成祥

【摘 要】目的：探討不同煎煮時(shí)間對(duì)大黃總蒽醌類含量的影響。方法：選擇醋酸鎂染色紫外分光光度法測(cè)定大黃蒽醌類組分含量，分析大黃在臨床使用中合理的煎煮時(shí)間，以最大限度提高大黃總蒽醌類含量。結(jié)果：游離蒽醌在煎煮60min時(shí)含量最高（1.479mg），在煎煮10min是含量最低（0.881mg）；結(jié)合蒽醌在煎煮15min～30min時(shí)含量最高（1.283mg～1.320mg），在煎煮120min時(shí)含量最低（0.710mg）；總蒽醌在煎煮30min時(shí)含量最高（2.520mg），在煎煮10min時(shí)含量最低（1.973mg）。結(jié)論：臨床在煎煮大黃時(shí)若用于清熱瀉火則煎煮60min以最大限度提高游離蒽醌含量，用于瀉下則煎煮30min即可以提高結(jié)合蒽醌含量，避免久煎以降低治療效果。

【關(guān)鍵詞】煎煮時(shí)間；大黃；蒽醌類含量

Effects of Different Decocting Time on the content of total anthraquinones in Rhubarb

CHENG Xiang

Huantai Hospital of traditional Chinese Medicine， Zibo， Shandong 256400， China

【Abstract】Objective： To investigate the effect of Different Decocting Time on the content of total anthraquinones in rhubarb. Methods： The content of anthraquinones in rhubarb was determined by magnesium acetate staining UV spectrophotometry， and the reasonable decocting time of Rhubarb in clinical use was analyzed to maximize the content of total anthraquinones in rhubarb. Results： The content of free anthraquinone was the highest （1.479mg） at 60min and the lowest （0.881mg） at 10min； the content of bound anthraquinone was the highest （1.283mg～1.320mg） at 15min～30min and the lowest （0.710mg） at 120min； the content of Total Anthraquinone was the highest （2.520mg） at 30min and the lowest（1.973mg） at 10min. Conclusions： When decocting Rhubarb in clinic， if it is used to clear away heat and fire， decoct it for 60min to maximize the content of free anthraquinone， and decoct it for 30min to reduce the therapeutic effect.

【Key？Words】Decocting time； chinese rhubarb； Anthraquinone content

大黃是臨床上常見(jiàn)的一種中藥材，性苦寒，歸胃經(jīng)、大腸經(jīng)、肝經(jīng)、脾經(jīng)，具有活血化瘀、清熱瀉火、清泄?jié)駸?、瀉下攻積、瀉火解毒的作用，常被臨床廣泛應(yīng)用于瘀血證、熱結(jié)便秘、熱毒瘡瘍、熱結(jié)胸痞、濕熱瀉痢、淋病、小便不利、咽喉腫痛、胃熱嘔吐、癥瘕積聚、燙傷等多種疾病的治療[1]。蒽醌類是大黃的主要成分，極易在水中溶出，以游離蒽醌與結(jié)合蒽醌的形式存在，其中結(jié)合蒽醌通過(guò)水解或代謝可轉(zhuǎn)化為游離蒽醌及糖類。游離蒽醌與清熱瀉火功效相對(duì)應(yīng)，抗菌活性顯著，結(jié)合蒽醌與瀉下功效相對(duì)應(yīng)[2]。有研究表明，大黃的煎煮時(shí)間與蒽醌的含量有一定關(guān)系[3]，為此本研究選擇醋酸鎂染色紫外分光光度法測(cè)定大黃蒽醌類組分含量，探討不同煎煮時(shí)間對(duì)大黃總蒽醌類含量的影響，現(xiàn)進(jìn)行如下報(bào)道。

1.1 儀器設(shè)備

UV1780紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)、BP211D萬(wàn)分之一電子天平、R501旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵、DL-360超聲波清洗機(jī)、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱。

1.2 試劑試藥

取大黃的干燥根及根莖，大黃素，甲醇、醋酸鎂、冰醋酸、重蒸水、濃鹽酸。

1.3 方法

精密稱定12.5mg大黃素對(duì)照品，取適量甲醇溶解后置入50mL容量瓶?jī)?nèi)，加甲醇至刻度，配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。選擇510nm為測(cè)定波長(zhǎng)，精密量取0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2mL大黃素對(duì)照品溶液并置于蒸發(fā)皿中揮干，采用1%醋酸鎂甲醇溶液洗脫，測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：y=3.001x+0.0212，R=0.999，n=3。精密稱取0.2g大黃粉末，加40mL蒸餾水至于水浴加熱回流1h，濾紙濾出，濾出液用于測(cè)定游離蒽醌與結(jié)合蒽醌。（1）測(cè)定游離蒽醌：取10mL上述濾液，采用氯仿40mL分次萃取，之后再用5%NaOH～2%NH4OH混合液100mL分次萃取，洗滌后過(guò)濾，濾液加熱4min后冷卻至室溫，用混合堿液調(diào)整至100mL，30min后于510nm處比色，計(jì)算游離蒽醌含量。（2）測(cè)定總蒽醌：取上述濾液0.2ml×3，分別放置在具有刻度的試管內(nèi)（規(guī)格15mL），加入40%的FeCI3，加入水溶液0.5mL，經(jīng)水浴加熱20min后加入0.2mL的HCL，再次水浴加熱30min，同時(shí)振搖。完成以上操作后使用流水冷卻試液至室溫，將其倒入分液漏斗內(nèi)，加入2次乙醚，每次5.0mL，進(jìn)行萃取處理，再用5%NaOH至2%NH4OH混合堿液進(jìn)行2次萃取，分別為5.0mL與3.0mL，過(guò)濾后觀察波長(zhǎng)為535nm處的吸收度，算出百分含量。（3）測(cè)定結(jié)合蒽醌：取10mL上述濾液，加入10mL醋酸鎂與20mL氯仿水浴繼續(xù)回流2h，冷卻后分出氯仿液再用30mL氯仿分次提取，之后再用5%NaOH～2%NH4OH混合液100mL分次萃取，合并提取液并過(guò)濾，冷卻至室溫，用混合堿液調(diào)整至100mL，30min后于510nm處比色，計(jì)算總蒽醌含量，結(jié)合蒽醌=總蒽醌-游離蒽醌。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（χ±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

游離蒽醌在煎煮60min時(shí)含量最高（1.479mg），在煎煮10min是含量最低（0.881mg）；結(jié)合蒽醌在煎煮15min～30min時(shí)含量最高（1.283mg～1.320mg），在煎煮120min時(shí)含量最低（0.710mg）；總蒽醌在煎煮30min時(shí)含量最高（2.520mg），在煎煮10min時(shí)含量最低（1.973mg），見(jiàn)表1。

大黃是常用的一種中藥材，其治療作用包括涼血解毒、清熱瀉火、利濕退黃和瀉下攻積等，多通過(guò)不同炮制品方式進(jìn)行疾病治療?，F(xiàn)代藥理證實(shí)，大黃的抗菌、保肝、止血與利膽作用較佳，且能有效對(duì)抗腫瘤，可作為腫瘤患者的基礎(chǔ)藥物[4]。大黃具有生殖毒性與肝腎毒性，且生大黃的毒性最強(qiáng)，需要合理確定其煎煮時(shí)間，發(fā)揮減毒增效等效用。蒽醌類成分在大黃中的含量比較高，是其最主要的成分，可以用作大黃藥材質(zhì)量的評(píng)價(jià)指標(biāo)，也是大黃發(fā)揮藥理作用的化學(xué)物質(zhì)之一。為此，在大黃煎煮過(guò)程中需要分析蒽醌類的含量變化，總結(jié)不同煎煮時(shí)間下，蒽醌類含量的具體變化特點(diǎn)，確定大黃蒽醌類含量最高時(shí)的煎煮時(shí)間，篩選最佳的煎煮時(shí)間，進(jìn)而合理指導(dǎo)大黃的臨床使用，確保其能夠充分發(fā)揮其藥效[5]。

大黃以湯劑入藥，其煎煮時(shí)間的長(zhǎng)短常會(huì)影響有效成分含量，在本研究中結(jié)合蒽醌在煎煮30min時(shí)含量最高（1.320mg），在之后60min內(nèi)大幅下降之后趨于平穩(wěn)，30min后隨著煎煮時(shí)間的延長(zhǎng)游離蒽醌含量增加，在煎煮60min時(shí)含量最高（1.479mg），結(jié)合蒽醌水解為游離蒽醌速度加快，從大黃水煎液結(jié)合蒽醌的含量變化趨勢(shì)可得出要發(fā)揮瀉下作用煎煮時(shí)間應(yīng)控制在30min內(nèi)，要發(fā)揮清熱瀉火功效可適當(dāng)延長(zhǎng)煎煮時(shí)間，以1h為宜[6]。大黃水煎過(guò)程中蒽醌類成分水解過(guò)程早期隨著煎煮時(shí)間的改變主要經(jīng)歷溶出期（主要為結(jié)合蒽醌），30min后隨著煎煮時(shí)間的改變主要經(jīng)歷水解代謝期（主要為游離蒽醌），該溶出與分解平衡常受水環(huán)境、煎煮時(shí)間、溫度等因素的影響，因此除了加強(qiáng)煎煮時(shí)間對(duì)藥物的影響外，還需控制其他物理因素，最大限度保證藥物功效[7]。

綜上所述，在煎煮大黃時(shí)若用于清熱瀉火則煎煮60min以最大限度提高游離蒽醌含量，用于瀉下則煎煮30min即可以提高結(jié)合蒽醌含量，避免久煎以降低治療效果。

參考文獻(xiàn)

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