)品的分析方法尚未見報道。本文采用高效液相色譜法對5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑中的有效成分進(jìn)行含量測定。該研究對生產(chǎn)中氟氯蟲雙酰胺有效成分的質(zhì)量檢測具有指導(dǎo)意義。

圖1 氟氯蟲雙酰胺結(jié)構(gòu)式

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

氟氯蟲雙酰胺標(biāo)樣（純度98%），海利爾藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司；5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑樣品，沈陽化工大學(xué)；純凈水，娃哈哈集團(tuán)有限公司；甲醇（色譜純），美國費希爾公司；冰乙酸（分析純），國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 1260高效液相色譜儀（具有紫外檢測器），美國安捷倫公司、Diamonsil C18色譜柱（200 mm×4.6 mm（i.d.），5μm），北京迪馬科技有限公司；SG520OHE型數(shù)控超聲波清洗器，上海冠特超聲儀器有限公司；XSR205DU/A分析天平，梅特勒-托利多公司；50 mL容量瓶，北京欣維爾玻璃儀器有限公司；0.22μm有機(jī)相針式過濾器，上海安普實驗科技股份有限公司。

1.3 液相色譜操作條件

流動相：pH值3.0甲醇-酸水（70.0∶30.0，V/V）；檢測波長：230 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣體積：5μL；柱溫：（30.0±2）℃；氟氯蟲雙酰胺的保留時間為5.7 min。氟氯蟲雙酰胺標(biāo)樣及5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑的高效液相色譜圖分別見圖2和圖3。

圖2 氟氯蟲雙酰胺標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖3 5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑高效液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

用分析天平稱取氟氯蟲雙酰胺標(biāo)樣0.040 g（精確至0.000 2 g），將稱取好的樣品放置在50 mL容量瓶中，以甲醇為溶劑，并用超聲波輔助使樣品溶解完全，定容至刻度線，用0.22μm有機(jī)相針式過濾器過濾到進(jìn)樣小瓶中，備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑試樣0.800 g（精確至0.000 2 g）置于50 mL容量瓶中，其余操作步驟與1.4.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制相同。

1.4.3 測定

在1.3色譜操作條件下，等待數(shù)分鐘使儀器穩(wěn)定。當(dāng)基線基本平穩(wěn)時，首先注入標(biāo)準(zhǔn)品溶液，接連注入幾次，每注入一次計算相應(yīng)的響應(yīng)值；當(dāng)相鄰2針標(biāo)準(zhǔn)品之間響應(yīng)值變化小于1.5%時，再進(jìn)行下一步測定。分別測定標(biāo)樣溶液、連續(xù)2針試樣溶液、標(biāo)樣溶液。

1.5 數(shù)據(jù)分析

根據(jù)標(biāo)樣溶液和試樣溶液的峰面積，按式（1）計算樣品中氟氯蟲雙酰胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w。

式中：A1、A2分別為標(biāo)樣和試樣溶液中氟氯蟲雙酰胺峰面積的平均值，mAU·min；m1、m2分別為標(biāo)樣和試樣的稱樣質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中氟氯蟲雙酰胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測波長的選擇

通過對氟氯蟲雙酰胺進(jìn)行紫外掃描，發(fā)現(xiàn)在230 nm的波長條件下有較強(qiáng)的吸收峰，同時雜質(zhì)的響應(yīng)值小，因此將檢測波長定位為230 nm。

2.2 流動相的選擇

為了得到更準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，在反相色譜分析時采用C18色譜柱，流動相選擇甲醇-水時，氟氯蟲雙酰胺的色譜峰發(fā)生拖尾，用冰醋酸將水的pH調(diào)節(jié)為3.0時，被測物的峰形對稱性好。通過系列比例試驗，流動相為pH=3.0的甲醇-酸水（70∶30，V/V），流速1.0 mL/min時，氟氯蟲雙酰胺的峰形較好，可以得到很好的分離。

2.3 方法線性相關(guān)性的測定

用甲醇溶解標(biāo)樣，分別配制0.2、0.4、0.8、1.2、1.6 mg/mL 5個濃度梯度的氟氯蟲雙酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，在1.3描述的色譜條件下進(jìn)行分析，以氟氯蟲雙酰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，獲得氟氯蟲雙酰胺的標(biāo)準(zhǔn)曲線。氟氯蟲雙酰胺的線性方程為y=10.176 5x＋0.329 7，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.997 6?？梢钥闯觯认x雙酰胺在測定的濃度區(qū)域范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

2.4 方法精密度的測定

在1.3色譜操作條件對同一樣品稱取6個試樣，方法精密度結(jié)果見表1。氟氯蟲雙酰胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.0237%，變異系數(shù)為0.47%，該分析方法的重現(xiàn)性好、精密度高。

表1 精密度試驗結(jié)果

2.5 方法準(zhǔn)確度的測定

稱取一定量的氟氯蟲雙酰胺標(biāo)樣加入已知質(zhì)量的5%氟氯蟲雙酰胺懸浮劑樣品中，在1.3的色譜操作條件，對5個氟氯蟲雙酰胺懸浮劑樣品進(jìn)行分析測定，計算回收率。試驗結(jié)果見表2?？梢钥闯觯认x雙酰胺的平均回收率為98.79%，則該分析方法準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好。

表2 氟氯蟲雙酰胺的準(zhǔn)確度試驗結(jié)果

3 結(jié) 論

本研究建立了高效液相色譜法快速測定氟氯蟲雙酰胺含量的分析方法。試驗結(jié)果表明，該方法線性關(guān)系良好、準(zhǔn)確度和精密度較高，并且操作簡便、快速，是一種可行的分析方法，可以用于氟氯蟲雙酰胺制劑產(chǎn)品的有效成分的定量分析。