儀澤會 毛麗萍 趙 婧 孫黛珍

(1 山西農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院，山西 太原 030031；2 山西農(nóng)業(yè)大學園藝學院，山西 太原 030031)

土壤鹽漬化是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的主要限制因素之一，嚴重影響植物的生長發(fā)育。據(jù)估計，全球約有20%的耕地和33%的可灌溉農(nóng)田嚴重遭受鹽堿脅迫影響[1]，同時，耕地受氣候、地層鹽性及不當農(nóng)事操作等因素影響，鹽漬化問題呈日益加重的趨勢，對農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展造成了嚴重威脅[2]。生物改良措施因效果好、成本低，已成功應用于鹽堿地改良，其中，以種植耐鹽植物輔以其他農(nóng)業(yè)措施的綜合改良法較為常見，不僅可以增加經(jīng)濟效益，而且可對鹽漬化土壤進行生態(tài)修復[3-5]。蘆筍(Asparagusofficinalis)，又名石刁柏，富含蘆丁、氨基酸等多種功能成分，具有抗腫瘤[6]、降血糖[7]、增強免疫力[8]等作用。蘆筍種植效益高，且抗逆能力突出[9]，在鹽堿地開發(fā)中具有較大應用潛力。因此，開展耐鹽種質鑒定對蘆筍耐鹽品種選育、耐鹽機理研究和鹽堿地開發(fā)利用具有重要意義。

高效可靠的耐鹽性鑒定方法和評價體系是準確評價蘆筍耐鹽性的基礎。目前，耐鹽性鑒定主要為田間鑒定法和室內(nèi)鑒定法。鹽堿地、人工鹽池等田間全生育期鑒定方法更貼近生產(chǎn)實際，但成本較高且費時費力，同時鑒定結果易受到鹽分、水分等外界不可控環(huán)境條件影響，不適宜進行大規(guī)模資源鑒定[10]。植物芽期和苗期易受鹽害，是耐鹽性鑒定的關鍵時期[11]。良好的出苗率和壯苗率是作物優(yōu)質高產(chǎn)的基礎，基質栽培和營養(yǎng)液水培等室內(nèi)芽期苗期鑒定方法具有成本低、周期短、受外界環(huán)境影響小的特點，適于大規(guī)模資源鑒定，但因參與脅迫處理的是代表性植株，選擇依據(jù)是大小、長勢一致，常以經(jīng)驗為主。 為了消除不同種質間的固有性狀差異，常采用代表性植株的耐鹽系數(shù)(即鹽脅迫處理與對照的性狀相對值)來對耐鹽性進行描述。因此，代表性植株的選擇對鑒定結果起決定作用。蘆筍屬典型的雌雄異株植物，嚴格自交難度大，致使育種資源基因型難以純合，品種純度不高[12]。前人就蘆筍耐鹽性開展了少量研究。謝啟鑫等[9]對25份蘆筍種質進行耐鹽性室內(nèi)鑒定，篩選出耐鹽品種6個，將冠軍和Apollo劃分為較耐鹽類型，而將碩豐劃分為中度耐鹽。胡淑明等[13]以生育指數(shù)為指標，篩選出8份耐鹽性材料，認為碩豐耐鹽性明顯強于冠軍和Apollo。山西農(nóng)業(yè)大學園藝學院蔬菜栽培課題組前期試驗發(fā)現(xiàn)，基于傳統(tǒng)經(jīng)驗選擇的蘆筍代表性植株在同一處理下的各單株性狀值仍存在較大差異，說明該選擇方法僅適用于純度較高的植物品種(如陸地棉[14])，對蘆筍等純度不高的植物長勢判斷存在較大偏差，導致性狀相對值反映的不完全是耐鹽系數(shù)，從而影響鑒定結果。然而，目前客觀判斷長勢是否一致的方法尚無相關報道。植物耐鹽機理極為復雜，涉及多個途徑，采用單一指標難以準確評價，運用隸屬函數(shù)法、主成分分析法、聚類分析等多元統(tǒng)計分析方法可以克服單一指標和單一方式評價的局限性，目前已成功應用于有色大麥[2]、蘆筍[9]、長果黃麻[10]、粒用高粱[11]、陸地棉[14]、甘薯[15]、白花草木樨[16]、薏苡[17]等眾多作物。

本研究以49份蘆筍品種為材料，采用二次選擇法選擇代表性植株，即首次選擇株高和根長一致的植株為預代表性植株，培養(yǎng)若干天后，再次根據(jù)株高和根長進行二次選擇確定為代表性植株，然后以310 mmol·L-1NaCl溶液進行芽期苗期脅迫處理，運用多元統(tǒng)計分析方法進行綜合評價，以期為蘆筍耐鹽品種選育、耐鹽機理研究及鹽堿地開發(fā)利用提供種質材料。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料為49份蘆筍品種，包括常用育成品種及新選育組合，其中國內(nèi)25份、國外24份(表1)。試驗于2020年6月30日在山西省農(nóng)業(yè)科學院蔬菜研究所生理實驗室實施，選取籽粒飽滿、大小一致的種子，采用3% NaClO溶液消毒，經(jīng)40℃溫水浸種48 h后，一部分進行正常催芽，另一部分進行芽期鹽脅迫處理。待催芽種子大部分露白時，進行播種育苗。育苗基質自配，V椰糠∶V草炭∶V蛭石∶V珍珠巖=2∶1∶1∶1，穴盤規(guī)格為32孔。

1.2 試驗設計

試驗采用Hoagland營養(yǎng)液水培，購自福州飛凈生物科技有限公司。為確定耐鹽性鑒定的適宜鹽濃度，隨機選擇京綠蘆筍3號、翡翠明珠、冠軍和UC157共4個品種，設置NaCl濃度梯度為110、210、310和410 mmol·L-1，以0 mmol·L-1NaCl為對照(CK)進行預試驗。通過測定芽期、苗期指標發(fā)現(xiàn)，310 mmol·L-1NaCl處理下4個品種的耐鹽系數(shù)差異最明顯，確定為適宜鹽濃度。

芽期耐鹽性鑒定方法：以一次性透明塑料飯盒(底部14.3 cm×9.2 cm，頂部16.8 cm×11.8 cm，高4.3 cm)為容器，向其中倒入500 mL營養(yǎng)液，漂浮裝置為一次性透明塑料水杯杯底(高度約1 cm)，杯底打10個直徑為3 mm的圓洞，種胚朝下放入浸種處理過的種子，保證種胚可接觸到營養(yǎng)液且不會掉入營養(yǎng)液中，標記液面位置，分3 d連續(xù)向營養(yǎng)液中添加NaCl至預定濃度。每組50粒種子，隨機區(qū)組，3次重復，期間添加純水保持液面高度。以胚芽和胚根長度均超過種子直徑的1/3為發(fā)芽標準，第4天開始每天統(tǒng)計發(fā)芽數(shù)，在第10天結束統(tǒng)計。然后，依據(jù)株高和根長選擇代表性植株，兩次選擇間隔3 d，再經(jīng)5 d培養(yǎng)后測定芽高和胚根長。

幼苗期耐鹽性鑒定方法：在山西省農(nóng)業(yè)科學院東陽試驗基地日光溫室進行穴盤育苗，苗后45 d時，選取各品種株高、根長大致一致的植株進行營養(yǎng)液培養(yǎng)，容器為一次性透明水杯(底部半徑2.6 cm，頂部半徑3.4 cm，高8.1 cm)，放入營養(yǎng)液150 mL，標記液面位置；培養(yǎng)10 d后，再次根據(jù)幼苗株高和根長每組選取10株為代表性植株，然后同芽期鹽脅迫處理方法處理15 d，隨機區(qū)組，設3次重復。

1.3 測定項目及方法

發(fā)芽率(germination rate，GR)和發(fā)芽勢(germination potential，GP)通過統(tǒng)計發(fā)芽數(shù)測定。

發(fā)芽率=第10天發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)×100%

發(fā)芽勢=第7天發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)×100%

芽高(sprout height，SH)、胚根長(radicle length，RDL)、幼苗株高(plant height，PH)和幼苗根長(root length，RL)用直尺測定；幼苗地上部鮮重(plant shoot fresh weight，PSFW)和幼苗地下部鮮重(plant root fresh weight，PRFW)用分析天平稱量；將材料于110℃殺青15 min，85℃烘至恒重，稱量幼苗地上部(plant shoot dry weight，PSDW)和地下部干重(plant root dry weight，PRDW)；葉綠素(chlorophyll，CHL)含量采用丙酮-無水乙醇浸提比色法測定。

表1 供試49個蘆筍品種信息Table 1 The information of 49 asparagus varieties used in this study

根冠比(rootshoot ratio，RSR)=地下部干重/地上部干重

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

耐鹽性用測定指標的耐鹽系數(shù)來評價，單項耐鹽系數(shù)(salt tolerance coefficient，SC)和綜合耐鹽系數(shù)(comprehensive salt tolerance coefficient，CSC)分別按照公式(1)和(2)進行計算，并對SC值進行描述統(tǒng)計、相關性分析和方差分析。

SC=鹽處理測定值/對照處理測定值

(1)

(2)

i=1, 2,3,…,n；j=1,2,3,…,m

(3)

μ(Xj)=(Xj-Xjmin)/(Xjmax-Xjmin)

(4)

(5)

(6)

以D值為參考序列，SC值為比較序列，進行灰色關聯(lián)度分析。分別按照公式(7)～(10)計算各性狀測定指標關聯(lián)系數(shù)[ξi(h)]、關聯(lián)度(γD)、權重系數(shù)[ωi(γ)]和加權耐鹽系數(shù)(weight salt tolerance coefficient, WSC)。其中，h表示品種編號，△i(h)表示品種h的單項指標i與參考序列指標i的差的絕對值，△min和△max和分別表示二級最小差和最大差，即△i(h)的最小值和最大值，ρ為分辨系數(shù)(取值0.5)。

ξi(h)=(Δmin+ρ×Δmax)/[Δi(h)+ρ×Δmax],

h=1,2,3,…,p;i=1,2,3,…,n

(7)

(8)

(9)

h=1,2,3,…,

p；i=1,2,3,…,n

(10)

基于D值進行聚類分析并劃分耐鹽等級。采用Microsoft Excel 2010軟件進行數(shù)據(jù)整理、隸屬函數(shù)分析和灰色關聯(lián)度分析，采用SPSS 21.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計、主成分分析及聚類分析等多元統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

2.1 鹽脅迫對蘆筍芽期苗期各單項指標的影響

NaCl脅迫對蘆筍芽期和苗期各單項指標均產(chǎn)生了極顯著影響(表2)，各指標平均耐鹽系數(shù)(SC)均明顯偏離1。與CK相比，處理組發(fā)芽率(GR)、發(fā)芽勢(GP)、芽高(SH)和胚根長(RDL)及苗期株高(PH)、根長(RL)、地上部鮮重(PSFW)、地下部鮮重(PRFW，井岡111除外)、地上部干重(PSDW)和葉綠素(CHL)含量均有所下降(SC<1)，而苗期34個品種的地下部干重(PRDW)和46個品種的根冠比(RSR)則均有所上升(SC>1)。同一指標的耐鹽系數(shù)在不同品種中存在較大變幅，其中苗期指標的變幅(11.66%～28.87%)明顯大于芽期指標(10.49%～21.43%)，說明苗期單項指標具有更強的基因型依賴性。各單項指標的平均耐鹽系數(shù)、處理值與對照值的相關系數(shù)分別介于0.444～1.554 和0.428～0.941，且同一品種不同單項指標的耐鹽性排序存在較大差異，說明不同單項指標對NaCl脅迫處理的響應存在明顯不同，采用單項指標評價會影響準確性，需綜合使用多個單項指標來評價耐鹽性。

2.2 各單項指標耐鹽系數(shù)的相關性分析

相關性分析表明(表3)，芽期單項指標間均存在極顯著正相關性(P<0.01)，苗期單項指標間大部分存在顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01)相關性，而芽期和苗期指標間絕大多數(shù)無明顯相關性。其中，根冠比(RSR)與地上部干重(PSDW)和地下部干重(PRDW)分別呈極顯著正相關性和極顯著負相關性，葉綠素含量(CHL)與株高(PH)和地上部鮮重(PSFW)呈極顯著正相關性、與PSDW呈顯著正相關性。這說明單項指標描述的耐鹽性信息間存在交叉重疊，直接使用難以客觀、準確評價，需要采用隸屬函數(shù)法、主成分分析法、聚類分析法等多元統(tǒng)計方法有效整合單項指標信息，綜合評價耐鹽性。

表3 鹽脅迫下蘆筍13個單項指標耐鹽系數(shù)的相關性Table 3 Correlation of salt tolerance coefficients among 13 single indexes of asparagus under salt stress

2.3 49個蘆筍品種的芽期耐鹽性綜合評價

蘆筍芽期單項指標僅有4個，均與耐鹽性呈正相關，因此根據(jù)單項指標耐鹽系數(shù)計算單項指標隸屬函數(shù)值[μ(xj)]及各品種平均隸屬函數(shù)值(U)，并以U值為參考序列，SC值為比較序列，進行灰色關聯(lián)度分析，計算芽期加權耐鹽系數(shù)(WSC)，綜合評價蘆筍品種芽期耐鹽性(表4)。49個品種的U、CSC和WSC值分別介于0.092～0.919、0.419～0.803和0.416～0.801，均值分別為0.623、0.668和0.666，變異系數(shù)(CV)分別為28.82%、12.44%和12.50%。據(jù)三者值的大小進行排序，得到排序結果基本一致(表4)，三者之間存在極顯著相關(P<0.01)(圖1)。其中，U值排名為前5位的為特立龍、冠軍、綠寶麗、精品阿拉斯和荷蘭白筍王，排名后5位的為US825、井岡111、豐島2、浙豐811和京綠蘆3號。基于U值聚類將49個品種芽期耐鹽性劃分為4個等級(圖2)：第一類為強耐鹽品種，包括特立龍和冠軍2個品種，U值范圍為0.914～0.919，占總數(shù)的4.08%；第二類為中耐鹽品種，包括綠寶麗、精品阿拉斯等25個品種，U值范圍為0.656～0.833，占總數(shù)的51.02%；第三類為弱耐鹽品種，包括紫色陽光、JX1914等18個品種，U值范圍為0.404～0.620，占總數(shù)的36.74%；第四類鹽敏感品種，包括京綠蘆3號、浙豐811等4個品種，U值范圍為0.092～0.235，占總數(shù)的8.16%。

注：R同表2。Note：R same as Table 2.圖1 鹽脅迫條件下蘆筍芽期CSC值、U值和WSC值的相關性分析Fig.1 Correlation analysis of CSC value, U value and WSC value at germination stage of asparagus under salt stress

表4 供試蘆筍品種芽期耐鹽性評價的CSC值、U值和WSC值Table 4 The CSC, U and WSC value of salt tolerance evaluation in tested 49 asparagus varieties at germination stage

2.4 49個蘆筍品種的苗期耐鹽性綜合評價

2.4.1 苗期主成分分析 苗期單項指標共8項，且彼此間存在一定的相關性，為避免信息重疊，需使用主成分分析法進行降維，共提取出特征根>0.8的主成分3個，分別以F1、F2和F3表示，貢獻率分別為40.573%、26.744%和10.488%，累計貢獻率為77.805%，即可反映8個單項指標77.805%的信息，符合主成分分析要求(表5)。據(jù)各因子載荷可知，主成分(F1)主要代表苗期根長、地下部鮮重、地下部干重和根冠比，主要反應地下部生長情況，可解釋F1的94.28%；F2主要代表苗期株高和葉綠素含量，主要反應地上部外觀形態(tài)，可解釋F2的62.16%；F3主要代表地上部鮮重和地上部干重，主要反應地上部質量，可解釋F3的61.08%。F1、F2和F3的權重(Wj)分別為0.521、0.344 和0.135。

2.4.2 苗期耐鹽性綜合評價 以單項指標測定值為基礎，計算綜合指標值(Xj)、綜合指標隸屬函數(shù)值[μ(Xj)] 和耐鹽性綜合度量值(D)(表6)。49個蘆筍品種幼苗期D值介于0.147～0.718，均值為0.460，CV為35.94%。按D值大小進行耐鹽性排序，前5名品種為綠寶麗、京綠蘆1號、伊諾斯、全雄奈特和冠軍，后5名為新科2030、京紫蘆2號、JX1913、UC157和TC。

注：Ⅰ: 強耐鹽；Ⅱ: 中耐鹽；Ⅲ: 弱耐鹽；Ⅳ: 鹽敏感。下同。Note：Ⅰ: Strong salt tolerance. Ⅱ: Medium salt tolerance. Ⅲ: Weak salt tolerance. Ⅳ: Salt sensitivity. The same as following.圖2 基于U值的49個蘆筍品種芽期耐鹽性聚類圖Fig.2 The clustering dendrogram of salt tolerance in 49 asparagus varieties at germination stage based on U value

圖3 鹽脅迫條件下蘆筍苗期CSC值、D值和WSC值的相關性分析Fig.3 Correlation analysis of CSC value, D value and WSC value at seedling stage of asparagus under salt stress

D值為參考序列，SC值為比較序列，采用灰色關聯(lián)分析法計算加權耐鹽系數(shù)(WSC)(表6)。49個蘆筍品種幼苗期CSC值和WSC值分別介于0.669～1.054 和0.672～1.070之間，均值分別為0.869 和0.876，CV為12.51%和12.77%。CSC值、WSC值和D值三者間的相關性均達到極顯著水平(圖3)，排序結果基本一致。49個品種基于D值聚類可劃分為4個耐鹽等級(圖4)：第一類為強耐鹽品種，包括京綠蘆1號、綠寶麗等12個品種，D值范圍為0.609～0.718，占總數(shù)的24.49%；第二類為中耐鹽品種，包括艾麗絲、JX1914等20個品種，D值范圍為0.397～0.565，占總數(shù)的40.82%；第三類為弱耐鹽品種，包括JX1913、豐島2號等14個品種，D值范圍為0.227～0.361，占總數(shù)的28.57%；第四類鹽敏感品種，包括新科2030、京紫蘆2號等3個品種，D值范圍為0.147～0.185，占總數(shù)的6.12%。

表5 鹽脅迫下蘆筍苗期8個單項指標的主成分分析Table 5 Principal component analysis of 8 single indexes of asparagus seedlings under salt stress

2.5 芽期苗期耐鹽性綜合分析

蘆筍芽期、苗期耐鹽性不一致(表7)，如京綠蘆3號、井岡111在幼苗期表現(xiàn)為強耐鹽，在芽期表現(xiàn)為鹽敏感；新科2030在芽期表現(xiàn)為中耐鹽，在幼苗期表現(xiàn)為鹽敏感。同時發(fā)現(xiàn)，部分材料雖然芽期苗期耐鹽性排序不同，但屬于同一耐鹽等級，如冠軍、特立龍在兩時期均表現(xiàn)為強耐鹽，華淼、銳力均表現(xiàn)為中耐鹽。相關性分析表明，芽期和苗期的耐鹽性相關系數(shù)為0.159 (P=0.275)，即無顯著相關性。

表6 各品種幼苗期綜合指標隸屬函數(shù)值及CSC值、D值和WSC值Table 6 The subordinate function value, CSC value, D value and WSC value of asparagus varieties at seedling stage

圖4 基于D值的49個蘆筍品種苗期耐鹽性聚類圖Fig.4 The clustering dendrogram of salt tolerance in 49 asparagus varieties at seedling stage based on D value

3 討論

3.1 蘆筍芽期苗期耐鹽性鑒定方法

蘆筍屬強耐鹽植物，是鹽堿地開發(fā)利用和探索植物耐鹽機理的先鋒作物[9]。耐鹽性的鑒定方法是評價植物耐鹽性的基礎，影響因素包括鑒定方式、鑒定指標和耐鹽性描述等。理想的鑒定方法是在確保準確性的基礎上，采取簡化鑒定程序和節(jié)約鑒定成本等措施，從而實現(xiàn)快速化、便捷化和高效化，并實現(xiàn)大規(guī)模資源鑒定。本研究采用營養(yǎng)液水培方式對蘆筍芽期苗期耐鹽性進行鑒定，水培容器為一次性透明飯盒和一次性透明水杯，具有如下4點優(yōu)勢：一、在蘆筍芽期苗期可快速、準確地初篩耐鹽品種，大幅減少田間鑒定的成本和工作量[18]；二、水培溶液的鹽分濃度較為均勻，可防止土壤或基質栽培中鹽分非均勻分布對鑒定結果造成影響；三，可以直觀鹽脅迫下的根系生長過程，避免土壤或基質栽培在選擇代表性植株時對根系造成傷害，防止傷勢差異對生長速度造成影響；四、可實現(xiàn)一次性透明飯盒和水杯的廢物再利用，降低鑒定成本。

表7 49個蘆筍品種的芽期苗期耐鹽性綜合分析Table 7 Comprehensive analysis on salt tolerance in 49 asparagus varieties at the germination and seedling stage

植物耐鹽性由多基因控制，目前已在植物中發(fā)現(xiàn)多種耐鹽途徑，采用多個指標進行耐鹽性鑒定更為客觀、合理[15-16]。因此，本研究選取發(fā)芽率、發(fā)芽勢等4個芽期形態(tài)指標和株高、根長等8個苗期形態(tài)和生理指標對蘆筍芽期和苗期耐鹽性進行鑒定，并采用耐鹽系數(shù)進行描述，該方法與謝啟鑫等[9]和高春華等[11]的方法一致，可消除品種間的固有性狀差異，提高鑒定結果的準確性。長勢是反映植株生長速度的重要指標，代表性植株的長勢是否一致對鑒定結果具有重要影響。同一品種的鹽脅迫處理和對照處理的代表性植株長勢不一致，說明二者生物量差異不完全由鹽脅迫引起，還包括植株生長速度差異因素，即二者性狀相對值反映的不完全是耐鹽系數(shù)，從而降低了鑒定結果的準確性。基于傳統(tǒng)經(jīng)驗選擇的蘆筍代表性植株經(jīng)培養(yǎng)一段時間后，同一處理不同單株間生物量仍存在較大差異，這說明植株長勢不一致，而品種純度不高則是造成該現(xiàn)象的主要原因，表明該方法不適用于純度不高的植物類型。本研究提出了代表性植株二次選擇法，首次根據(jù)株高和根長確定預代表性植株，共同培養(yǎng)一段時間后，可將株高和根長仍一致的植株判定為長勢一致的代表性植株。利用該方法選擇的代表性植株經(jīng)培養(yǎng)一段時間后，同一處理不同單株間生物量整齊度大幅提升，說明二次選擇法較傳統(tǒng)經(jīng)驗判斷更為科學、合理，對于提升蘆筍耐鹽性鑒定的準確性具有一定作用。

3.2 蘆筍芽期苗期耐鹽性綜合評價方法

科學合理的評價體系對植物耐鹽性鑒定也至關重要[17]。本研究中，除了幼苗期地下部干重和根冠比外，芽期4個指標和苗期6個指標均不同程度地受到鹽脅迫抑制，這與沙棗[18]、啤酒大麥[19]研究結果一致。一方面說明根系補償生長有助于緩解鹽害造成的根系功能損傷，對提高耐鹽性具有重要意義；另一方面說明不同指標對鹽脅迫反應的敏感性差異較大，響應機制不同，采用單項指標或等權重使用多項指標進行耐鹽性評價均會對鑒定結果造成影響。近年來，采用隸屬函數(shù)法、主成分分析法、聚類分析法等多方法相結合的綜合評價體系已廣泛應用于蘆筍[9]、粒用高粱[11]、陸地棉[14]、甘薯[15]等作物的耐鹽性評價。隸屬函數(shù)法可將各指標值歸一化為0～1之間的純數(shù)，同時對各指標的權重進行考量，實現(xiàn)了多個指標間的有效比較。

本研究中，蘆筍芽期以U值為主評價指標，排序結果與聚類分析一致，同時，以CSC和WSC值進行輔助評價驗證，三者之間呈極顯著正相關。蘆筍苗期大部分指標間相關性較強，彼此間存在信息重疊。利用主成分降維思想可以將多個相互關聯(lián)的單項指標濃縮為少數(shù)幾個相互獨立的綜合指標，并根據(jù)貢獻率確定權重，采用綜合度量值對復雜性狀進行全面準確的評價，使評價結果更加接近種質真實的耐鹽性。本研究采用主成分分析法將蘆筍株高、根長等8個苗期單項指標轉化為3個相互獨立的綜合指標，以D值為主評價指標，CSC和WSC值為輔助評價指標，三者排序結果基本一致，基于D值采用聚類分析法進行耐鹽等級劃分，結果與D值排序結果一致。說明該評價體系對蘆筍芽期苗期的耐鹽性評價結果具有較高可信度，在耐鹽性評價中使用D值和聚類分析法即可對蘆筍耐鹽性進行準確評價。

3.3 蘆筍芽期苗期耐鹽性比較

植物的耐鹽性與生育期有關[20-21]。本研究中，蘆筍芽期和苗期的耐鹽性存在一定差異，如京綠蘆3號、井岡111在苗期強耐鹽而芽期鹽敏感。本結果與高粱[20]、小麥[21]的研究結果一致，其原因可能是芽期和苗期的耐鹽性機制不盡相同，如植物激素介導的種子萌發(fā)與芽期耐鹽性密切相關[22-24]，而Na+離子區(qū)隔化、K+選擇性吸收、泌鹽等則在苗期耐鹽性中發(fā)揮重要作用[25]。本研究鑒定出在芽期和苗期耐鹽性均較強的品種冠軍和特立龍，可用于后續(xù)蘆筍耐鹽機理研究。其中，冠軍在謝啟鑫等[9]研究中也被鑒定為耐鹽類型，并且其強耐鹽性在山西忻州鹽堿地的生產(chǎn)實踐中得到了證實；特立龍尚不能應用于鹽堿地規(guī)模化種植，主要由于其品種產(chǎn)量除與芽期苗期抗性有關外，仍與作物自身的產(chǎn)量情況及產(chǎn)量指標的耐鹽情況密切相關[25-27]，需進一步開展鹽堿地全生育期鑒定。

4 結論

本研究結果表明，310 mmol·L-1NaCl脅迫對蘆筍芽期和苗期各指標均有極顯著影響。本研究提出的代表性植株二次選擇與多元統(tǒng)計分析的耐鹽性鑒定方法和評價體系可消除代表性植株的長勢差異，鑒定結果更為科學、合理，可用于大規(guī)模蘆筍種質的早期耐鹽性鑒定篩選，大幅減少蘆筍鹽堿地全生育期鑒定的成本和工作量。同時，初步篩選出芽期苗期均表現(xiàn)為強耐鹽的蘆筍品種2個，可為后續(xù)耐鹽基因挖掘和耐鹽新品種選育提供種質材料。