晏家友 ， 刁 慧 ， 李書偉 ， 湯文杰 ， 鄺聲耀

（1.四川省畜牧科學研究院，四川成都 610066；2.動物遺傳育種四川省重點實驗室，四川成都 610066；3.四川省畜科飼料有限公司，四川成都 610066；4.畜禽生物制品四川省重點實驗室，四川雙流 616200）

鐵是動物機體必需的重要微量元素，是功能蛋白（血紅蛋白和肌紅蛋白）和含鐵酶（細胞色素氧化酶、過氧化氫酶和黃嘌呤氧化酶等）的組成成分或活化因子， 主要通過血紅蛋白運輸氧氣和二氧化碳，以及肌紅蛋白固定和儲存氧，參與機體組織呼吸過程（Dong 等，2020；楊維仁等，2014）。 以植物性原料為主的肉兔飼糧中鐵的含量普遍不足，必須額外補充才能滿足肉兔對鐵的營養(yǎng)需要。厲磊（2016）研究發(fā)現，日糧中添加100 mg/kg 硫酸亞鐵，不但可以提高新西蘭肉兔的平均日增重和飼料轉化率，而且可以提高成活率。 與無機鐵相比，有機鐵具有化學結構穩(wěn)定、生物學利用率高、環(huán)境污染小和安全性能好等優(yōu)勢，在促進吸收利用、減少糞污排放、改善生產性能和提升肉品質量方面體現出理想效果（丁浩軒等，2021；劉明美等，2015）。 目前，在豬、雞等主要養(yǎng)殖動物飼糧中廣泛應用的有機鐵包括：富馬酸亞鐵、 甘氨酸鐵絡合物和氨基酸鐵絡合物等，它們?yōu)樘岣邉游锷L效率和增加養(yǎng)殖經濟效益發(fā)揮了積極作用。 但是，關于這些鐵源在肉兔飼糧中的應用效果尚鮮見研究報道。 因此，本試驗通過研究硫酸亞鐵、富馬酸亞鐵、甘氨酸鐵絡合物和氨基酸鐵絡合物對新西蘭肉兔生長性能、血液免疫和抗氧化指標及組織器官鐵沉積的影響，探討不同鐵源在肉兔飼糧中的應用效果，為養(yǎng)兔生產中鐵源的科學選擇和合理利用提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 試驗鐵源 對照組采用無機鐵 （一水硫酸亞鐵，飼料級，Fe2+實測值為30%）；試驗組采用有機鐵，分別為富馬酸亞鐵 （飼料級，Fe2+實測值為30.6%）、甘氨酸鐵絡合物（飼料級，Fe2+實測值為17%）和氨基酸鐵絡合物（飼料級，Fe2+實測值為10%）。試驗所需鐵源由四川省畜科飼料有限公司提供。

1.2 試驗設計與基礎日糧組成 選取35 日齡斷奶、 體重相近的健康新西蘭仔兔192 只 （公母各半），按體重和性別一致原則，隨機分為4 組，每組8 個重復，每個重復6 只兔。 在同一棟封閉式兔舍內，采用不銹鋼籠子（60 cm×60 cm×45 cm）飼養(yǎng)仔兔，每個籠子2 只兔（公母各1 只），每3 籠兔為1 個重復。 參照 De Blas 和 Wiseman（1998）《兔的營養(yǎng)需要》配制基礎飼糧，對照組飼糧含一水硫酸亞鐵形式的鐵100 mg/kg，試驗Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組飼糧分別含富馬酸亞鐵、 甘氨酸鐵絡合物和氨基酸鐵絡合物形式的鐵100 mg/kg。試驗基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗在四川省畜牧科學研究院肉兔科研基地進行。 試驗前，對兔舍進行全面清掃消毒。 每天 08：00 和 17：00 準時飼喂試驗兔，自由采食、飲水，人工定時清糞。 執(zhí)行兔場原有免疫程序，保持兔舍環(huán)境衛(wèi)生，控制溫濕度，確保各組兔的飼養(yǎng)管理條件一致。 試驗預試期7 d，正試期49 d。

1.4 樣品采集與處理

1.4.1 血樣的采集與處理 試驗第49 天，從每個處理組隨機選取8 只兔空腹采血， 經耳緣動脈采血 5 mL，靜置 10 min，3000 r/mim 離心 20 min，制備血清，-20 ℃保存，待測。

1.4.2 組織器官的采集與處理 試驗結束當天，從每個處理組隨機選取8 只健康兔，經屠宰后，分離出肝臟和腎臟，于65 ℃烘干至恒重，經室溫回潮24 h 后碾碎，測定鐵含量。

1.5 測定指標與方法

1.5.1 生長性能指標 根據試驗兔始重、 末重與試驗天數，計算平均日增重（ADG）；通過試驗期總喂料量和余料量，計算平均日采食量（ADFI）；根據每個重復兔的平均日采食量和平均日增重，計算料重比。

平均日增重/（g/d）=（末重-始重）/試驗天數；

平均日采食量/（g/d）=（總喂料量-剩料量）/試驗天數；

料重比=平均日采食量/平均日增重。

1.5.2 血清免疫和抗氧化指標 采用比濁法測定血清溶菌酶（LZM）含量，羥胺法測定血清超氧化物歧化酶（SOD）含量，硫代巴比妥酸法測定血清丙二醛（MDA）含量。 試劑盒由南京建成生物工程研究所有限公司生產制造，嚴格遵守操作規(guī)范。

1.5.3 組織器官中鐵含量的測定 鐵含量按照《食品安全國家標準食品中鐵的測定》（GB 5009.90-2016）中第一法進行測定，使用的儀器設備主要有原子吸收光譜儀、分析天平和微波消解儀等。

1.6 數據統計與分析 試驗數據經過Excel 2010 處理后， 利用SPSS 22.0 統計軟件進行方差分析，差異顯著時，采用Duncan’s 方法進行多重比較，試驗結果以“平均值±標準差”表示，以P <0.05 為差異顯著判斷標準。

2 結果與分析

2.1 不同鐵源對肉兔生長性能的影響 由表2可知，與對照組相比，試驗Ⅰ組肉兔ADG 和ADFI顯著提高 14.90%和 4.69%（P < 0.05），F/G 顯著降低 8.78%（P < 0.05）； 試驗Ⅲ組肉兔 ADG 顯著提高11.07%（P < 0.05）。試驗Ⅰ組肉兔ADG 顯著高于試驗Ⅱ組11.21%（P < 0.05）。

表2 不同鐵源對肉兔生長性能的影響

2.2 不同鐵源對肉兔血清免疫和抗氧化指標的影響 由表3 可知，與對照組相比，試驗Ⅰ組肉兔血清LZM 和SOD 含量顯著提高85.25%和8.84%（P< 0.05），但 MDA 無顯著差異（P > 0.05）；試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組肉兔血清LZM、SOD 和MDA 含量均無顯著差異（P > 0.05）。

表3 不同鐵源對肉兔血清免疫和抗氧化指標的影響

2.3 不同鐵源對肉兔組織器官鐵沉積的影響由表4 可知，與對照組比，試驗Ⅰ組肉兔肝臟鐵含量顯著提高18.42%（P < 0.05）， 但腎臟鐵含量無顯著差異（P > 0.05）；試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組肉兔肝臟鐵和腎臟鐵含量均無顯著差異（P > 0.05）。

表4 不同鐵源對肉兔組織器官鐵沉積的影響 mg/kg

3 討論

3.1 不同鐵源對肉兔生長性能的影響 鐵作為動物機體必需的一種微量元素，對維持動物生長和調節(jié)新陳代謝具有重要的營養(yǎng)生理作用。動物缺鐵會使血紅蛋白的合成發(fā)生障礙，導致血液運輸氧氣的能力下降，引起機體貧血；而鐵過量容易誘導產生活性氧自由基， 使體內氧化和抗氧化系統失衡，造成機體損傷（Qi 等，2020；Bhattarai 等，2015）。 劉公言和張偉（2017）研究發(fā)現，在新西蘭肉兔飼糧中添加100 mg/kg 硫酸亞鐵可以顯著提高肉兔的平均日增重，同時可顯著降低料重比。 本試驗研究結果表明，在飼糧中添加100 mg/kg 富馬酸亞鐵與硫酸亞鐵相比， 可以顯著提高新西蘭肉兔的平均日增重、平均日采食量和飼料轉化率，并且作用效果比甘氨酸鐵絡合物和氨基酸鐵絡合物更好。蔣亮和張偉（2009）研究也證實，與硫酸亞鐵相比，富馬酸亞鐵更能有效改善仔豬血液鐵的營養(yǎng)狀況，進而提高仔豬生長性能。 這就提示，在新西蘭肉兔飼糧中添加富馬酸亞鐵，更有利于提高生長性能。

3.2 不同鐵源對肉兔血清免疫和抗氧化指標的影響 血清免疫和抗氧化指標是判斷動物機體健康狀況的重要參考。 LZM 又稱胞壁質酶或N-乙酰胞壁質聚糖水解酶，是一種對細菌細胞壁具有水解作用的蛋白酶，在抗菌方面尤其是抑殺革蘭氏陽性菌中發(fā)揮著重要作用 （Nyachoti 等，2012；Masschalck等，2003）。 本試驗研究結果表明，在新西蘭肉兔飼糧中添加100 mg/kg 富馬酸亞鐵與硫酸亞鐵相比，可以顯著提高血清中LZM 的含量， 但是甘氨酸鐵絡合物組和氨基酸鐵絡合物組卻沒有顯著差異。因此，在新西蘭肉兔飼糧中添加富馬酸亞鐵，更有利于增強機體免疫功能。 SOD 能清除超氧陰離子自由基，保護細胞免受損傷，對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用（Wang 等，2017）。 MDA是一種高活性脂質過氧化產物，其含量高低可以衡量脂質過氧化程度，間接反映機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度 （Wu 等，2009）。 因而血清 SOD 和MDA 的含量可作為評價機體防御功能的指標。 本試驗研究結果表明，在新西蘭肉兔飼糧中添加100 mg/kg 富馬酸亞鐵與硫酸亞鐵相比，可以顯著提高血清中LZM 和SOD 的含量，但是甘氨酸鐵絡合物組和氨基酸鐵絡合物組同樣沒有表現出顯著差異。因此，在新西蘭肉兔飼糧中添加富馬酸亞鐵，更有利于增強機體抗氧化功能。

3.3 不同鐵源對肉兔組織器官鐵沉積的影響 鐵在動物體內主要儲存于肝臟、脾臟和骨髓等，張兆琴和吳占福（2006）報道，鐵在動物組織器官中的沉積能力依次為：脾臟＞肝臟＞肺臟＞心臟。本試驗研究結果表明， 在飼糧中添加100 mg/kg 硫酸亞鐵、富馬酸亞鐵、 甘氨酸鐵絡合物或氨基酸鐵絡合物，新西蘭肉兔肝臟中鐵的沉積量高于腎臟。 這就提示，肝臟是體內鐵代謝的重要器官，也是體內主要的貯鐵器官（Cappellini 等，2006）。本試驗研究結果還顯示，在飼糧中添加100 mg/kg 硫酸亞鐵、富馬酸亞鐵、甘氨酸鐵絡合物或氨基酸鐵絡合物，新西蘭肉兔肝臟和腎臟鐵沉積量從高到低依次為：富馬酸亞鐵＞氨基酸鐵絡合物＞甘氨酸鐵絡合物＞硫酸亞鐵。由此可見，有機鐵在肉兔組織器官中的鐵沉積量高于無機鐵，而有機鐵中富馬酸亞鐵在肉兔肝臟和腎臟中的鐵沉積量最高。這可能與不同鐵源的相對生物學利用率有關，但具體原因還需進一步研究。

4 結論

本試驗條件下，在飼糧中添加100 mg/kg 富馬酸亞鐵形式的鐵，新西蘭肉兔生長性能最好，血清LZM 和 SOD 含量最高、MDA 含量最低， 肝臟鐵和腎臟鐵沉積量最高。 綜合本試驗測定指標可見，富馬酸亞鐵在新西蘭肉兔飼糧中的應用效果優(yōu)于硫酸亞鐵、甘氨酸鐵絡合物和氨基酸鐵絡合物。