徐建成，沈 毅

(1.浙江大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院，浙江 杭州 310058；2.杭州華碩醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司，浙江 杭州 311106)

人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)作為常見的DNA雙鏈病毒，包含一百多類亞型，且多種亞型均可特異性地感染機(jī)體皮膚或者黏膜鱗狀上皮細(xì)胞，可直接引發(fā)宮頸上皮等位置出現(xiàn)良惡性病變。宮頸癌作為源自宮頸位置的惡性腫瘤，是婦科常見疾病，其患病率約占婦科惡性腫瘤的第二位，受到醫(yī)療界重點(diǎn)關(guān)注[1-2]。臨床指出[3]，HPV持續(xù)性感染是引發(fā)宮頸癌的主要因素，而大部分患者的HPV均屬于一過性感染，僅少數(shù)可發(fā)展成維持性，且容易進(jìn)展成宮頸癌。近年來，我國宮頸癌的患病率日漸升高，成為危害女性機(jī)體健康與生存質(zhì)量的主要疾病之一[4]。臨床雖然已有報(bào)道證實(shí)宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展均與HPV感染存在密切關(guān)聯(lián)[5]，但其在本地感染情況尚無相關(guān)報(bào)道。本研究調(diào)查了解余杭地區(qū)女性的HPV感染情況，并分析其風(fēng)險因素，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 資料來源 選擇杭州市余杭地區(qū)2019年9月—11月進(jìn)行HPV檢測的334 500名女性作為觀察對象，所有觀察對象或家屬均自愿參與本次調(diào)查，均為余杭地區(qū)常住人口，且存在性生活史，中途未有退出者；排除月經(jīng)期、妊娠期或者哺乳期女性，排除存在宮頸手術(shù)、放化療史、HPV感染治療史或者激素治療史及合并自身免疫性疾病、腫瘤疾病、精神方面疾病、免疫抑制狀態(tài)或嚴(yán)重心腦血管疾病者[6]。

1.2 檢測方法 所有觀察對象均接受薄層液基細(xì)胞檢查、HPV反向點(diǎn)雜交法檢測。收集觀察對象宮頸脫落細(xì)胞，并要求其在收集前24 h之內(nèi)無性生活，72 h之內(nèi)陰道未接受沖洗或者上藥。選擇專用宮頸毛刷在觀察對象的宮頸外口進(jìn)行標(biāo)本收集，隨后將其置于專用的細(xì)胞保存液的采集管，放在4℃冰箱內(nèi)待檢。將標(biāo)本轉(zhuǎn)移至微量離心管內(nèi)，以13 000 r/min速度進(jìn)行離心10 min，去除上層清液，滴入細(xì)胞裂解液50 uL，懸浮沉淀，在100℃條件下加熱10 min，以13 000 r/s速度離心，10 min后，保存上層清液。

HPV基因擴(kuò)增與反向點(diǎn)雜交依據(jù)試劑盒說明書要求進(jìn)行操作，利用PCR擴(kuò)增HPV衣殼蛋白基因，并實(shí)施基因分型，PCR反應(yīng)條件設(shè)置成50℃15 min，95℃變性10 min，94℃30 s，42℃90 s，72℃30 s，重復(fù)40次，72℃5 min，隨后妥善固定PCR產(chǎn)物，對各類HPV分型探針的硝酸纖維素膜條實(shí)施變性與液相雜交，同時給予洗滌、顯色，依照雜交點(diǎn)的分型探針類別來評估HPV感染，并明確其基因亞型。

1.3 觀察指標(biāo) 收集檢測對象的一般資料，包括年齡、居住地、文化程度、體質(zhì)量、孕次、產(chǎn)次、流產(chǎn)史、性伴侶個數(shù)、首次性生活年齡、避孕方式、飲酒史、吸煙史；記錄所有女性的HPV檢測結(jié)果，分析不同HPV亞型感染情況，比較不同年齡女性的HPV檢測結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 HPV檢測結(jié)果及HPV亞型感染情況 本次進(jìn)行HPV檢測的334 500名女性中，HPV陰性者330 733例，占比98.87%；陽性者3 767例，占比1.13%。觀察3 767例HPV陽性者的亞型感染情況分布，HPV52的陽性數(shù)較多，共581例(15.42%)，明顯高于其他亞型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 HPV亞型感染情況分布(n=3 767)Table 1 Distribution of HPV subtype infection (n=3 767)

表1(續(xù))

2.2 檢測對象一般資料 HPV檢測的334 500名女性中25歲及以下16 575例，26～55歲282 585例，55歲以上34 025例，年齡不詳1 315例；文化程度：初中及以下102 524例，高中114 892例，大專及以上117 084例；體質(zhì)量51～67 kg，平均(60.23±1.24)kg。比較HPV陽性者與陰性者的一般資料，結(jié)果顯示2者在孕次、飲酒上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但在居住地、產(chǎn)次、流產(chǎn)史、性伴侶個數(shù)、首次性生活年齡、吸煙、避孕方式上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 HPV陽性者與陰性者的一般資料比較(n=334 500，例)Table 2 Comparison of general data between HPV positive and HPV negative patients (n = 334 500，cases)

2.3 不同年齡的HPV感染情況 55歲以上女性的HPV 陽性率(1.99%)高于25歲及以下(1.65%)、26～55歲(0.99%)和年齡不詳者(0.84%)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.4 HPV感染的風(fēng)險因素分析 將表2中有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的變量帶入Logistic回歸方程計(jì)算，發(fā)現(xiàn)居住地、產(chǎn)次、流產(chǎn)史、性伴侶個數(shù)、首次性生活年齡、吸煙、避孕方式是HPV感染的風(fēng)險因素(P<0.05)。見表3。

表3 HPV感染的風(fēng)險因素分析Table 3 Analysis of risk factors of HPV infection

3 討論

宮頸癌在女性生殖系統(tǒng)腫瘤中的患病率僅次于乳腺癌，而HPV感染在宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變的發(fā)生與發(fā)展中具有重要意義，因此盡早掌握HPV感染因素成為關(guān)鍵[7]。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示[8]，宮頸癌患者中高危型HPV陽性率高達(dá)100%，而高級別宮頸上皮內(nèi)瘤變中HPV的陽性率也達(dá)到97%左右，進(jìn)而證實(shí)早期診斷HPV感染在宮頸癌的預(yù)防中十分必要。

HPV主要感染機(jī)體的上皮組織，并存在較高的宿主特異性，尤其是對特異位置上皮細(xì)胞的親和力極強(qiáng)[9-11]。由于宮頸癌的癌前病變通常來源于宮頸移行帶，且多發(fā)生在鱗狀上皮相交位置的鱗狀化生期間，另外生殖道致病性HPV可感染宮頸的移行帶上皮[12]。故HPV已成為臨床公認(rèn)的致瘤性病毒之一。HPV基因型種類較多，且多種基因序列已經(jīng)完全測序。HPV 6、11等均屬于低危型HPV，容易引發(fā)上皮細(xì)胞疣樣病變；而HPV 16、18、52、58等均屬于高危型HPV，長時間反復(fù)感染可造成宮頸癌[13-15]。本文結(jié)果顯示，檢測女性中HPV陽性者占比1.13%，以HPV52的陽性數(shù)最多(15.42%)，證實(shí)余杭地區(qū)HPV 52的感染率較高，應(yīng)受到重點(diǎn)關(guān)注，及時制定有效措施，控制疾病傳播。有研究顯示[16]，HPV 16、18、52、58屬于感染概率較高的亞型，也成為宮頸癌中常見的亞型。大部分女性受到HPV感染后，可在兩年之內(nèi)自行清除，僅少數(shù)可出現(xiàn)持續(xù)性感染[17]。與低危型相較而言，高危型HPV亞型的感染能力更為顯著，與本文結(jié)果較為相似，本次調(diào)查的陽性者中以HPV52的陽性數(shù)較多，應(yīng)受到臨床重點(diǎn)關(guān)注。

有研究表明，HPV感染途徑以性接觸傳播為主，其中性活躍女性的HPV感染風(fēng)險較高。隨后臨床發(fā)現(xiàn)高危型HPV感染率呈現(xiàn)年齡分布特點(diǎn)，通常在15～24歲女性中，HPV感染出現(xiàn)第一個高峰；第二個高峰則是35～54歲，但低危型HPV感染并不存在顯著的年齡差異。從本文中看到，25歲及以下、55歲以上女性的HPV 陽性率較高。分析認(rèn)為可能是因?yàn)槟贻p女性性行為較早，或者存在多個性伴侶，對性知識了解甚少等因素有關(guān)；而55歲以上女性的HPV陽性率較高的原因是老年女性的抵抗能力明顯衰退，從而使其出現(xiàn)持續(xù)性HPV感染[18-19]。

本研究結(jié)果還顯示：HPV陽性者與陰性者在居住地、產(chǎn)次、流產(chǎn)史、性伴侶個數(shù)、首次性生活年齡、吸煙、避孕方式上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且上述因素均是HPV感染的風(fēng)險因素。分析原因可能為：①農(nóng)村地區(qū)醫(yī)療、經(jīng)濟(jì)較為落后，且文化程度普遍較低，導(dǎo)致女性對HPV感染的相關(guān)知識了解較少，因此其陽性風(fēng)險較高。②疾病傳播的途徑為性傳播，性生活開始年齡越早，感染HPV的概率越高。③性行為活躍的女性，往往有多個性伴侶，性伴侶感染HPV后可造成女性反復(fù)或者持續(xù)性感染。④存在流產(chǎn)史的女性，其宮頸可能完全顯露，且宮頸細(xì)胞化生，牽連宮頸黏膜受損，增加宮頸病變的概率，同時流產(chǎn)可能造成機(jī)體雌激素與孕激素水平發(fā)生變化，減低免疫能力，提升HPV感染的風(fēng)險。⑤口服避孕藥中通常包含雌激素，可對宮頸上皮進(jìn)行刺激，導(dǎo)致異常增生。而避孕套能夠成為屏障，有效切斷HPV的感染。⑥煙草代謝中存在大量尼古丁、亞硝胺等，可直接損壞宮頸黏膜上的免疫細(xì)胞介導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，并促進(jìn)DNA受損，增快宮頸移行帶細(xì)胞分裂以及增生速度，直接降低女性宮頸柱狀上皮的免疫能力，從而增加HPV感染的概率。

綜上所述，余杭地區(qū)HPV陽性檢出率為1.13%，且風(fēng)險因素較多，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注25歲及以下、55歲以上女性的篩查管理，同時加強(qiáng)對HPV感染相關(guān)知識的宣傳力度，從而有效降低HPV感染率與宮頸癌的患病率，為女性機(jī)體健康提供保障。