曾彩輝，黃燎盧

1 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院生物治療中心（廣東廣州 510700）；2 廣州計(jì)量檢測(cè)技術(shù)研究院醫(yī)光部（廣東廣州 510620）

流式細(xì)胞分選技術(shù)是現(xiàn)階段最熱門的細(xì)胞分離純化技術(shù)，被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中。通過(guò)利用流式細(xì)胞分選儀，以高能量激光照射高速流動(dòng)狀態(tài)下被熒光標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞或微粒，檢測(cè)和分析其發(fā)射的熒光強(qiáng)度，可對(duì)細(xì)胞或微粒進(jìn)行定性或定量檢測(cè)[1-2]。MOFLO EQ 超速流式分選儀是一款于空氣中激發(fā)的六路分選系統(tǒng)，采用了增強(qiáng)的雙前向角散射光檢測(cè)技術(shù)，可同時(shí)對(duì)直徑為200 nm～30 μm 的微粒執(zhí)行檢測(cè)和分選任務(wù)[3]?，F(xiàn)總結(jié)MOFLO EQ 超速流式分選儀的常規(guī)維護(hù)措施及常見(jiàn)故障分析6例，以供同行參考。

1 常規(guī)維護(hù)

1.1 流路維護(hù)

流路維護(hù)是MOFLO EQ 超速流式分選儀日常維護(hù)的主要內(nèi)容之一，應(yīng)按使用規(guī)程執(zhí)行開(kāi)、關(guān)機(jī)清洗程序，以避免堵塞或造成管路污染。日常使用的鞘液應(yīng)保證無(wú)菌，否則易造成流路污染；平時(shí)注意鞘液桶的清洗維護(hù)，建議選用75%的乙醇或濃度為1%～3%的次氯酸溶液進(jìn)行清洗，必要時(shí)可采用高溫高壓的方式進(jìn)行消毒[4]。

具備一定技術(shù)能力和經(jīng)驗(yàn)的臨床工程師應(yīng)每年對(duì)MOFLO EQ 超高速流式分選儀進(jìn)行年度大保養(yǎng)，對(duì)儀器的管路系統(tǒng)進(jìn)行必要的更換和清洗，目的在于保持流路穩(wěn)定和避免造成污染；技術(shù)能力尚不成熟的臨床工程師或無(wú)條件的醫(yī)院需在廠家工程師的現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)下進(jìn)行年度大保養(yǎng)，定期更換相應(yīng)的過(guò)濾器、上樣管和進(jìn)樣針配件。

1.2 光路維護(hù)

MOFLO EQ 超高速流式分選儀的光路維護(hù)主要是調(diào)校液流，包含更換噴嘴后的液流調(diào)校，由于該設(shè)備采用高精度的激光光纖進(jìn)行傳輸，一般情況下只需調(diào)校液流即可保證光路性能穩(wěn)定，無(wú)需對(duì)激光進(jìn)行調(diào)校。光路維護(hù)需要平時(shí)對(duì)液流照明倉(cāng)進(jìn)行清潔，當(dāng)噴嘴堵塞后，應(yīng)第一時(shí)間關(guān)閉液流，更換噴嘴或使用注射器疏通噴嘴，若有液流濺在液流照明倉(cāng)的光學(xué)濾鏡上，可使用干凈無(wú)絮的棉簽和純水沿一個(gè)方向擦拭清潔。

2 常見(jiàn)故障分析與排除

2.1 故障一

2.1.1 故障現(xiàn)象

噴嘴堵塞。

2.1.2 故障分析與排除

正常情況下，從MOFLO EQ 超高速流式分選儀噴嘴噴出來(lái)的液流是垂直且穩(wěn)定的，液流相機(jī)上可以看到邊界清晰的穩(wěn)定液流，見(jiàn)圖1；噴嘴堵塞的主要表現(xiàn)是后液流傾斜或不穩(wěn)定，液流相機(jī)上表現(xiàn)為邊界不規(guī)則或上下粗細(xì)不均勻等。噴嘴堵塞后可以嘗試使用清洗液或濃度為1%～3%的次氯酸溶液進(jìn)行反抽；噴嘴堵塞嚴(yán)重時(shí)，一般可拆下噴嘴，使用注射器沖洗噴嘴，清洗完畢后重新裝回調(diào)試即可。

圖1 正常液流圖

2.2 故障二

2.2.1 故障現(xiàn)象

上樣管路堵塞。

2.2.2 故障分析與排除

正常情況下，上樣的流式是比較穩(wěn)定的，造成上樣管路堵塞的原因是流速波動(dòng)較大，特別是突然明顯降低。發(fā)生上樣管路堵塞故障時(shí)，切勿加大上樣壓力，應(yīng)立即停止上樣，反復(fù)執(zhí)行“backflush（反沖洗）”幾次，重新檢查混勻樣品，重新上樣即可排除故障。

2.3 故障三

2.3.1 故障現(xiàn)象

Summit 軟件不能聯(lián)機(jī)，處于“OFFLINE（脫機(jī)）”模式。

2.3.2 故障分析與維護(hù)

若Summit 軟件不能聯(lián)機(jī)，處于“OFFLINE”模式，新建數(shù)據(jù)庫(kù)，打開(kāi)需要的實(shí)驗(yàn)方案即可。

2.4 故障四

2.4.1 故障現(xiàn)象

液流不偏轉(zhuǎn)。

2.4.2 故障分析與維護(hù)

根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，造成液流不偏轉(zhuǎn)的主要原因有兩點(diǎn)：一是Nozzle ASSY（流動(dòng)池）有氣泡，僅需執(zhí)行幾次排氣泡即可排除故障；二是偏轉(zhuǎn)板固定不好，需重新安裝偏轉(zhuǎn)板，安裝完成后擦掉偏轉(zhuǎn)板上面的水或結(jié)晶。

2.5 故障五

2.5.1 故障現(xiàn)象

鞘液桶壓力不正常。

2.5.2 故障分析與維護(hù)

鞘液桶壓力不正常表現(xiàn)在鞘液桶壓力不能正常加壓或負(fù)壓桶沒(méi)有負(fù)壓，主要是因?yàn)橥吧w未蓋好導(dǎo)致漏氣。注意桶的密封圈保持清潔，可以用清水清洗，必要時(shí)予以更換。

2.6 故障六

2.6.1 故障現(xiàn)象

Intellisort（智能分選）報(bào)警。

2.6.2 故障分析與維護(hù)

MOFLO EQ 超高速流式分選儀的智能分選需要扣除相機(jī)的背景。若分選相機(jī)透光窗上面有結(jié)晶，則會(huì)導(dǎo)致Intellisort 報(bào)警，結(jié)晶可能是由噴嘴堵塞，液流傾斜后濺起所致；當(dāng)發(fā)生Intellisort 報(bào)警時(shí)，應(yīng)使用清水擦拭分選相機(jī)透光窗；若報(bào)警時(shí)間較長(zhǎng)，背景本身可能發(fā)生變化，需要重新執(zhí)行扣除背景步驟。

3 小結(jié)

MOFLO EQ 超高速流式分選儀是貝克曼庫(kù)爾特公司生產(chǎn)的最新一代流式分選儀，是我院生物治療中心的主要精密貴重儀器之一。MOFLO EQ 超高速流式分選儀的性能和使用壽命受環(huán)境溫度、濕度及清潔度等方面的影響，故十分必要保障本機(jī)工作在適當(dāng)?shù)臏?、濕度環(huán)境中[5]。該機(jī)的最佳環(huán)境溫度范圍為18～22 ℃，且運(yùn)行期間溫度變化應(yīng)＜2 ℃；最佳濕度范圍為40%～60%。臨床工程師和使用人員應(yīng)加強(qiáng)對(duì)儀器的預(yù)防性維護(hù)保養(yǎng)工作，在日常工作中注意分析儀器出現(xiàn)故障的原因，總結(jié)排除故障的維修經(jīng)驗(yàn)，最大限度使儀器在最佳狀態(tài)工作，以提高利用率，減少故障，延長(zhǎng)使用壽命，提高醫(yī)院的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益[6]。