高鴻福，李猛超，劉玉峰，何忠偉，殷 蕊，孫桂清，宮春光

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 海洋學(xué)院，河北 秦皇島 066000；2.河北省渤海魚(yú)類(lèi)種質(zhì)資源保護(hù)與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 北戴河中心實(shí)驗(yàn)站，河北 秦皇島 066100；3.河北省海洋與水產(chǎn)科學(xué)研究院，河北 秦皇島 066200)

南美白對(duì)蝦(LitopenaeusVannamei)也叫做凡納濱對(duì)蝦，在分類(lèi)上屬于節(jié)肢動(dòng)物門(mén)(Arthropoda)，甲殼綱(Crustacea)，十足目(decapod)，對(duì)蝦科(Squilla familia)，濱對(duì)蝦屬(Litopenaeus)[1]，具有適應(yīng)性強(qiáng)、肉質(zhì)鮮美等特點(diǎn)[2]。南美白對(duì)蝦是我國(guó)的主養(yǎng)蝦類(lèi)，在我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中占有重要地位，2019年我國(guó)大陸地區(qū)蝦產(chǎn)量為479.8萬(wàn)噸，其中南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量為181.6萬(wàn)噸，河北省蝦產(chǎn)量為7.97萬(wàn)噸，其中南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量為3.87萬(wàn)噸[3]。目前，影響南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的主要瓶頸因素是病害問(wèn)題，而養(yǎng)殖水體中的弧菌(Vibrio)是導(dǎo)致各種病害發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因子。弧菌廣泛分布于河口、海灣、近岸海域的海水中，是養(yǎng)殖水體中的條件致病菌，它可以直接引起南美白對(duì)蝦發(fā)病[4]，如爛鰓病[5]、紅腿病[6]、爛眼病[7]等，同時(shí)也會(huì)導(dǎo)致蝦的體質(zhì)下降，從而被其它種類(lèi)的病原感染。因此，控制養(yǎng)殖水體中的弧菌密度對(duì)有效防控病害具有重要意義。筆者對(duì)滄州黃驊地區(qū)南美白對(duì)蝦不同養(yǎng)殖模式水體中弧菌密度進(jìn)行了周年跟蹤監(jiān)測(cè)，希望監(jiān)測(cè)結(jié)果能夠?yàn)轲B(yǎng)殖戶在養(yǎng)殖過(guò)程中的消毒、改底、換水等管理操作提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 采樣時(shí)間和地點(diǎn)

本試驗(yàn)的開(kāi)展時(shí)間為2021年1月-2022年1月，每月1號(hào)和15號(hào)進(jìn)行采樣，每次采樣均為當(dāng)日下午14:00時(shí)；采樣地點(diǎn)為河北省滄州市中捷養(yǎng)殖公司，分別選取該公司的南美白對(duì)蝦單養(yǎng)模式、南美白對(duì)蝦+三疣梭子蟹(Portunusitritubercatus)+日本對(duì)蝦(Penaeusjaponicus)混養(yǎng)模式和南美白對(duì)蝦大水面粗養(yǎng)模式，每種養(yǎng)殖模式各選取3個(gè)養(yǎng)殖池。

1.2 采樣方法和指標(biāo)測(cè)定

在所選取的養(yǎng)殖池中隨機(jī)選取3個(gè)采樣點(diǎn)，各采樣點(diǎn)的直線距離>20 m；取距水面20 cm的水樣。水溫指標(biāo)在采樣現(xiàn)場(chǎng)使用水溫計(jì)直接測(cè)量；弧菌培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，將采集的水樣經(jīng)振蕩器搖勻后，移液槍吸取100 μL滴入TCBS平板，用一次性涂布棒進(jìn)行涂布，每組重復(fù)三次，將TCBS平板放入28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24 h后對(duì)TCBS平板上的弧菌菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)并記錄。每次弧菌密度數(shù)據(jù)取每個(gè)養(yǎng)殖模式下3個(gè)養(yǎng)殖池的平均值，季度數(shù)據(jù)取每個(gè)季度6次采樣的平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同養(yǎng)殖模式下弧菌密度與水溫的關(guān)系

試驗(yàn)所選擇的南美白對(duì)蝦單養(yǎng)模式、南美白對(duì)蝦+三疣梭子蟹+日本對(duì)蝦混養(yǎng)模式和南美白對(duì)蝦大水面粗養(yǎng)模式都是室外池塘，其池水溫度變化主要受天氣影響。圖1顯示，三種養(yǎng)殖模式下池水溫度的變化具有典型溫帶氣候特點(diǎn)，四季分明；而水中弧菌密度的變化與水溫變化趨勢(shì)基本相同，即水溫較低時(shí)，弧菌密度較少，水溫較高時(shí)，弧菌密度較高。其中當(dāng)水溫在3～4 ℃時(shí)，三種養(yǎng)殖模式下的池水中都幾乎無(wú)法培養(yǎng)出弧菌；而當(dāng)水溫在23 ℃以上時(shí)，三種養(yǎng)殖模式下的弧菌密度均超過(guò)800 cfu/mL。

圖1 不同養(yǎng)殖模式下弧菌密度隨水溫的變化情況

在2021年全年中，水溫的最低點(diǎn)出現(xiàn)在2月中旬，最高點(diǎn)出現(xiàn)在7月中旬。而實(shí)際上從1月初至3月初的弧菌密度均非常低，均在10 cfu/mL以下；這一數(shù)據(jù)也解釋了為什么在冬季進(jìn)行工廠化養(yǎng)殖南美白對(duì)蝦會(huì)有成活率高、單產(chǎn)高的現(xiàn)象，即水中條件致病弧菌的密度對(duì)南美白對(duì)蝦的養(yǎng)殖成活率具有決定性影響。此外，三種養(yǎng)殖模式下的弧菌最高密度均未出現(xiàn)在7月中旬的水溫最高點(diǎn)，而是出現(xiàn)在9月中旬，此時(shí)水溫已從高點(diǎn)的30 ℃以上下降到25 ℃左右，但弧菌密度卻從800 cfu/mL左右上升到了1 000 cfu/mL以上。造成這種現(xiàn)象的主要原因是9月初開(kāi)始?xì)鉁刂饾u下降，養(yǎng)殖池中的表層水溫受氣溫影響最明顯，下降速度較快，而底層水溫此時(shí)仍較高，因此會(huì)發(fā)生上下水層對(duì)流，出現(xiàn)反底現(xiàn)象。南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖池經(jīng)一個(gè)周期的養(yǎng)殖，此時(shí)底部聚集了大量有機(jī)物和弧菌(靜態(tài)條件下弧菌有沉降，水的下層密度更高)，經(jīng)對(duì)流后弧菌會(huì)被重懸，且有機(jī)物會(huì)為其提供繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)，從而導(dǎo)致弧菌密度出現(xiàn)跳升的現(xiàn)象。

5月中旬到10月中旬(基本上是一個(gè)完整的養(yǎng)殖周期)，三種養(yǎng)殖模式中，南美白對(duì)蝦+三疣梭子蟹+日本對(duì)蝦混養(yǎng)模式的弧菌密度最高，其中9月中旬的最高點(diǎn)達(dá)到了1 300 cfu/mL以上；南美白對(duì)蝦單養(yǎng)模式次之，最高點(diǎn)在1 170 cfu/mL左右；南美白對(duì)蝦大水面粗養(yǎng)模式最低，最高點(diǎn)在1 000 cfu/mL以下。餌料種類(lèi)及投喂量不同是出現(xiàn)這種情況的主要原因，即弧菌繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)條件不同。南美白對(duì)蝦大水面粗養(yǎng)模式具有水面大、放苗密度低(7.5萬(wàn)尾/hm2)的特點(diǎn)，這種模式下在養(yǎng)殖前期(7月中旬前)基本不投喂，當(dāng)養(yǎng)殖中后期能夠明顯看到池中的蝦有一定密度時(shí)才會(huì)少量投喂，使用配合飼料，總體上投餌量較少。南美白對(duì)蝦單養(yǎng)模式放苗密度相對(duì)較高(放苗30萬(wàn)～37.5萬(wàn)尾/hm2)，全程投喂，主要使用配合飼料。而南美白對(duì)蝦+三疣梭子蟹+日本對(duì)蝦混養(yǎng)模式中，全程投喂，且由于三疣梭子蟹和日本對(duì)蝦的存在，養(yǎng)殖戶多增加投喂鮮活餌料，其中，在養(yǎng)殖前期(5月)主要投喂鹵蟲(chóng)(Artemiasaline)成蟲(chóng)，養(yǎng)殖中期(6—7月)主要投喂光滑藍(lán)蛤(Potamocorbulalaevis)和配合飼料，在養(yǎng)殖后期(8—10月)則投喂冰鮮雜魚(yú)和配合飼料，鮮活餌料對(duì)水體的污染(有機(jī)物排放)明顯更高。

2.2 不同養(yǎng)殖模式下弧菌密度隨季節(jié)的變化情況

三種南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖模式下弧菌密度隨季節(jié)的變化情況見(jiàn)圖2。在總的趨勢(shì)變化上，三種模式是一致的。春季弧菌密度最低，低于10 cfu/mL；秋季弧菌密度最高，高于750 cfu/mL；夏季的弧菌密度次高，在450～620 cfu/mL左右；冬季弧菌密度次低，在200 cfu/mL左右。此次監(jiān)測(cè)有一個(gè)現(xiàn)象值得注意，即夏季南美白對(duì)蝦大水面粗養(yǎng)模式下弧菌密度是偏高的，這有違常理。如前文所述，這種養(yǎng)殖模式下在養(yǎng)殖前期是不投喂的，水中有機(jī)質(zhì)含量應(yīng)該較少，弧菌密度也應(yīng)該較低。而出現(xiàn)這種現(xiàn)象的主要原因是由黃驊地區(qū)的特殊環(huán)境造成的，該地區(qū)多數(shù)養(yǎng)殖池由于進(jìn)水困難(緊鄰排污河，進(jìn)水有季節(jié)性)，養(yǎng)殖結(jié)束后不清塘，不排水，養(yǎng)殖池水反復(fù)使用，尤其是大水面，因而池底沉積了大量有機(jī)物，造成第二年5月以后弧菌密度偏高。實(shí)際上，在我國(guó)北方，冬季多數(shù)地區(qū)的養(yǎng)殖池都放干池水、曬塘、清池，而黃驊地區(qū)在冬季仍能夠到南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖池塘采樣、監(jiān)測(cè)弧菌密度，也是出于這種原因。

春季：2—4月，夏季：5—7月，秋季：8—10月，冬季：11月—翌年1月

夏季和秋季，南美白對(duì)蝦+三疣梭子蟹+日本對(duì)蝦混養(yǎng)模式下的弧菌密度都是最高，而這兩個(gè)季節(jié)恰好是養(yǎng)殖季節(jié)。這種結(jié)果也表明了鮮活餌料對(duì)水體的污染確實(shí)更大。

3 討論

弧菌可以直接引起南美白對(duì)蝦疾病，也會(huì)導(dǎo)致蝦的體質(zhì)下降，給其它病原的侵襲創(chuàng)造機(jī)會(huì)，有效控制養(yǎng)殖水體中弧菌的密度對(duì)保證養(yǎng)殖成活率具有重要意義?；【芏染烤菇档偷蕉嗌俨攀前踩哪壳吧袩o(wú)定論，這和蝦的體質(zhì)、養(yǎng)殖密度、水環(huán)境條件等多因子相關(guān)，但總體上應(yīng)是越少越好。

降低水體中弧菌密度的方法有很多，如使用合適的消毒劑消毒、換水、改底；使用微生態(tài)制劑拮抗等，具體采用何種方法需要將各種因素放到一起綜合考量，分析利弊。本項(xiàng)監(jiān)測(cè)結(jié)果表明：(1)在條件容許的情況下，應(yīng)盡量減少鮮活餌料的使用(與三疣梭子蟹混養(yǎng)比較特殊，目前缺少三疣梭子蟹的專用配合飼料，不投喂雜魚(yú)難以育肥)；(2)水溫越高，弧菌密度越高，高溫季節(jié)需要加強(qiáng)降低弧菌密度的管理操作；(3)9月中旬前后，由于會(huì)出現(xiàn)反底現(xiàn)象，因此不能因?yàn)樗疁亟档投尚?，這個(gè)階段要特別注意控制弧菌的密度。