解茂陽(yáng)，戴旭（.湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙 4000;.湖南省人民醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙 4000）

甲狀腺癌是臨床中比較高發(fā)的一種甲狀腺惡性腫瘤，約占所有惡性腫瘤的1%左右，包括乳頭狀癌、濾泡狀癌、未分化癌和髓樣癌四種；其中乳頭狀癌是最為常見(jiàn)的類(lèi)型，其臨床發(fā)病與種族、地區(qū)以及性別有一定的關(guān)系，相對(duì)來(lái)說(shuō)女性發(fā)病率大于男性，且在任何年齡段均可發(fā)生，年齡超過(guò)40周歲發(fā)病率會(huì)明顯增高。甲狀腺癌可通過(guò)手術(shù)進(jìn)行治療，但在治療過(guò)程中易發(fā)生轉(zhuǎn)移，化療與放射核素治療效果不佳。在進(jìn)行研究的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)紫草素有良好的抗腫瘤治療效果，在臨床中良好運(yùn)用藥物抑制和控制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移有重要意義，為此，臨床中嘗試將紫草素運(yùn)用于甲狀腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移患者中[1]。本次研究隨機(jī)選擇在我院進(jìn)行甲狀腺癌治療的45例患者，分組對(duì)比研究紫草素對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的影響，并分析其作用機(jī)制，具體內(nèi)容闡述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對(duì)象選?。?019年11月-2021年4月，共45例在我院進(jìn)行甲狀腺癌治療的患者參與此次研究，選用信封隨機(jī)抽取方式將研究對(duì)象分為兩組，探究組23例，其中男女患者比例為9∶14，年齡下限值34歲，上限值53歲，平均值（46.53±3.17）歲；對(duì)照組22例，其中男女患者比例為8∶14，年齡下限值35歲，上限值52歲，平均值（45.39±3.32）歲，兩組基線資料對(duì)比沒(méi)有顯著差異，P＞0.05。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核，同意開(kāi)展此次研究，研究有意義。

選取標(biāo)準(zhǔn)：①選取臨床檢查確診為甲狀腺癌的患者；②選取臨床病歷資料完整的患者；③選取精神狀況良好可配合臨床研究的患者；④選取對(duì)諸項(xiàng)研究?jī)?nèi)容知情且自愿參加的患者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除合并其他癌癥的患者；②排除意識(shí)狀況不佳的患者；③排除對(duì)本次研究用藥過(guò)敏的患者；④排除臨床資料缺失的患者；⑤排除非自愿參加此次研究的患者；⑥排除合并精神疾病的患者[2]。

1.2 方法 癌細(xì)胞培養(yǎng)和傳代：甲狀腺癌細(xì)胞可以在5%的二氧化碳環(huán)境下生存，具體生長(zhǎng)方式為貼壁。在傳代與培養(yǎng)過(guò)程中將癌細(xì)胞放置在F12-K培養(yǎng)液中，然后吸干培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，滴入0.05%的胰蛋白酶，滴入量為1ml，快速旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶四五次，確保胰蛋白酶能夠快速包被培養(yǎng)瓶中的所有細(xì)胞，然后放置在合適的環(huán)境中3-5min，觀察如未發(fā)生脫壁現(xiàn)象放回繼續(xù)培養(yǎng)3min，待細(xì)胞全部脫落后完成培養(yǎng)[3]。

對(duì)照組患者癌細(xì)胞培養(yǎng)和傳代過(guò)程中未采用紫草素，探究組患者在癌細(xì)胞培養(yǎng)和傳代過(guò)程中運(yùn)用紫草素，具體濃度為2μg/ml，紫草素為成都曼斯特生物科技有限公司所生產(chǎn)。

癌細(xì)胞增殖檢測(cè)：本次采用的檢測(cè)方式為MTT比色法，收集消化對(duì)數(shù)生長(zhǎng)周期的癌細(xì)胞，采用10%的小牛血清培養(yǎng)單細(xì)胞懸液，具體濃度為5×104個(gè)/ml，每個(gè)孔加入后培養(yǎng)24h，然后加入2μg/ml的紫草素，對(duì)照組未加入紫草素，但仍需持續(xù)培養(yǎng)24h，注意在波長(zhǎng)490nm狀況下進(jìn)行相應(yīng)檢測(cè)，并記錄檢測(cè)結(jié)果[4]。

所有患者在進(jìn)行研究的過(guò)程中均密切觀察其病情變化，對(duì)病癥發(fā)生異常的患者需要及時(shí)采用有效的方式進(jìn)行臨床治療，以維持和挽救患者的生命為基本的治療原則，其中不影響臨床研究的患者可繼續(xù)參與研究，臨床用藥影響研究的患者需要及時(shí)予以剔除。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)比兩組患者的甲狀腺癌細(xì)胞增殖狀況以及甲狀腺癌細(xì)胞的凋亡狀況，具體數(shù)值需在我院進(jìn)行培養(yǎng)、傳代以及檢測(cè)，且由兩位以上高年資醫(yī)師完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用軟件SPSS20.0對(duì)兩組的臨床數(shù)據(jù)予以統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用t檢驗(yàn)。檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 探究組與對(duì)照組甲狀腺癌細(xì)胞增殖的比較 探究組患者甲狀腺癌細(xì)胞增殖大于對(duì)照組，對(duì)比差異顯著（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組甲狀腺癌細(xì)胞增殖的對(duì)比

2.2 探究組與對(duì)照組甲狀腺癌細(xì)胞凋亡百分比的比較 甲狀腺癌細(xì)胞凋亡百分比探究組大于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 兩組甲狀腺癌細(xì)胞凋亡百分比的對(duì)比

3 討論

甲狀腺癌在臨床中的治療方式以手術(shù)為主，具體治療方式需依據(jù)患者的腫瘤狀況、年齡以及體質(zhì)狀況等確定，患者在患病后除手術(shù)切除以外需要終身服用甲狀腺素片維持甲狀腺功能，對(duì)部分患者在手術(shù)治療后需要進(jìn)行放射治療進(jìn)一步去除癌細(xì)胞。在實(shí)際臨床中甲狀腺癌患者治療預(yù)后狀況與治療時(shí)間點(diǎn)、腫瘤大小、腫瘤類(lèi)型以及患者的年齡和臨床配合狀況均有直接關(guān)系，其中年齡為關(guān)鍵因素，患者隨著年齡的增長(zhǎng)病癥復(fù)發(fā)率與病死率會(huì)明顯增高[5]。甲狀腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移也會(huì)明顯增加患者的治療難度、病死率以及復(fù)發(fā)率，因此在進(jìn)行治療的過(guò)程中需良好預(yù)防和控制甲狀腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的發(fā)生，目前臨床可采用的主要治療方式為藥物治療，其中紫草素是近幾年臨床中應(yīng)用效果較好的一種[6]。

本次研究結(jié)果顯示：在甲狀腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移中采用紫草素治療，對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞增殖、甲狀腺癌早期細(xì)胞凋亡以及甲狀腺癌細(xì)胞凋亡后繼發(fā)壞死癌細(xì)胞有明顯的影響效果，探究組甲狀腺癌細(xì)胞增殖狀況為（29.85±4.43），對(duì)照組甲狀腺癌細(xì)胞增殖狀況為（10.62±3.76），t值為15.664，P值為0.000；對(duì)照組甲狀腺癌早期癌細(xì)胞凋亡百分比（0.22±0.02）%，探究組甲狀腺癌早期癌細(xì)胞凋亡百分比（7.05±0.12）%，t值為269.281，P值為0.000；對(duì)照組甲狀腺癌細(xì)胞凋亡后繼發(fā)壞死癌細(xì)胞為（0.12±0.01）%，探究組甲狀腺癌細(xì)胞凋亡后繼發(fā)壞死癌細(xì)胞為（11.24±0.13）%，t值為409.178，P值為0.000，臨床應(yīng)用價(jià)值顯著。原因分析：紫草素是一種多年生草本植物，《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載其具有清熱解毒與活血化瘀的功效，在癰痛、濕熱黃疸和濕熱斑疹中具有顯著的治療效果，臨床研究中發(fā)現(xiàn)其具有理想的藥理作用，其中包括抗真菌、抗病毒、抗腫瘤和促進(jìn)傷口愈合幾種。紫草素能夠明顯抑制癌細(xì)胞，且相關(guān)研究中表明其抑制率會(huì)隨著時(shí)間與用藥濃度逐漸增加，這說(shuō)明紫草素的抗腫瘤作用與用藥時(shí)間和用藥濃度密切關(guān)聯(lián)[7]。紫草素抗腫瘤作用機(jī)制分析：細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層內(nèi)側(cè)含有磷脂酞絲氨酸，細(xì)胞凋亡早期磷脂酞絲氨酸會(huì)向外擴(kuò)展，磷脂酞絲氨酸與Annexin V蛋白有較高的親和度，因此臨床中對(duì)細(xì)胞早期凋亡檢測(cè)就選擇這一指標(biāo)，紫草素能夠加速癌細(xì)胞的壞死和凋亡，在臨床中作用機(jī)制顯著[8]。

綜合全文來(lái)看，紫草素對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移患者有顯著的應(yīng)用效果，主要表現(xiàn)在甲狀腺癌細(xì)胞增殖、甲狀腺癌早期細(xì)胞凋亡以及甲狀腺癌細(xì)胞凋亡后繼發(fā)壞死癌細(xì)胞幾方面，可見(jiàn)其在臨床中的運(yùn)用價(jià)值，應(yīng)依據(jù)臨床需求推廣。