陳穎聰?吳婧蔚?嚴(yán)赟?陳婭婭?陳鐵定?李如兵?王峰

【摘要】 目的 探討血清PSA、IL-6和IL-10水平對前列腺癌的診斷價(jià)值。方法 收集首診于泌尿外科并行前列腺穿刺活組織檢查（活檢）的143例患者臨床資料，按其活檢結(jié)果分為前列腺癌組84例、非前列腺癌組59例。比較2組患者的年齡、身高、體質(zhì)量、BMI、全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC）以及血清總PSA（tPSA）、游離PSA（fPSA）、IL-6和IL-10水平間的差異。以病理結(jié)果為因變量，運(yùn)用單因素logistic回歸篩選出有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)，進(jìn)一步納入多因素二元logistic回歸方程，建立最終的診斷模型。運(yùn)用受試者工作特征（ROC）曲線比較多指標(biāo)聯(lián)合與單項(xiàng)指標(biāo)在前列腺癌中的診斷價(jià)值。結(jié)果 前列腺癌組患者的年齡、單核細(xì)胞絕對值以及血清tPSA、IL-6和IL-10水平均高于非前列腺癌組患者，而淋巴/單核比值（LMR）、f/tPSA均低于非前列腺癌組（P均< 0.05）。Spearman秩相關(guān)分析顯示IL-6與IL-10呈正相關(guān)（rs = 0.602，P < 0.01），年齡和tPSA之間呈弱相關(guān)（rs = 0.243，P = 0.003），logistic回歸分析顯示年齡、血清tPSA和IL-6水平是前列腺癌的影響因素，建立回歸模型logit P = -7.811+0.098X年齡+0.040XtPSA+0.092XIL-6。聯(lián)合檢測得到的新診斷變量曲線下面積達(dá)到0.832，當(dāng)截?cái)嘀禐?.584時(shí)，靈敏度為71.4%、特異度為84.7%，均高于各單項(xiàng)指標(biāo)（P均< 0.05）。 結(jié)論 血清IL-6和IL-10水平檢測在前列腺癌診斷中具有一定的臨床價(jià)值，年齡和血清tPSA、IL-6水平是診斷前列腺癌的有效指標(biāo)，三者聯(lián)合檢測可提高診斷效能。

【關(guān)鍵詞】 前列腺癌;白介素;前列腺特異性抗原;logistic回歸;聯(lián)合檢測

The diagnostic value of serum PSA， IL-6 and IL-10 levels in prostate cancer Chen Yingcong△，Wu Jingwei，Yan Yun， Chen Yaya， Chen Tieding， Li Rubing， Wang Feng. △Medical School of Ningbo University， Ningbo 315211， China

Corresponding author， Wang Feng， E-mail： dr-wangfeng@163.com

【Abstract】 Objective To explore the diagnostic value of serum prostate-specific antigen （PSA）， interleukin-6 （IL-6） and interleukin-10 （IL-10） levels in prostate cancer by logistic regression and receiver operating characteristic （ROC） curve. Methods A total of 143 patients who first underwent prostate biospy in Department of Urology were selected and divided into the prostate cancer group （PCa） （n = 84） and non-prostate cancer group （non-PCa） （n = 59）. The differences in age， height， weight， body mass index （BMI）， complete blood cell count （CBC）， serum levels of total （tPSA） and free PSA （fPSA）， IL-6 and IL-10 were compared between two groups. Taking the pathological results as an dependent variable， and the multi-factor binary logistic regression equation was further incorporated to establish the final predictive model. The ROC curve was used to compare the predictive value of multiple indicators combined and single indicator in the new model for the diagnosis of prostate cancer. Results The mean age， absolute number of monocyte （M）， tPSA， IL-6 and IL-10 levels in the PCa group were significantly higher than those in the non-PCa group （all P < 0.05）， while the mean lymphoid/monocyte ratio （LMR） and f/tPSA were significantly lower than those in the non-PCa group （both P < 0.05）. Spearman rank correlation test showed that there was a significant positive correlation between IL-6 and IL-10 （rs = 0.602， P < 0.01）， and a weak correlation between age and tPSA （rs = 0.243， P = 0.003）. The results of logistic regression analysis demonstrated that age， tPSA and IL-6 were laboratory indicators that could independently diagnose malignant prostate tumors. A regression model was established： logit P = -7.811+0.098XAge+ 0.040XtPSA+0.092XIL-6. The area under the ROC curve （AUC） of the new diagnosis variable obtained by combined detection reached 0.832. When the cut-off value was 0.584， the sensitivity was 71.4% and the specificity was 84.7%， both higher than those of the individual indicator alone （both P < 0.05）. Conclusions IL-6 and IL-10 levels have certain clinical value in the diagnosis of prostate cancer. Age， tPSA and IL-6 are indicators which could independently predict and diagnose malignant prostate tumors. The combined detection of them could improve the diagnostic efficiency of prostate cancer.

【Key words】 Prostate cancer; Interleukin; Prostate-specific antigen; Logistic regression; Combined detection

前列腺癌為全球男性常見的惡性腫瘤之一，在我國的發(fā)病率呈逐年上升趨勢[1]。在臨床實(shí)踐中，前列腺癌具有多病灶、異質(zhì)性強(qiáng)等特點(diǎn)。研究顯示，穿刺活組織檢查（活檢）在前列腺癌中的總檢出率為44.0%，前列腺影像學(xué)檢查結(jié)果異常者的前列腺癌總檢出率為57.5%[2]。針對影像學(xué)檢查的陽性預(yù)測值以及穿刺陽性率有待提升，且為避免不必要的反復(fù)穿刺，臨床一直在尋找無創(chuàng)實(shí)驗(yàn)室檢測指標(biāo)以幫助診斷前列腺癌[3]。目前血清PSA已廣泛應(yīng)用于前列腺癌的篩查，但其特異性低。隨著臨床研究的發(fā)展，PSA的衍生指標(biāo)如PSA密度（PSAD）、前列腺健康指數(shù)（PHI）以及外泌體、PCA3基因等新指標(biāo)不斷出現(xiàn)，并豐富了前列腺癌的診斷方案[4-7]。但這些指標(biāo)的臨床應(yīng)用及其有效性尚待更多的研究結(jié)果驗(yàn)證。本研究基于臨床觀察和文獻(xiàn)資料，利用血清PSA、全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC）等常規(guī)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，聯(lián)合應(yīng)用流式細(xì)胞免疫熒光微球捕獲技術(shù)（CBA）定量分析血清IL-6、IL-10等多種炎性細(xì)胞因子水平，嘗試建立前列腺癌診斷模型，并探索多指標(biāo)聯(lián)合檢測在提高前列腺癌診斷效能中的價(jià)值。

對象與方法

一、研究對象

選擇2019年7月至2020年12月期間首診于寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院的前列腺疾病患者共164例。

病例納入標(biāo)準(zhǔn)：因PSA升高和（或）影像學(xué)檢查結(jié)果陽性和（或）直腸指檢（DRE）發(fā)現(xiàn)異常而行前列腺穿刺活檢的男性患者，血清總PSA（tPSA）< 150 μg/L且游離PSA（fPSA）< 25 μg/L（檢測限性范圍內(nèi)），且確診前未接受任何抗腫瘤治療。

病例排除標(biāo)準(zhǔn)：有急、慢性炎癥疾病，如肺炎、泌尿系統(tǒng)感染患者;合并血栓、凝血功能異常以及血液系統(tǒng)疾病患者;合并其他腫瘤患者，有腫瘤放射治療或化學(xué)治療史者;結(jié)締組織病、自身免疫性疾病患者;檢查前服用過抗感染藥物者;檢測前1周內(nèi)有射精或DRE等影響實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的患者;實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果和臨床資料不全者。

病例初篩后共納入143例男性患者為研究對象，其中前列腺癌84例（前列腺癌組）、非前列腺癌59例（非前列腺癌組），患者年齡（69.29±8.87）歲。本研究屬于生物材料二次利用，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核備案，并批準(zhǔn)免除知情同意（批件號：KY2020PJ010）。

二、研究方法

1.標(biāo)本采集

記錄患者的一般臨床資料，包括年齡、身高、體質(zhì)量、BMI及CBC的結(jié)果。收集患者于前列腺穿刺術(shù)前采集分離的新鮮血清2 mL，用于測定tPSA、fPSA、IL-6和IL-10等。前列腺穿刺活檢術(shù)由本院超聲科主任醫(yī)師操作，采用經(jīng)直腸超聲（TRUS） 引導(dǎo)下前列腺4區(qū)12點(diǎn)系統(tǒng)穿刺活檢，如DRE/TRUS異常則可疑部位加穿1～2針。

2.檢測方法

CBC指標(biāo)采用Sysmex XN-9000血液分析儀及其原裝配套試劑檢測。tPSA、fPSA采用Siemens IMMULITE2000全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀及原裝配套試劑盒檢測。血清IL-6和IL-10水平檢測基于CBA，采用BD FACS CantoⅡ流式細(xì)胞儀，人1型輔助性T淋巴細(xì)胞（Th1）/Th2/Th17亞群檢測試

劑盒（IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ及

IL-17A，江西賽基生物技術(shù)有限公司）。檢測前均執(zhí)行質(zhì)控且嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 21.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析。計(jì)量資料先進(jìn)行正態(tài)性分布檢驗(yàn)，正態(tài)分布的計(jì)量資料以? 表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);非正態(tài)分布的計(jì)量資料以M（p25，p75）表示，組間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Spearman檢驗(yàn)。在預(yù)測價(jià)值評估中，以臨床最終病理診斷結(jié)果為因變量，運(yùn)用單因素logistic回歸篩選出有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)，進(jìn)一步納入多因素二元logistic回歸方程，回歸方法為逐步法，建立最終的預(yù)測模型。對篩選出的指標(biāo)進(jìn)行獨(dú)立和聯(lián)合預(yù)測概率分析并繪制受試者工作特征（ROC）曲線，利用Medcalc 20.006計(jì)算ROC曲線下面積（AUC）并使用Delong法進(jìn)行兩兩比較。以雙側(cè)檢驗(yàn)P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、前列腺癌組與非前列腺癌組患者的一般資料及檢測指標(biāo)比較

與非前列腺癌組患者比較，前列腺癌組患者的年齡、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)（M）較高，而淋巴/單核比值（LMR）較低（P均< 0.05）。2組患者的身高、體質(zhì)量、BMI、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（N）、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（L）、中性粒細(xì)胞/淋巴細(xì)胞比值（NLR）、中性粒細(xì)胞/單核細(xì)胞比值（NMR）比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均> 0.05），見表1。

二、前列腺癌組與非前列腺癌組患者的血清PSA、IL-6及IL-10水平比較

前列腺癌組患者的血清tPSA、IL-6及IL-10水平均高于非前列腺癌組，f/tPSA值低于非前列腺癌組（P均< 0.05），而2組血清fPSA水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z = -1.263，P = 0.207），見表1。

應(yīng)用CBA技術(shù)檢測前列腺癌患者血清中各因子表達(dá)水平的典型特征，Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)顯示IL-6與IL-10呈正相關(guān)（rs = 0.602，P < 0.01），見圖1。

三、年齡與tPSA、IL-6之間的相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)性分析顯示，年齡和tPSA之間存在著弱相關(guān)（rs =0.243，P = 0.003），而年齡與IL-6、tPSA與IL-6之間相關(guān)性不強(qiáng)（P均> 0.05），見表2。

四、不同年齡和不同血清tPSA水平患者的前列腺癌檢出情況

按年齡（< 65、65～70、> 70歲）、血清tPSA水平（< 10、10～19、20～150 μg/L）各分為3類，不同年齡和不同血清tPSA水平患者間良惡性前列腺疾病的構(gòu)成比比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均< 0.01），即伴隨年齡及PSA水平增高，前列腺癌檢出率亦升高，見表3。

五、多因素二元logistic回歸建立前列腺癌診斷模型

分別以差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)（年齡和血清tPSA、f/tPSA、M、LMR、IL-6、IL-10水平）為自變量，臨床最終病理診斷結(jié)果為因變量，采用單因素logistic回歸分析計(jì)算OR值和95% CI，并將這些因素納入多因素二元logistic回歸分析（逐步法），結(jié)果顯示年齡和血清tPSA、IL-6水平與前列腺癌病理診斷結(jié)局密切相關(guān)，是能獨(dú)立診斷前列腺癌的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，見表4。擬合方程經(jīng)Hosmer-Lemeshow檢驗(yàn)顯示曲線擬合良好（P > 0.05），建立回歸模型：

logit P = -7.811+0.098XAge+0.04XtPSA+0.092XIL-6

六、年齡、血清tPSA和IL-6水平診斷前列腺癌的ROC曲線分析

將年齡、血清tPSA和IL-6水平建立的回歸模型預(yù)測值作為新變量，與單項(xiàng)指標(biāo)一起進(jìn)行ROC曲線分析和診斷價(jià)值比較，見圖2。單用年齡診斷前列腺癌的AUC為0.743（95%CI 0.664～0.822），靈敏度48.8%、特異度93.2%。單用血清tPSA水平診斷前列腺癌的AUC為0.670（95%CI 0.579～0.762），靈敏度66.7%、特異度62.7%。單用血清IL-6水平診斷前列腺癌的AUC為0.634（95%CI 0.544～0.724），靈敏度45.2%、特異度84.7%。聯(lián)合年齡、血清tPSA和IL-6水平3項(xiàng)指標(biāo)診斷前列腺癌的AUC達(dá)到了0.832（95%CI 0.767～0.897），當(dāng)截?cái)嘀禐?.584時(shí)，靈敏度和特異度分別為71.4%和84.7%。3項(xiàng)聯(lián)合指標(biāo)的ROC AUC均大于單項(xiàng)指標(biāo)年齡（Z = 2.194，P = 0.028）、血清tPSA（Z = 3.266，P = 0.001）和IL-6 （Z = 3.831，P < 0.001），見表5。

討 論

全球范圍的調(diào)查顯示，前列腺癌發(fā)病率隨年齡增長呈現(xiàn)先增加趨勢，后隨時(shí)間的推移逐漸趨于平穩(wěn)甚至下降趨勢，預(yù)計(jì)未來亞洲國家的前列腺癌發(fā)病率將比西方發(fā)達(dá)國家大幅增加[8]。國內(nèi)學(xué)者研究也顯示前列腺癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢，發(fā)病年齡亦趨于年輕化，而且高齡（>75歲）前列腺癌患者的腫瘤惡性程度通常高于55～75歲的患者[1， 9]。由此可見，前列腺癌的發(fā)病率與惡性程度均與患者的年齡息息相關(guān)。本研究顯示，年齡與血清總PSA水平呈正相關(guān)，將年齡按<65、65～70、>70歲分為3組，前列腺癌的檢出率隨年齡增加而升高。鑒于PSA已廣泛應(yīng)用于前列腺癌篩選、診斷和術(shù)后監(jiān)測，本研究將血清tPSA水平按<10、10～19、20～150 μg/L分為3組，前列腺癌的檢出率亦隨PSA水平增高而升高[10]。本研究證實(shí)血清PSA水平不僅在鑒別良惡性前列腺疾病中具有重要意義，而且還是前列腺癌發(fā)生的獨(dú)立預(yù)測因子，結(jié)果再次印證血清PSA對于前列腺腫瘤診斷具有里程碑意義。

既往文獻(xiàn)中有較多證據(jù)表明細(xì)胞因子與多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展相關(guān)[11]。Nguyen等[12]認(rèn)為，細(xì)胞因子參與了前列腺癌發(fā)生發(fā)展的調(diào)控事件，包括免疫反應(yīng)的破壞和腫瘤微環(huán)境的調(diào)節(jié)等。本研究檢測的細(xì)胞因子基于流式CBA技術(shù)，其中IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ、IL-17A的水平在前列腺癌與非前列腺癌中的差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而血清IL-6、IL-10水平在前列腺癌中均升高。查閱文獻(xiàn)認(rèn)為IL-6可激活前列腺癌細(xì)胞系雄激素受體，調(diào)節(jié)增殖和分化并促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移潛能[13]。亦有研究探討了IL-6通過促進(jìn)或抑制前列腺癌細(xì)胞內(nèi)各種信號通路的表達(dá)，發(fā)揮著促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、抗凋亡等作用[14]。IL-6因能激活Janus激酶和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3的信號通路，成為目前研究前列腺癌治療靶點(diǎn)中的熱點(diǎn)[15]。本研究也證實(shí)血清IL-6水平在前列腺癌中高于非前列腺癌疾病，且對前列腺癌診斷具有獨(dú)立預(yù)測價(jià)值。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)血清IL-10在前列腺癌組中也顯著增高，薈萃分析顯示IL-10基因多態(tài)性在前列腺癌發(fā)生發(fā)展中存在著一定作用[16]。已有較多研究揭示了IL-10基因rs1800896多態(tài)性與前列腺癌風(fēng)險(xiǎn)之間存在顯著關(guān)聯(lián)，然而結(jié)論尚不太統(tǒng)一[17-18]。因此，IL-10在前列腺癌發(fā)生發(fā)展中的分子機(jī)制尚需更深入的研究。此外，IL-10與IL-6水平也呈正相關(guān)，推測兩者同步參與了免疫激活和免疫抑制反應(yīng)，兩方面的動(dòng)態(tài)平衡也可能預(yù)示前列腺癌的不同發(fā)展階段，但具體的作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步探討。

綜上所述，研究顯示年齡、PSA、IL-6水平與前列腺癌發(fā)病密切相關(guān)，并具有獨(dú)立診斷價(jià)值，而且血清IL-6水平能一定程度上彌補(bǔ)PSA缺乏腫瘤特異性的缺點(diǎn)。因此，基于患者年齡、血清tPSA和IL-6建立的前列腺癌診斷模型具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。

參 考 文 獻(xiàn)

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（收稿日期：2021-04-28）

（本文編輯：林燕薇）