俞 瑩， 李建杰， 李漢華， 黃 娟， 翁文浩， 陳學(xué)飛

（同濟(jì)大學(xué)附屬楊浦醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200090）

前列腺癌是男性最常見(jiàn)的癌癥之一，在美國(guó)男性癌癥相關(guān)死亡中居第2位[1]。隨著我國(guó)人口老齡化的發(fā)展，前列腺癌的發(fā)病率逐年升高[2]。盡管雄激素剝奪療法、放療和外科手術(shù)在前列腺癌的臨床治療方面取得了一定的進(jìn)展，但前列腺癌的發(fā)病率和死亡率仍較高[3]。目前，靶向治療作為前列腺癌的一種重要且有效的治療策略受到越來(lái)越多的關(guān)注。了解前列腺癌進(jìn)展的分子基礎(chǔ)可為前列腺癌的治療提供新的策略。微小RNA（microRNA，miR）是一類(lèi)由21～24個(gè)核苷酸組成的高度保守的非編碼單鏈RNA，在癌細(xì)胞增殖、分化、侵襲和轉(zhuǎn)移等一系列生物學(xué)過(guò)程發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，被視為腫瘤發(fā)生和發(fā)展的重要參與者。有研究結(jié)果顯示，微小RNA-4429（microRNA-4429，miR-4429）與宮頸癌[4]、多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤[5]、胃癌[6]以及甲狀腺乳頭狀癌[7]有關(guān)，主要起抑癌作用，但在前列腺癌中的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。異黏蛋白（metadherin，MTDH）被發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)膠質(zhì)瘤[8]等多種腫瘤中呈高表達(dá)。miRNA靶標(biāo)預(yù)測(cè)分析結(jié)果顯示，miR-4429與MTDH的3′非翻譯區(qū)（3′untranslated region，3′UTR）存在靶向結(jié)合位點(diǎn)[9]。本研究擬探討miR-4429在前列腺癌細(xì)胞系中相對(duì)表達(dá)量的變化及其對(duì)癌細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力的影響。

1 材料和方法

1.1 試劑

miR-4429模擬物（miR-4429 mimic）、miR-4429抑制物（miR-4429 inhibitor）、模擬物陰性對(duì)照（mimic NC）和抑制物陰性對(duì)照（inhibitor NC）購(gòu)自上海吉瑪制藥公司。Trizol試劑、RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）試劑盒（miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix和ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix）購(gòu)自南京諾唯贊生物科技有限公司。兔抗MTDH單克隆抗體、甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗體、辣根過(guò)氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）標(biāo)記的羊抗兔（鼠）IgG抗體及Lipofectamine 2000均購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司。CCK-8試劑盒購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)研究所。Transwell小室（8 μm）和Matrigel基質(zhì)膠購(gòu)自美國(guó)Corning公司。pmirGLO熒光素酶報(bào)告載體及MTDH過(guò)表達(dá)載體的構(gòu)建由通用生物系統(tǒng)（安徽）有限公司完成。

1.2 細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)

人前列腺癌細(xì)胞系DU145、22rv1、PC3、LNCaP、VCaP和人前列腺上皮細(xì)胞系RWPE-1均購(gòu)自美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心。RWPE-1細(xì)胞采用含L-谷氨酰胺的F12K細(xì)胞培養(yǎng)基（美國(guó)Gibco公司）培養(yǎng)；DU145、PC3、LNCaP、22rv1細(xì)胞均采用RPMI 1640培養(yǎng)基（美國(guó)Invitrogen公司）培養(yǎng)，VCaP細(xì)胞采用Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基（美國(guó)Invitrogen公司）培養(yǎng)。所有培養(yǎng)基均補(bǔ)充青霉素100 U/mL、鏈霉素100 mg/L和10%胎牛血清。所有細(xì)胞放置于37 ℃、5% CO2的飽和濕度恒溫箱中常規(guī)培養(yǎng)。

1.3 RT-qPCR檢測(cè)miR-4429及MTDH的相對(duì)表達(dá)量

按TRIzol試劑說(shuō)明書(shū)提取細(xì)胞總RNA，RNA純度和濃度測(cè)定合格后，使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒合成互補(bǔ)DNA（complementary DNA，cDNA）。以cDNA為模板，分別按照miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix試劑盒和ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix試劑盒說(shuō)明書(shū)配置miR-4429及MTDH反應(yīng)體系，反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性10 min；94 ℃變性15 s，60 ℃退火30 s，70 ℃延伸25 s，共40個(gè)循環(huán)。檢測(cè)儀器為ABI 7900實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（美國(guó)ABI公司）。引物均由生工生物工程（上海）股份有限公司進(jìn)行合成。miR-4429以U6作為內(nèi)參基因，MTDH以GAPDH作為內(nèi)參基因。miR-4429上游引物為5′-CGCGAAAAGCTGGGCTGA-3′，下游引物為5′-AGTGCAGGGTCCGAGGTATT-3′；MTDH上游引物為5′-TGTTGAAGTGGCTGAGGG-3′，下游引物為5′-CAGGAAATGATGCGGTTG-3′；U6上游引物為5′-CTCGCTTCGGCAGCACA-3′，下游引物為5′-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3′，GAPDH上游引物為5′-GGGAAACTGTGGCGTGAT-3′，下游引物為5′-TGTCCCGGCAGAATTTCC-3′，根據(jù)2-ΔΔCt法計(jì)算miRNA-4429和MTDH的相對(duì)表達(dá)量。

1.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染

將PC3細(xì)胞接種于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板，培養(yǎng)至細(xì)胞融合度達(dá)60%～70%時(shí)進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染。按Lipofectamine 2000說(shuō)明書(shū)分別將miR-4429 mimic、miR-4429 inhibitor、mimic NC和inhibitor NC轉(zhuǎn)染至PC3細(xì)胞，轉(zhuǎn)染24 h后，采用RT-qPCR檢測(cè)miR-4429的相對(duì)表達(dá)量，確定轉(zhuǎn)染效率。

1.5 細(xì)胞增殖能力檢測(cè)

采用CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖能力。收集轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic、miR-4429 inhibitor、陰性對(duì)照mimic NC和inhibitor NC的PC3細(xì)胞，按2 000個(gè)細(xì)胞/孔的密度分別接種于96孔板，每組設(shè)置6個(gè)復(fù)孔，每孔加入10 μL CCK-8反應(yīng)液，37 ℃孵育，接種細(xì)胞后12、24、36、48、60 h，通過(guò)Multiskan Sky全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀（美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司）測(cè)定450 nm波長(zhǎng)處各孔不同時(shí)間點(diǎn)的吸光度（A）值，繪制增殖曲線。

1.6 集落形成試驗(yàn)

收集轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic、miR-4429 inhibitor、mimic NC和inhibitor NC的PC3細(xì)胞，收集轉(zhuǎn)染mimic NC、miR-4429 mimic、過(guò)表達(dá)空載質(zhì)粒（Vector）、MTDH過(guò)表達(dá)質(zhì)粒（MTDH OE）以及共轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic和MTDH過(guò)表達(dá)質(zhì)粒（MTDH OE+miR-4429 mimic）的PC3細(xì)胞，按2×103個(gè)細(xì)胞/孔的密度加到6孔板中，再加入新鮮RPMI 1640培養(yǎng)基，2 d更換1次，培養(yǎng)14 d后棄去培養(yǎng)液，用4%多聚甲醛固定20 min，棄去固定液，加2 mL結(jié)晶紫染液，染色30 min，用磷酸鹽緩沖液（phosphatebuffered saline，PBS）洗滌后干燥30 min，拍照后用Image J軟件（美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院）計(jì)數(shù)細(xì)胞克隆數(shù)。

1.7 細(xì)胞遷移能力檢測(cè)

收集轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic、miR-4429 inhibitor、mimic NC和inhibitor NC的PC3細(xì)胞，收集轉(zhuǎn)染mimic NC、Vector、miR-4429 mimic、MDTH OE以及共轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic和MDTH OE的PC3細(xì)胞，使用RPMI 1640無(wú)血清培養(yǎng)基重懸PC3細(xì)胞，并調(diào)整細(xì)胞密度至5×105/mL，將200 μL PC3細(xì)胞懸液加入Transwell小室的上室，下室加入600 μL含20%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基，置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h。取出Transwell小室，用棉簽輕輕擦棄小室上層的細(xì)胞，用4%多聚甲醛固定20 min，結(jié)晶紫染色1 h，PBS洗滌，在CKX-53型顯微鏡（日本奧林巴斯公司）下隨機(jī)選5個(gè)高倍鏡視野拍照，并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.8 基質(zhì)膠侵襲試驗(yàn)

將基質(zhì)膠均勻鋪于Transwell小室上室并過(guò)夜成膜。收集轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic、miR-4429 inhibitor、mimic NC和inhibitor NC的PC3細(xì)胞，收集轉(zhuǎn)染mimic NC、Vector、miR-4429 mimic、MDTH OE以及共轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic和MDTH OE的PC3細(xì)胞，并用RPMI 1640無(wú)血清培養(yǎng)基重懸，制備單細(xì)胞懸液，取1×105個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液加入Transwell小室上室，下室加入600 μL含20%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基，培養(yǎng)24 h后用棉簽輕輕擦棄小室上層的細(xì)胞，用4%多聚甲醛固定20 min，結(jié)晶紫染色1 h，PBS洗滌，在CKX-53型顯微鏡下隨機(jī)選5個(gè)高倍鏡視野拍照，并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

1.9 靶基因預(yù)測(cè)

采用TargetScan 7.0數(shù)據(jù)庫(kù)（ http：//www.targetscan.org/vert_72/）和miRanda數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//www.microrna.org/microrna/home.do）對(duì)miR-4429的靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè)，綜合分析選取具有代表性的靶基因進(jìn)行靶點(diǎn)驗(yàn)證。

1.10 熒光素酶報(bào)告基因分析

將野生型或突變型（突變M T D H與miRNA-4429結(jié)合位點(diǎn)）的MTDH3′UTR片段分別克隆到pmir GLO熒光素酶報(bào)告載體中。MTDH3′UTR-野生型和MTDH3′UTR -突變型熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒和內(nèi)參質(zhì)粒[海腎熒光素酶（Renilla luciferase，Rluc）]分別與miR-4429 mimic、miR-4429 inhibitor、mimic NC或inhibitor NC共轉(zhuǎn)染。48 h后按照Dual Luciferase Reporter Assay System說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，使用Promega GloMax 20/20發(fā)光檢測(cè)儀（美國(guó)Promega生物公司）對(duì)螢火蟲(chóng)熒光值和Rluc熒光值進(jìn)行測(cè)定。以Rluc熒光作為內(nèi)參對(duì)各組測(cè)定結(jié)果進(jìn)行均一化處理。以螢火蟲(chóng)熒光值/Rluc熒光值的比值作為目的熒光素酶報(bào)告基因的相對(duì)熒光素酶活性。

1.11 MTDH蛋白相對(duì)表達(dá)量檢測(cè)

收集RWPE-1細(xì)胞和PC3細(xì)胞，收集轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic、miR-4429 inhibitor、mimic NC和inhibitor NC的PC3細(xì)胞，收集轉(zhuǎn)染mimic NC、Vector、miR-4429 mimic、MDTH OE以及共轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic和MDTH OE的PC3細(xì)胞，使用RIPA裂解液（含5%蛋白酶抑制劑）（北京索萊寶科技有限公司）提取總蛋白，采用二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白測(cè)定試劑盒（北京索萊寶科技有限公司）測(cè)定各組的蛋白質(zhì)濃度。每個(gè)樣本的蛋白上樣量為40 μg，采用10%十二烷基硫酸鈉（sodium dodecyl sulfate，SDS）-聚丙烯酰胺凝膠電泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）進(jìn)一步分離蛋白，通過(guò)濕轉(zhuǎn)法將產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯（polyvinylidene fluoride，PVDF）膜，5%封閉液封閉1 h后，使用三羥甲基氨基甲烷-吐溫（tris-hydroxymethyl aminoethane-Tween，TBST）緩沖液洗3遍，每次10 min，加入一抗MTDH（1∶500）和GAPDH（1∶1 000），置于4 ℃搖床孵育過(guò)夜，TBST緩沖液洗3遍，每次10 min，分別加入HRP標(biāo)記的羊抗兔IgG和HRP標(biāo)記的羊抗鼠IgG二抗（1∶5 000），室溫孵育1 h后使用ECL顯影液顯影，采用Tanon-4100全自動(dòng)數(shù)碼凝膠圖像分析系統(tǒng)（上海天能公司）進(jìn)行成像分析。采用Image J軟件對(duì)條帶進(jìn)行灰度統(tǒng)計(jì)。

1.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有試驗(yàn)均獨(dú)立重復(fù)3次。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s表示，2個(gè)組之間比較采用t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同人前列腺癌細(xì)胞系中miR-4429的相對(duì)表達(dá)量和miR-4429的轉(zhuǎn)染效率

人前列腺癌細(xì)胞系DU145、22rv1、PC3、LNCaP和VCaP的miR-4429相對(duì)表達(dá)量顯著均低于人前列腺上皮細(xì)胞系RWPE-1（P＜0.05），其中PC3細(xì)胞miR-4429相對(duì)表達(dá)量降低最為顯著（P＜0.01），見(jiàn)圖1。因此，細(xì)胞轉(zhuǎn)染試驗(yàn)以PC3細(xì)胞為研究對(duì)象。

圖1 不同人前列腺癌細(xì)胞系和人前列腺上皮細(xì)胞系RWPE-1中miR-4429的相對(duì)表達(dá)量

將miR-4429 mimic、miR-4429 inhibitor、mimic NC和inhibitor NC分別轉(zhuǎn)染至PC3細(xì)胞中。miR-4429 mimic組（過(guò)表達(dá)miR-4429）miR-4429相對(duì)表達(dá)量明顯高于mimic NC組（P＜0.01）。miR-4429 inhibitor組（抑制miR-4429表達(dá)）miR-4429相對(duì)表達(dá)量顯著低于inhibitor NC組（P＜0.01）。見(jiàn)圖2。

圖2 各組miR-4429相對(duì)表達(dá)量比較

2.2 miR-4429對(duì)PC3細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的影響

培養(yǎng)48和60 h時(shí)，miR-4429 mimic組PC3細(xì)胞的增殖能力明顯低于mimic NC組（P＜0.01）；miR-4429 inhibitor組的增殖能力顯著高于inhibitor NC組（P＜0.01）；見(jiàn)圖3（a）。miR-4429 mimic組細(xì)胞克隆形成數(shù)目明顯低于mimic NC組，而miR-4429 inhibitor組細(xì)胞克隆形成數(shù)目高于inhibitor NC組，見(jiàn)圖3（b）。遷移試驗(yàn)結(jié)果顯示，miR-4429 mimic組PC3細(xì)胞遷移數(shù)目明顯低于mimic NC組（P＜0.01）；而miR-4429 inhibitor組PC3細(xì)胞遷移數(shù)目明顯高于inhibitor NC組（P＜0.01）；見(jiàn)圖3（c）、圖3（d）。侵襲試驗(yàn)結(jié)果顯示，miR-4429 mimic組侵襲細(xì)胞數(shù)目低于mimic NC組（P＜0.01）；miR-4429 inhibitor組侵襲細(xì)胞數(shù)目高于inhibitor NC組（P＜0.01） ；見(jiàn)圖3（e）和圖3（f）。

圖3 miR-4429對(duì)PC3細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的影響

2.3 miR-4429靶基因的預(yù)測(cè)結(jié)果

生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)結(jié)果顯示，MTDH可能是miR-4429作用的靶基因。miR-4429與MTDH的3′UTR區(qū)序列互補(bǔ)的結(jié)合位點(diǎn)見(jiàn)圖4（a）。熒光素酶報(bào)告基因試驗(yàn)結(jié)果顯示，在MTDH3′UTR-野生型中，miR-4429 mimic組熒光素酶活性顯著低于mimic NC組（P＜0.01）；miR-4429 inhibitor組熒光素酶活性顯著高于inhibitor NC組（P＜0.01）。在MTDH3′UTR-突變型中，無(wú)論轉(zhuǎn)染miR-4429 mimic還是miR-4429 inhibitor，其熒光素酶活性均無(wú)明顯變化（P＞0.05）。見(jiàn)圖4（b）。

圖4 miR-4429與MTDH的結(jié)合點(diǎn)及熒光素酶報(bào)告基因試驗(yàn)結(jié)果

2.4 miR-4429對(duì)MTDH表達(dá)的影響

PC3細(xì)胞MTDHmRNA和蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著高于RWPE-1細(xì)胞（P＜0.01），見(jiàn)圖5（a）和圖5（b）。在PC3細(xì)胞中，miR-4429 mimic組MTDHmRNA和蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著低于mimic NC組（P＜0.01）；miR-4429 inhibitor組MTDHmRNA和蛋白的相對(duì)表達(dá)量顯著高于inhibitor NC組（P＜0.01）；見(jiàn)圖5（c）和圖5（d）。

圖5 miR-4429對(duì)MTDH mRNA和MTDH蛋白表達(dá)的影響

2.5 過(guò)表達(dá)MTDH對(duì)PC3細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響

miR-4429 mimic組克隆形成數(shù)目、MTDH蛋白的相對(duì)表達(dá)量、遷移和侵襲細(xì)胞數(shù)目低于mimic NC組。MTDH OE組克隆形成數(shù)目、MTDH蛋白的相對(duì)表達(dá)量、遷移和侵襲細(xì)胞數(shù)目高于Vector組（P＜0.01）。MTDH OE+miR-4429 mimic組的克隆形成數(shù)目、MTDH蛋白的相對(duì)表達(dá)量、遷移和侵襲細(xì)胞數(shù)目均高于miR-4429 mimic組（P＜0.01）。見(jiàn)圖6。

圖6 過(guò)表達(dá)miR-4429或MTDH對(duì)PC3細(xì)胞增殖，遷移和侵襲的影響

3 討論

目前，前列腺癌發(fā)生的原因和機(jī)制尚未被完全闡明。探討前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制，尋找新的治療靶點(diǎn)，對(duì)于延緩前列腺癌的發(fā)展，提高前列腺癌患者生存率有重要意義。miRNA在腫瘤細(xì)胞增殖、遷移、分化、侵襲和耐藥等一系列生物學(xué)進(jìn)程中扮演著重要的角色。有研究發(fā)現(xiàn)，miR-4429通過(guò)靶向DNA損傷修復(fù)的關(guān)鍵因子RAD51，提高了宮頸癌細(xì)胞對(duì)放療的敏感性[5]；還可通過(guò)靶向CDK6，抑制腎透明細(xì)胞癌的進(jìn)展和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化[10]。血清miRNA微陣列分析結(jié)果顯示，hsa-miR-4429通過(guò)調(diào)控靶基因在膽道閉鎖進(jìn)程中發(fā)揮重要作用，或可作為診斷膽道閉鎖的生物標(biāo)志物[11]。急性缺血性卒中患者miR-4429表達(dá)量顯著降低，參與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞基因的表達(dá)[12]。miR-4429在宮頸癌組織和細(xì)胞中呈低表達(dá)，起抑癌作用[13]。本研究結(jié)果顯示，miR-4429在前列腺癌細(xì)胞中呈低表達(dá)，PC3細(xì)胞的表達(dá)量最低，miR-4429過(guò)表達(dá)可顯著抑制PC3細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力，而抑制miR-4429表達(dá)則可促進(jìn)PC3細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。這些結(jié)果說(shuō)明miR-4429可以抑制前列腺癌細(xì)胞增殖，遷移和侵襲。因此，miR-4429在前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展中起抑制作用。

有研究結(jié)果表明，MTDH是一種促癌基因，且受多種miRNA的調(diào)節(jié)。MTDH可通過(guò)激活葡萄球菌核酸酶結(jié)構(gòu)域包含蛋白1（staphylococcal nulcease domain containing 1，SND1）介導(dǎo)的細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase，ERK）信號(hào)通路和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)腎透明細(xì)胞癌的轉(zhuǎn)移[14]。敲除MTDH可降低卵巢癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移能力[15]。由此可見(jiàn)，MTDH具有致癌作用，可作為抗腫瘤治療的靶點(diǎn)。在結(jié)直腸癌中，MTDH是miR-182-5p的功能靶點(diǎn)，miR-182-5p靶向MTDH可抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[16]。有研究結(jié)果顯示，miR-154可通過(guò)抑制MTDH的表達(dá)來(lái)抑制胃癌細(xì)胞的增殖[17]。本研究采用熒光素酶報(bào)告基因試驗(yàn)驗(yàn)證了miR-4429靶向結(jié)合MTDH，并且miR-4429的過(guò)表達(dá)可顯著抑制MTDH的轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)。將miR-4429 mimic和MTDH共轉(zhuǎn)染PC3細(xì)胞，結(jié)果顯示，miR-4429對(duì)PC3細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力的抑制作用被逆轉(zhuǎn)。提示miR-4429的下調(diào)可能會(huì)促進(jìn)MTDH表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)前列腺癌的發(fā)展。

綜上所述，miR-4429可抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖、遷移與侵襲，其作用機(jī)制與靶向負(fù)調(diào)控MTDH的表達(dá)有關(guān)。