嵇金陵，張小云，王宏剛，靳德甫，劉本，姜玉章(南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院檢驗科，江蘇淮安 223300)

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease, IBD)是一組慢性、進(jìn)行性炎癥性疾病，病因仍未明確，臨床特點主要為腹痛、腹瀉及黏液膿血便，其特征在于活動期和緩解期交替出現(xiàn)且時間不可預(yù)測，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量。目前，IBD的篩查和監(jiān)測主要依賴結(jié)腸鏡檢查和組織病理學(xué)評估，均為侵入性檢查，存在一定的風(fēng)險且有一定的禁忌癥和局限性。糞便鈣衛(wèi)蛋白(fecal calprotectin, FC)是一種能與鈣結(jié)合的不均一的復(fù)合蛋白質(zhì)，主要位于中性粒細(xì)胞內(nèi)，約占中性粒細(xì)胞胞漿蛋白的30%～60%，該蛋白質(zhì)在糞便中的存在意味著中性粒細(xì)胞向胃腸腔的遷移，并且其濃度與腸腔內(nèi)炎癥的存在和程度密切相關(guān)[1]。因此，本研究旨在探討FC作為一種非侵入性的評價腸道炎癥水平指標(biāo)的可能性。

1 材料與方法

1.1研究對象 選擇2020年4月—2021年3月淮安市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科住院確診的98例IBD患者為研究對象，男性66例(67.3%)，女性32例(32.7%)，年齡為(33±7.6)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)會炎癥性腸病學(xué)組制定的炎癥性腸病診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]；(2)年齡>18歲；(3)患者知情配合且一般資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他可能影響FC水平的疾病，如胃腸道腫瘤、胃腸道感染、肝硬化、長期服用非甾體抗炎藥等；(2)妊娠或哺乳期婦女。IBD患者中包含克羅恩病(Crohn′s disease, CD)44例，潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)54例。健康人對照為本院體檢中心體檢健康者37例，男性21例(56.8%)，女性16例(43.2%)，年齡(41.9±10.4)歲。本研究獲得本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)(倫理文件編號：YX-2021-013-01)。

1.2儀器與試劑 WIZ-A202免疫分析儀、糞便鈣衛(wèi)蛋白膠體金免疫層析法檢測試劑盒(廈門為正生物科技公司)，XN9000全自動血細(xì)胞分析儀及配套試劑(日本Sysmex公司)，Cobas c702自動生化分析儀及配套試劑(瑞士Roche公司)。

1.3方法 患者于腸鏡檢查前1～2 d，采集新鮮糞便標(biāo)本50 mg，按試劑盒說明書處理標(biāo)本并檢測FC，WIZ-A202膠體金免疫分析儀將膠體金顯色帶轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號，并根據(jù)試劑的標(biāo)準(zhǔn)曲線將數(shù)字信號轉(zhuǎn)化為FC的濃度值(正常參考區(qū)間：<60 μg/g，可報告區(qū)間：15～1 000 μg/g)。同時采集靜脈血，用XN9000血細(xì)胞分析儀檢測白細(xì)胞(white blood cell, WBC)、血紅蛋白(hemoglobin, Hb)、中性粒細(xì)胞(neutrophil, Neu)及淋巴細(xì)胞(lymphoctye, Lym)，計算中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio, NLR)；Cobas c702全自動生化分析儀檢測血清中膽紅素(total bilirubin, TBil)(重氮法)、總蛋白(total protein, TP)(比色法)、清蛋白(albumin, Alb)(比色法)及鈣離子(calcium, Ca)(比色法)濃度。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 23.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行。各組數(shù)據(jù)正態(tài)性檢驗用Shapiro-wilk檢驗，正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組之間比較用獨立t檢驗；偏態(tài)分布的計量資料用中位數(shù)(25分位數(shù)，75分位數(shù))表示，兩組之間比較用Mann-WhitneyU檢驗。采用Spearman相關(guān)性分析評價FC與其余血液學(xué)指標(biāo)之間的相關(guān)性。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組間FC及血液學(xué)指標(biāo)水平比較 IBD組患者FC水平和NLR顯著高于健康人對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)，而TBil、TP、Alb、Ca及Hb水平顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.001)。兩組之間WBC水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.158)。見表1。

表1 兩組間FC及血液學(xué)指標(biāo)水平比較

2.2IBD患者FC水平與血液學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性 IBD患者的FC水平和NLR呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(r=0.636,P<0.001)，與TBil(r=-0.529,P<0.001)、TP(r=-0.341,P=0.001)、Alb(r=-0.404,P<0.001)及Ca(r=-0.341,P=0.001)呈負(fù)相關(guān)，與Hb無相關(guān)性(r=0.176,P>0.05)。

3 討論

FC由于理化性質(zhì)穩(wěn)定，可抵抗消化酶的破壞及腸道細(xì)菌的降解，在糞便中能被有效地檢測到，其濃度與排至腸腔中的中性粒細(xì)胞數(shù)量成正比，所以在一定程度上可以特異性地反映腸道炎癥情況[3]。本研究結(jié)果顯示，IBD患者的FC水平顯著高于健康人對照組，說明FC可作為篩查IBD的無創(chuàng)指標(biāo)。

中性粒細(xì)胞作為吞噬細(xì)胞參與清除感染性炎癥中的病原體，在無菌性炎癥的組織修復(fù)和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。淋巴細(xì)胞則參與免疫系統(tǒng)的長期反應(yīng)。機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)時，中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞之間的均衡狀態(tài)被打破，NLR即升高。本研究中IBD患者的NLR顯著高于對照組，且NLR與FC水平呈正相關(guān)，說明人體腸道內(nèi)發(fā)生炎癥時，產(chǎn)生大量炎性細(xì)胞，其中大部分是中性粒細(xì)胞，中性粒細(xì)胞可以由循環(huán)池穿過腸壁進(jìn)入腸腔內(nèi)，聚集在發(fā)生炎癥的腸黏膜上，導(dǎo)致FC水平升高。

研究報道，氧化應(yīng)激是IBD致病的潛在機(jī)制，可能是由于IBD患者活性氧產(chǎn)生的增加導(dǎo)致膽紅素消耗增多，從而引起腸道損傷[4]。Lenícek等[5]已證實CD患者的低TBil水平是由炎癥介導(dǎo)的氧化應(yīng)激增加導(dǎo)致，TBil表達(dá)水平與炎癥標(biāo)志物表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。本研究中IBD患者的血清TBil水平顯著低于對照組，且與FC水平呈負(fù)相關(guān)。

IBD患者多數(shù)處于相對或絕對營養(yǎng)缺乏，這些患者的營養(yǎng)不良主要與吸收不良、藥物治療、胃腸道營養(yǎng)損傷和能量消耗增加有關(guān)[6]。本研究中IBD患者的TP、Alb以及Ca均低于對照組，并且這3個指標(biāo)與FC水平呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)C結(jié)合3個指標(biāo)可考慮作為判斷IBD患者炎癥程度及營養(yǎng)缺乏的標(biāo)志物，對于是否進(jìn)一步補(bǔ)充營養(yǎng)素具有指導(dǎo)意義。