陳曉琪 李瑤晨 李璐瑤 楊 靜 饒帥琦 祝 彪 臧運祥 周 根
(浙江農林大學農業(yè)與食品科學學院,浙江 杭州 311300)
黃秋葵(AbelmoschusesculentusL.)又名羊角豆、秋葵等,屬錦葵科秋葵屬植物,因適應性廣、抗性強、產量高、栽培簡單、營養(yǎng)價值高而廣受歡迎[1]。據聯(lián)合國糧食及農業(yè)組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations,FAO)統(tǒng)計,2020年全世界黃秋葵年產量近1 055萬噸,年生產面積達253萬公頃,約占世界蔬菜年生產面積的3.5%;主產地為非洲和亞洲,年生產面積分別達193萬和59萬公頃[2]。目前,有關黃秋葵的研究主要集中在黃酮類物質、凝集素、多糖和果膠等重要植物化學成分的提取和功效方面[3]。黃秋葵具有抗疲勞[4-5]、降血糖、降血脂[6]、抗乙醇誘導的胃黏膜損傷[7]等多種保健功能。有研究發(fā)現,黃秋葵種子的水和甲醇提取物具有較好的抗氧化、抗應激和益智作用[8];黃秋葵花的水提物對大腸桿菌(Escherichiacoli)、單核球增多性李斯特菌(Listeriamonocytogenes)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、沙門氏菌(Salmonella)均有明顯的抑制作用[9],花中所含多糖可促進大腸桿菌發(fā)酵液中乙酸和己酸的產生,具有維持機體內腸道微生物水平穩(wěn)定、減輕炎癥等作用[10];黃秋葵葉乙醇提取物對立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)和尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporum)的抑菌活性較強[11]。
黃酮類化合物是黃秋葵中含量豐富的主要生物活性物質,其含量在不同部位存在差異,由高到低依次為嫩果>嫩葉>種子>果莢[12]。目前,黃秋葵中已鑒定出槲皮素-3-龍膽二糖苷、楊梅素-3-O-葡糖苷、槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷、蘆丁、異槲皮苷、異鼠李素戊糖苷、槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷等多種黃酮類成分[13]。研究發(fā)現黃秋葵所含異槲皮苷、槲皮素-3-O-槐糖苷等黃酮類化合物均表現出良好的α-淀粉酶抑制活性[14];槲皮素和蘆丁對處于地塞米松治療中的小鼠有明顯的神經保護作用[15];同時,異槲皮苷可作為肥胖及相關代謝性疾病的潛在治療藥物[16]。
目前,黃秋葵中黃酮類物質的常見提取方法眾多[17-21],如王琰等[22]用乙醇超聲波輔助提取法從黃秋葵莢中分離鑒定了異槲皮苷和槲皮素-3-龍膽二糖苷;Senthamilselvi等[23]用乙醇與石油醚從黃秋葵花中提取得到黃酮醇-7-O-甲基棉花素-8-O-β-D-葡萄糖苷。同時,響應面分析法被廣泛應用于探究物質最佳提取工藝參數[24-25],如郭溆等[26]、林香信等[27]采用響應面法對黃秋葵花總黃酮的提取工藝進行了優(yōu)化。但已有的研究主要圍繞黃秋葵總黃酮的提取工藝進行,各具體黃酮類成分的提取工藝優(yōu)化仍鮮有報道。
本試驗采用超聲輔助提取法和高效液相色譜法,通過單因素和響應面法對料液比、乙醇濃度、提取溫度和提取時間4個因素進行優(yōu)化,以期建立可以同時提取4種黃秋葵主要黃酮類化合物和總黃酮的工藝和方法,此外探究黃秋葵總黃酮對常見致病菌的抑菌活性,為黃秋葵資源的開發(fā)利用和黃秋葵中主要黃酮類物質的進一步研究提供理論依據。
黃秋葵購自浙江杭州臨安城北農貿市場,槲皮素-3-龍膽二糖苷、槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷、異槲皮苷標準品(純度≥98%)購自上海源葉生物科技有限公司;槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷標準品(純度≥85%)購自美國Sigma公司;乙腈(色譜純)購自美國Tedia公司;胰化蛋白胨、酵母提取物購自英國Oxiod公司;馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(potato dextrose agar,PDA)購自中國醫(yī)藥集團有限公司。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大腸桿菌(Escherichiacoli)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、白假絲酵母(Canidiaalbicans)、黑曲霉(Aspergillusnigerniger)及黑根霉(Rhizopusnigricans)菌種均由浙江農林大學農業(yè)與食品科學學院園藝實驗室提供。
Gamma 1-16 LSC真空冷凍干燥機,德國Martin Christ有限公司;R-210旋轉蒸發(fā)儀,瑞士Buchi公司;Aglient1200高效液相色譜儀,美國安捷倫公司;DRP-9082型電熱恒溫培養(yǎng)箱,上海森信試驗儀器有限公司;722S型可見分光光度計,上海儀電分析儀器有限公司。
1.3.1 樣品前處理 將黃秋葵嫩果切塊,液氮預冷后用凍干機冷凍干燥72 h至恒重,粉碎過60目篩(顆粒直徑250 μm),置-20℃冰箱備用。
1.3.2 黃秋葵中黃酮類化合物的提取 稱取0.5 g黃秋葵粉末于50 mL離心管中,加入一定量相應濃度乙醇溶液,渦旋混勻后,設定相應溫度和超聲波輔助提取時間,提取結束后,8 000 r·min-1離心10 min,收集上清液。重復上述提取步驟2次,過濾定容,將提取液旋轉蒸干后,加入2 mL相應濃度的乙醇溶液,經0.22 μm微孔濾膜過濾后得待測液。每個樣品重復3次。按照公式計算黃秋葵中黃酮類化合物的提取率(Y)
Y=CV/m
式中,m為黃秋葵粉末總質量,g;C為提取液中黃酮類化合物質量濃度,μg·mL-1;V為提取液體積,mL。
1.3.3 黃酮類化合物的含量測定 采用高效液相色譜法對黃秋葵中的黃酮類化合物進行分析測定,用外標法進行定量。分別準確稱量4種標準品,將其配置成800 μg·mL-1[槲皮素-3-龍膽二糖苷、槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷、異槲皮苷]和500 μg·mL-1[槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷]的混合標準溶液,逐級稀釋成6個濃度梯度后分別進樣,得到各自的標準曲線。前期預試驗發(fā)現黃秋葵嫩果中黃酮類化合物主要是上述4種物質,故以此4種黃酮類化合物含量之和作為黃秋葵中總黃酮含量進行計算。
色譜柱:島津ODS-SP 5020-02746(4.6 mm×250 mm,5 μm);柱溫:30℃;流速:0.8 mL·min-1;進樣量:10 μL;檢測波長:256 nm;流動相A:1%冰醋酸水溶液,流動相B:乙腈。梯度洗脫程序如下:0~1 min,10% B;1.01~40 min,10~30% B;40.01~50 min,30% B。
1.3.4 單因素及響應面試驗設計 選擇提取時間、提取溫度、料液比、乙醇濃度作為影響因素進行單因素試驗。考察單次提取時間(5、10、15、20、25、30 min)對提取的影響,選擇提取溫度25℃、乙醇濃度70%、料液比1∶40 g·mL-1;考察提取溫度(25、30、35、40、45、50℃)對提取的影響,選擇單次提取時間10 min、乙醇濃度70%、料液比1∶40 g·mL-1;考察料液比(1∶10、1∶20、1∶30、 1∶40、1∶50、1∶60 g·mL-1)對提取的影響,選擇提取時間10 min、提取溫度40℃、乙醇濃度70%;考察乙醇濃度(50%、60%、70%、80%、90%)對提取的影響,選擇提取時間10 min、提取溫度40℃、料液比1∶40 g·mL-1。在單因素試驗基礎上,根據Box-Behnken響應面法試驗設計原理及Design-Expert 8.0.6.1分析軟件建立二次多項式數學模型,以提取溫度(A)、提取時間(B)、乙醇濃度(C)、料液比(D)為響應變量,以黃秋葵中的4種主要黃酮類化合物和總黃酮含量為響應值,采用四因素三水平響應面中心組合法對黃秋葵中黃酮類物質提取工藝的主要參數進行分析優(yōu)化,各因素及水平見表1。
表1 響應面試驗因素水平表Table 1 Factors of response surface test design
1.3.5 黃秋葵總黃酮抑菌活性及最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)的測定 采用牛津杯法,依據文獻[28]與預試驗結果,確定考察5個濃度(2.0、2.5、3.8、5.0、7.5 mg·mL-1)黃秋葵總黃酮對6種常見致病菌的抑菌活性。黃秋葵總黃酮濃度定量方法參照1.3.3部分。用移液槍移取菌懸液0.1 mL依次加入培養(yǎng)皿,用無菌涂布棒均勻涂抹,在每個培養(yǎng)皿中等距離放置無菌牛津杯,向牛津杯中加入0.1 mL不同濃度黃秋葵黃酮類化合物提取液和空白對照(無菌生理鹽水),每個濃度重復3次。細菌在37℃恒溫培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)18 h并測量抑菌圈直徑;真菌在28℃恒溫培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)48 h,并測量抑菌圈直徑。采用十字交叉法用游標卡尺測量抑菌圈的直徑D,取平均值。最小抑菌圈所含最低黃秋葵黃酮類化合物濃度即為MIC。
1.3.6 數據分析 每個處理3次重復,試驗結果用Mean±SD表示。顯著性采用IBM SPSS Statistics 22分析。響應面試驗數據采用Design-Expert 8.0.6.1分析。采用Excel 2010軟件繪圖。
以4種黃酮類化合物標準品的質量濃度(μg·mL-1) 為橫坐標,256 nm波長處響應值為縱坐標,繪制標準曲線進行定量計算。所得曲線的線性范圍分別為20~800 μg·mL-1[槲皮素-3-龍膽二糖苷、槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷、異槲皮苷]和15~500 μg·mL-1[槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷];R2均在0.999 以上。圖1為黃秋葵樣品黃酮類化合物的HPLC圖譜,各相鄰色譜峰之間的分離度均大于2.21,達到分離要求。
注:1:槲皮素-3-龍膽二糖苷;2:槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷;3:異槲皮苷;4:槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷。Note: 1: Quercetin-3-gentiobioside. 2: Quercetin-3-O-[β-D-xylosyl-(1→2)-β-D-glucoside]. 3: Isoquercetin. 4: Quercetin-3-O-(6-O-malonyl)-β-D-glucoside.圖1 黃秋葵樣品黃酮類化合物HPLC圖譜Fig.1 HPLC chromatogram of okra flavonoids
由圖2可知,4種黃酮類化合物的含量在不同單因素條件下的變化趨勢和總黃酮含量變化趨勢不完全相同。方差分析結果表明,提取溫度、料液比、乙醇濃度均對黃秋葵中黃酮類化合物含量有顯著影響(P<0.05),而提取時間僅對槲皮素-3-龍膽二糖苷含量影響顯著(P<0.05)。
黃秋葵中黃酮類化合物的含量隨著提取溫度的升高總體呈先上升后下降趨勢,在45℃時達到最高(圖2-A)。槲皮素-3-龍膽二糖苷含量在單次提取時間為10 min時最高,顯著高于25、30 min時所測含量(P<0.05);其余黃酮類化合物及總黃酮含量在不同提取時間下差異不顯著(圖2-B)。黃秋葵黃酮類化合物含量在料液比為1∶20 g·mL-1時顯著高于其余比例(圖2-C)。在乙醇濃度為60%時,槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷、異槲皮苷和黃秋葵總黃酮含量略高于乙醇濃度70%時各自含量(差異不顯著),但顯著高于其余處理;在乙醇濃度大于60%時,槲皮素-3-龍膽二糖苷、槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷及總黃酮含量呈明顯下降趨勢(圖2-D)。綜上所述,響應面優(yōu)化試驗所選4個單因素的候選最佳條件分別為提取溫度45℃、單次提取時間10 min(總計20 min)、料液比1∶20 g·mL-1、乙醇濃度60%。
注:圖中不同字母表示處理間差異顯著(P<0.05)。Note: Different letters denote significant different at 0.05 level among treatment.圖2 各因素對黃秋葵中黃酮類化合物含量的影響Fig.2 Effects of various factors on flavonoids content in okra
表2 Box-Behnken試驗方案及結果Table 2 Arrangement and results of four-factors Box-Behnken design
表2(續(xù))
表3 提取工藝回歸模型擬合結果Table 3 Fitting results of extraction process regression model
對回歸模型進行方差分析,結果表明各提取因素及其交互作用對5個響應值存在不同影響(表4)。結合F值的大小,得出所選因素對槲皮素-3-龍膽二糖苷、異槲皮苷、槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷及總黃酮含量影響強弱順序為:提取時間<提取溫度<乙醇濃度<料液比;對槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷含量影響強弱順序為:提取溫度<提取時間<乙醇濃度<料液比。分別對各因素進行顯著性分析,可知各回歸模型一次項中乙醇濃度C、料液比D回歸系數極顯著(P<0.000 1),說明這2個單因素對黃秋葵黃酮類化合物含量影響較大;交互項中提取時間和乙醇濃度(BC)、提取時間和料液比(BD)對應的P值小于0.05,說明存在顯著的交互作用;二次項的偏回歸系數均達到極顯著水平(P<0.01),說明該回歸方程擬合程度較好,模型具有很高的可靠性和準確性。
圖3為以4種主要黃酮類化合物和總黃酮含量為響應值,提取時間分別與乙醇濃度、料液比交互作用的三維響應面分析圖。圖3-A~F中各響應曲面的坡度較陡,說明提取時間分別與乙醇濃度、料液比的交互作用對槲皮素-3-龍膽二糖苷、異槲皮苷、槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷含量的影響較大。在一定范圍內,適當提高提取時間和乙醇濃度,在交互作用下含量的變化趨勢均為先上升后下降(圖3-A、C、E、G)。當料液比較高時,黃酮類化合物含量隨著提取時間增加有明顯上升,后趨于平緩;料液比較低時,含量隨著提取時間增加緩慢下降(圖3-B、D、F、H)。因此,要提高黃秋葵中總黃酮的含量,可以適當增加料液比。黃酮類化合物含量受其他因素交互作用的影響相對較小,無顯著差異,故未列出。
響應面分析模型和軟件分析可知各組分及總黃酮響應值在極大值點所對應的各因素編碼值,經過換算后得出總黃酮及主要黃酮類化合物提取最佳條件實際值。其中,槲皮素-3-龍膽二糖苷最佳提取條件為提取溫度37.5℃、提取時間20.3 min、乙醇濃度69.3%、料液比1∶24.6 g·mL-1,此條件下槲皮素-3-龍膽二糖苷含量理論上可達2 493.20 μg·g-1;槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷最佳提取條件為提取溫度50℃、提取時間10 min、乙醇濃度70%、料液比1∶28.4 g·mL-1,此條件下槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷含量理論上可達563.43 μg·g-1;異槲皮苷最佳提取條件為提取溫度36.4℃、提取時間19.7 min、乙醇濃度70%、料液比1∶25.7 g·mL-1,此條件下異槲皮苷含量理論上可達1 180.40 μg·g-1; 槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷最佳提取條件為提取溫度37.2℃、提取時間19.9 min、乙醇濃度67.5%、料液比1∶24.7 g·mL-1,此條件下槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷含量理論上可達496.72 μg·g-1;總黃酮最佳提取條件為提取溫度37.1℃、提取時間20.1 min、乙醇濃度69.9%、料液比1∶25.1 g·mL-1,此條件下黃秋葵中總黃酮含量理論上可達4 666.8 μg·g-1。優(yōu)化后所得的總黃酮實際含量為4 576.1 μg·g-1,其中槲皮素-3-龍膽二糖苷為2 403.7 μg·g-1、槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷為516.5 μg·g-1、異槲皮苷為1 170.7 μg·g-1、槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷為485.2 μg·g-1,接近預測值,表明該提取工藝具有可行性。
圖4為7.5 mg·mL-1總黃酮對6種致病菌的抑菌效果圖。由表5可知,5.0和7.5 mg·mL-1黃秋葵總黃酮對3種細菌均具有抑菌活性,抑菌活性均隨著總黃酮濃度上升而增強;7.5 mg·mL-1黃秋葵總黃酮對金黃色葡萄球菌培養(yǎng)皿中所形成的抑菌圈最大,其次為大腸桿菌和枯草芽孢桿菌;當總黃酮濃度為 3.8 mg·mL-1時,僅金黃色葡萄球菌培養(yǎng)皿中出現明顯抑菌圈。黃秋葵總黃酮對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的MIC分別為5.0、3.8和5.0 mg·mL-1,可見對金黃色葡萄球菌的抑菌活性均強于大腸桿菌和枯草芽孢桿菌。
對3種真菌的抑菌試驗結果表明,濃度不小于3.8 mg·mL-1的黃秋葵總黃酮對白假絲酵母抑菌活性隨濃度上升而增強;僅7.5 mg·mL-1的黃秋葵總黃酮對黑曲霉和黑根霉具有抑菌活性。黃秋葵總黃酮對白假絲酵母、黑曲霉和黑根霉的MIC分別為3.8、7.5和7.5 mg·mL-1,可見提取物對白假絲酵母的抑菌活性強于黑曲霉和黑根霉。
目前,有關黃秋葵中黃酮類化合物提取的研究主要集中在總黃酮,鮮有針對單個成分的提取工藝優(yōu)化的研究。鄧浩等[29]采用微波輔助提取法提取黃秋葵總黃酮,確定最佳條件為乙醇濃度70%時所測相應含量,提取溫度70℃、料液比1∶40 g·mL-1、提取時間40 min。李加興等[30]通過響應面法優(yōu)化黃秋葵中總黃酮的超聲輔助最佳提取工藝為料液比1∶25 g·mL-1、提取時間21 min、提取溫度75℃、乙醇濃度50%。其料液比、乙醇濃度和提取溫度最佳工藝條件與本研究結果存在部分差異,這可能與本研究綜合考慮了黃秋葵中各黃酮類化合物的提取率以及使用的HPLC檢測方法
表4 回歸模型方差分析Table 4 Variance analysis of regression model
不同有關。本研究中當料液比為1∶10 g·mL-1時,總黃酮含量與其他處理相比偏低的原因可能是樣品在有機溶劑中溶解不夠充分;隨著料液比的提高,有機溶劑含量增加,黃酮類化合物含量顯著上升,當料液比為1∶20 g·mL-1時達到最大值;當料液比高于1∶20 g·mL-1時,黃秋葵中某些醇溶性物質與溶劑間可能存在相似相溶競爭,影響黃酮類化合物的浸出,導致其含量下降[31]。在單因素試驗中,乙醇濃度為60%時所得槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷、異槲皮苷和黃秋葵總黃酮含量略高于乙醇濃度70%時所測相應含量,而槲皮素-3-龍膽二糖苷、槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷含量相近,這可能是由于乙醇濃度升高,黃秋葵中其他醇溶性物質含量有所上升,使得部分黃酮類化合物含量下降[32]。在提取過程中,適當升高提取溫度可提高黃酮類化合物的溶解度和擴散系數[33],但為了避免可能存在的降解和聚合,提取溫度定在40℃左右較合適,有助于保持黃酮類化合物的穩(wěn)定性[34],這與本研究中槲皮素-3-龍膽二糖苷、異槲皮苷、槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷與總黃酮的最佳提取工藝條件提取溫度37℃相符。Beatriz等[35]對落地生根葉中黃酮類化合物槲皮素阿拉伯糖基鼠李糖苷、槲皮苷的提取工藝進行響應面優(yōu)化,發(fā)現槲皮素阿拉伯糖基鼠李糖苷提取的最佳溫度范圍在40~50℃,提取時間18 min,這與本研究槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷最佳提取溫度50℃、提取時間20 min(總時間)結果基本一致。槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷與其余3種黃酮化合物的最佳提取溫度不同可能與不同黃酮類化合物的結構特性有關。
注:A:枯草芽孢菌;B:金黃色葡萄球菌;C:大腸桿菌;D:白假絲酵母 E:黑曲霉;F:黑根霉;1、2、3:總黃酮;4:生理鹽水。Note: A: Bacillus subtilis. B: Staphylococcus aureus. C: Escherichia coli. D: Canidia albicans. E: Aspergillusniger niger. F: Rhizopus nigricans.1、2、3: Total flavonoids. 4: Normal saline.圖4 7.5 mg·mL-1總黃酮抑菌效果圖Fig.4 Antimicrobial effect of 7.5 mg·mL-1 total flavonoids
本研究結果表明,黃秋葵黃酮類化合物對6種供試菌種均有抑菌活性,且對細菌的抑菌活性強于除白假絲酵母外其他真菌的抑菌活性,這與前人在多年生藤本豆[36]、玉米苞葉[37]等植物中提取的黃酮類化合物抑菌活性試驗結果基本一致。MIC是衡量物質抑制病原菌生長活性的重要參數,值越小表示抑菌活性越大。通過與不同植物黃酮類化合物的抑菌活性MIC的比較發(fā)現,黃秋葵總黃酮對細菌的抑菌活性弱于桑葚(2倍)[38]、荔枝皮(1.5~2倍)[39],強于魚腥草(5%)[40];對真菌的抑菌活性弱于桑葚(2.5倍)[38],強于荔枝皮(67%)[39]。說明抑菌活性大小還可能與黃酮類物質的具體成分有關。將黃秋葵總黃酮與5種常見的中藥材乙醇提取物的抑菌活性進行比較,可知黃秋葵總黃酮對細菌的抑菌活性弱于黃芩,但強于薄荷、知母、甘草、金銀花等,而黃秋葵總黃酮對黑根霉的MIC為薄荷的10%,亦表明該物質有較強的抑菌活性[40]。綜上所述,黃秋葵黃酮類化合物在開發(fā)天然抗菌劑方面具有良好的應用前景,其抑菌具體作用機制與抗菌活性成分有待進一步研究。
本研究結果表明,黃秋葵中主要黃酮類化合物槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷最佳提取條件為提取溫度50℃、提取時間10 min、乙醇濃度70%、料液比1∶28.4 g·mL-1;槲皮素-3-龍膽二糖苷、異槲皮苷、槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷在不同提取條件下的含量變化趨勢和總黃酮相同,確定最佳提取條件為提取溫度37℃、提取時間20 min、乙醇濃度70%、料液比1∶25 g·mL-1。在后者條件下,黃秋葵中總黃酮含量為4 576.1 μg·g-1;槲皮素-3-龍膽二糖苷、槲皮素-3-O-木糖(1→2)-葡糖苷、異槲皮苷和槲皮素-3-O-(6-O-丙二酰)-葡糖苷含量分別為2 403.7、516.5、1 170.7 和485.2 μg·g-1。體外抑菌試驗表明,一定濃度的黃秋葵總黃酮對6種供試菌種均具有一定的抑菌活性,抑菌效果由大到小依次為:白假絲酵母>金黃色葡萄球菌>枯草芽孢桿菌>大腸桿菌>黑根霉>黑曲霉。