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        Lp-PLA2 基因多態(tài)性與心肌梗死的相關(guān)性分析

        2021-12-17 11:50:45馬莎楊建
        中華養(yǎng)生保健 2021年16期
        關(guān)鍵詞:基因突變

        馬莎 楊建

        摘 ?要:目的 ?探究漢族人群脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)基因A379V位點(diǎn)多態(tài)性與心肌梗死的相關(guān)性。方法 ?研究時(shí)間為2019年1月~2020年12月,以期間濟(jì)寧市兗州區(qū)人民醫(yī)院收治的200例心肌梗死患者和200名健康體檢者為對(duì)象開(kāi)展研究。心肌梗死患者設(shè)為觀察組,健康體檢者設(shè)為對(duì)照組,采集兩組受試者的血液標(biāo)本,采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)進(jìn)行Lp-PLA2基因A379V位點(diǎn)上的單核苷酸多態(tài)性檢測(cè),并采用logistics回歸模型分析Lp-PLA2基因突變與心肌梗死的相關(guān)性。結(jié)果 ?觀察組的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、Lp-PLA2水平與對(duì)照組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);A379V位點(diǎn)上檢測(cè)到CC、CT、TT三種基因型,觀察組A379V位點(diǎn)上的TT、CT基因分布頻率明顯高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);logistics回歸分析結(jié)果顯示,Lp-PLA2基因A379V位點(diǎn)的基因多態(tài)性與急性心肌梗死的發(fā)生密切相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 ?Lp-PLA2基因多態(tài)性與心肌梗死的發(fā)生密切相關(guān),Lp-PLA2基因A379V位點(diǎn)突變可能是導(dǎo)致心肌梗死發(fā)生的重要原因。

        關(guān)鍵詞:心肌梗死;脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2;基因多態(tài)性;基因突變

        中圖分類號(hào):R542.2+2 ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A ? ?文章編號(hào):1009-8011(2021)-16-0158-02

        心肌梗死(MI)是冠心病分型中致死率最高的一種,也是目前威脅群眾生命安全的主要疾病。MI的發(fā)生與多種因素有關(guān),如環(huán)境因素、飲食因素、心理因素、遺傳因素等,臨床目前認(rèn)為,動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致MI的主要病理基礎(chǔ),但MI的遺傳因素影響一直是臨床研究的重點(diǎn)課題[1]。發(fā)現(xiàn)MI的遺傳特點(diǎn),能夠幫助臨床快速完成高危人群的篩查和預(yù)防,減少M(fèi)I的發(fā)生。相關(guān)研究證明[2],單核苷酸多態(tài)性(SNPs)可能是導(dǎo)致機(jī)體易感性差異的主要原因,同時(shí)也可能影響機(jī)體動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程和炎癥反應(yīng)等,這都是導(dǎo)致MI發(fā)生的重要因素。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)屬于磷脂酶超家族,與血小板的激發(fā)和活性密切相關(guān),目前已有研究證實(shí)Lp-PLA2主要受基因因素調(diào)控,部分基因位點(diǎn)的突變會(huì)影響Lp-PLA2活性,從而影響MI的發(fā)生率[3]。但Lp-PLA2的基因多態(tài)性受到地域、種族等因素的影響,因此在Lp-PLA2多態(tài)性與MI的相關(guān)性上仍存有爭(zhēng)議。本文就漢族人群Lp-PLA2基因多態(tài)性與MI的相關(guān)性進(jìn)行了研究分析,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 ?資料與方法

        1.1 ?一般資料

        研究時(shí)間為2019年1月~2020年12月,以濟(jì)寧市兗州區(qū)人民醫(yī)院收治的200例心肌梗死患者和200例健康體檢者為對(duì)象開(kāi)展研究,心肌梗死患者設(shè)為觀察組,健康體檢者設(shè)為對(duì)照組。觀察組包括男性112例,女性88例;年齡45~81歲,平均年齡(62.40±9.70)歲。對(duì)照組包括男性109例,女性91例;年齡38~82歲,平均年齡(61.80±10.40)歲。兩組基本資料對(duì)比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本次研究已通過(guò)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批。

        1.2 ?納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

        納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)冠脈造影確診為MI;②符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)提出的MI診斷標(biāo)準(zhǔn)[4-5];③漢族;④本地居住時(shí)間超過(guò)20年。

        排除標(biāo)準(zhǔn):①合并主動(dòng)脈夾層、擴(kuò)張型心肌病等心臟疾病者;②合并嚴(yán)重臟器功能不全、惡性腫瘤、自身免疫疾病或嚴(yán)重感染者;③與同組間其他受檢者有血緣關(guān)系;④合并精神疾病者。

        1.3 ?方法

        1.3.1 ?血清采集

        觀察組在入院后24 h內(nèi)采集血液樣本,對(duì)照組則在預(yù)約體檢當(dāng)天采集樣本,均取空腹靜脈血7 mL,其中5 mL分離血清,保存于-80 ℃下備用,做總膽固醇(TC)、甘油三酯膽固醇(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及Lp-PLA2檢測(cè),其余2 mL樣本進(jìn)行DNA提取。

        1.3.2 ?DNA提取

        取0.3 mL血液樣本置于1.5 mL EP管,加0.7 mL的TBP緩沖液,混勻后在3000 rpm條件下離心5 min,棄上清,加入0.5 mL的TBP緩沖液及10 μL蛋白酶K,55℃下孵育1 h,振蕩混勻后離心,取上清,與0.3 mL無(wú)水乙醇混勻,將混合液置入收集管,離心后棄液體,取DNSC柱加入0.5 mL的AW1緩沖液,離心后棄液體并重復(fù)以上步驟1次,取DNSC柱并加入0.2 mL的AE緩沖液,離心后棄液體并重復(fù)以上步驟1次,提取獲得的DNA做凝膠電泳,進(jìn)行濃度測(cè)定。

        1.3.3 ?PCR-RFLP

        查找NCBI中關(guān)于Lp-PLA2的Primer 5.0設(shè)計(jì)引物信息,A379V目的基因片段的PCR引物序列為:上游5-CAGACCAACAAGACCAGTACCTT-3,下游5-GACAGCTTTGTCCTGAGATTCAT-3,擴(kuò)增長(zhǎng)度300 bp。

        1.4 ?觀察指標(biāo)

        對(duì)比兩組TC、TG、HDL-C、LDL-C及Lp-PLA2指標(biāo),對(duì)比兩組Lp-PLA2在A379V位點(diǎn)上的T基因分布頻率差異性。

        1.5 ?統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0軟件做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,組間計(jì)量資料以(x±s)表示,對(duì)比用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示,對(duì)比用χ2檢驗(yàn),以MI為因變量進(jìn)行多因素logistics回歸分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 ?結(jié)果

        2.1 ?血脂及Lp-PLA2水平對(duì)比

        觀察組的TC、TG、LDL-C、HDL-C、Lp-PLA2水平與對(duì)照組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

        2.2 ?基因型和等位基因頻率分布

        A379V位點(diǎn)上檢測(cè)到CC、CT、TT三種基因型,觀察組A379V位點(diǎn)上的TT、CT基因分布頻率明顯高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

        2.3 ?logistics回歸分析

        結(jié)果顯示,Lp-PLA2基因A379V位點(diǎn)的基因多態(tài)性(TT、CT)與急性心肌梗死的發(fā)生密切相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

        3 ?討論

        心血管疾?。–VD)是全球范圍內(nèi)的主要死亡原因之一,在CVD中,冠心病占所有心血管疾病死亡的一半,是發(fā)達(dá)國(guó)家最常見(jiàn)的死亡原因[6]。

        目前臨床認(rèn)為,動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致MI的主要病理基礎(chǔ),但遺傳因素也在MI的發(fā)生發(fā)展中起到了重要的作用。Lp-PLA2屬于磷脂酶超家族成員,通過(guò)與脂蛋白結(jié)合形成非酯化脂肪酸,能夠誘發(fā)慢性炎癥,而炎癥反應(yīng)也是導(dǎo)致MI發(fā)生的主要原因之一。Lp-PLA2對(duì)內(nèi)皮功能、炎癥、氧化應(yīng)激、纖溶和斑塊穩(wěn)定性都有不利影響,導(dǎo)致血栓形成和CVD發(fā)生。Lp-PLA2基因遺傳變異可增加脂蛋白水平,同時(shí)也會(huì)增加冠心病發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)。A379V是Lp-PLA2上的一個(gè)重要基因位點(diǎn),相關(guān)研究認(rèn)為該位點(diǎn)突變能夠影響Lp-PLA2的活性,但由于地域、民族等因素的影響,Lp-PLA2與漢族人群MI的發(fā)生率是否相關(guān)尚未有定論。從本次研究數(shù)據(jù)來(lái)看,觀察組患者Lp-PLA2的A379V位點(diǎn)的CC型基因頻率降低,而CT、TT型基因頻率增加,與對(duì)照組的等位基因也有明顯差異(P<0.05),而且兩組受檢者的血脂水平、Lp-PLA2水平也有顯著差異(P<0.05),這說(shuō)明Lp-PLA2的A379V位點(diǎn)基因突變可能會(huì)影響機(jī)體的血脂水平,該部分基因分型具有作為高脂血癥人群MI發(fā)生的預(yù)測(cè)指標(biāo)。從多因素logistics回歸分析結(jié)果來(lái)看,機(jī)體的Lp-PLA2水平和基因型是導(dǎo)致MI發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,進(jìn)一步提示Lp-PLA2的A379V位點(diǎn)的基因突變與MI密切相關(guān)。

        綜上所述,Lp-PLA2基因多態(tài)性與心肌梗死的發(fā)生密切相關(guān),Lp-PLA2基因A379V位點(diǎn)突變可能是導(dǎo)致心肌梗死發(fā)生的重要原因。目前蛋白調(diào)控參與心血管疾病發(fā)展,同時(shí)基因調(diào)控蛋白發(fā)生,我們以期希望從基因水平上,研究蛋白表達(dá),來(lái)進(jìn)一步研究心血管疾病的發(fā)病機(jī)制,為心血管疾病的診治提供策略參考。

        參考文獻(xiàn)

        [1]馬賀,張家禧,高雯.心肌橋近段冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄臨床特點(diǎn)及危險(xiǎn)因素研究[J].中國(guó)循證心血管醫(yī)學(xué),2017,9(6):748-750.

        [2]Masatoshi F,Tatsuya Y,F(xiàn)azlul KM,etal.SIRT7 has a critical role in bone formation by regulating lysine acylation of SP7/Osterix[J].Nat Commun,2018,9(1):2833.

        [3]Vazquez BN,Blengini CS,Hernandez Y,etal.SIRT7 promotes chromosome synapsis during prophase I of female meiosis[J].Chromosoma,2019,128(3):2833.

        [4]中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì),中華心血管病雜志編輯委員會(huì).急性ST段抬高型心肌梗死診斷和治療指南(2019)[J].中華心血管病雜志,2019,47(10):766-783.

        [5]中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì),中華心血管病雜志編輯委員會(huì).非ST段抬高型急性冠狀動(dòng)脈綜合征診斷和治療指南(2016)[J].中華心血管病雜志,2017,45(5):359-376.

        [6]Persic V, Raljevic D, Markova-Car E, etal. Vitamin D-binding protein (rs4588) T/T genotype is associated with anteroseptal myocardial infarction in coronary artery disease patients.Ann Transl Med.2019,7(16):374.

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