劉佳慧 劉毓婷 崔明輝 楊炎梅 胡曉簽 陳欣鈺

摘 要 蛹蟲(chóng)草是藥食兩用真菌，蛋白質(zhì)含量高，具備人體所需的氨基酸、礦物質(zhì)、維生素等，且具有豐富的活性成分，市場(chǎng)空間大。因此，簡(jiǎn)要綜述蛹蟲(chóng)草人工栽培的方法及蛹蟲(chóng)草人工栽培的影響因素，為蛹蟲(chóng)草栽培技術(shù)的升級(jí)及工廠(chǎng)化普及梳理脈絡(luò)并提供一定的參考。

關(guān)鍵詞 蛹蟲(chóng)草;人工栽培;影響因素

中圖分類(lèi)號(hào)：S567.35 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.27.008

蛹蟲(chóng)草[Cordyceps militaris （L. ex Fr.） Link]，別名北冬蟲(chóng)夏草，具有豐富的生物活性成分和功效。1987年，首次人工培育出蛹蟲(chóng)草子實(shí)體[1]，目前蛹蟲(chóng)草人工栽培技術(shù)已日趨成熟，以天然動(dòng)物培養(yǎng)基栽培、人工固體培養(yǎng)基栽培、人工液體發(fā)酵栽培為主。隨著大眾對(duì)蛹蟲(chóng)草藥用價(jià)值的深入了解，蛹蟲(chóng)草的市場(chǎng)需求量逐漸增大，蛹蟲(chóng)草的人工栽培面積也逐年增加。其中，蛹蟲(chóng)草栽培中出現(xiàn)的低產(chǎn)、減產(chǎn)甚至絕產(chǎn)等問(wèn)題困擾著蛹蟲(chóng)草產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，優(yōu)化人工栽培技術(shù)成為蛹蟲(chóng)草行業(yè)健康發(fā)展的關(guān)鍵和重點(diǎn)。

1 蛹蟲(chóng)草的人工栽培技術(shù)

1.1 天然動(dòng)物培養(yǎng)基栽培技術(shù)

天然動(dòng)物培養(yǎng)基栽培主要采用蠶蛹作為培養(yǎng)基質(zhì)。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的菌種選育和蠶蛹選取，將蟲(chóng)草菌種注入寄主蠶蛹體內(nèi)，為蛹蟲(chóng)草子實(shí)體提供適宜的生長(zhǎng)條件，最終得到成熟蛹蟲(chóng)草。此方法培育出來(lái)的蟲(chóng)草可連同蠶蛹一起采收，有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。但該方法成本較高且原材料有限，效率低，所得產(chǎn)物量不易控制。且用蠶蛹作為栽培基質(zhì)，若蛹體消毒不充分極易在栽培期間造成污染，增大了栽培的難度。因此，此方式不適合大規(guī)模培育蛹蟲(chóng)草。

1.2 人工固體培養(yǎng)基栽培技術(shù)

蛹蟲(chóng)草的人工固體栽培技術(shù)大多選用大米、小麥作為培養(yǎng)基質(zhì)。選取野生或人工培育的蟲(chóng)草菌種，通過(guò)分離、選育、復(fù)壯等流程培育出母種，擴(kuò)繁后轉(zhuǎn)接到制備好的滅活固體培養(yǎng)基上，并添加各種必需的營(yíng)養(yǎng)成分，最后培育出成熟的蛹蟲(chóng)草。李春斌等研究發(fā)現(xiàn)，最優(yōu)的固體培養(yǎng)基是將高粱和小米混合，添加的最佳碳源和氮源為蛋白胨和可溶性淀粉，最適pH值范圍為5～6[2]。還有一些物質(zhì)對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)也有著正向促進(jìn)作用，如植物生長(zhǎng)素類(lèi)似物、維生素B1及無(wú)機(jī)元素K+、Mg2+、Ca2+等。人工固體培養(yǎng)基栽培材料簡(jiǎn)便易得、成本低廉，且培養(yǎng)出的蛹蟲(chóng)草品質(zhì)好、蟲(chóng)草素含量高，受到種植戶(hù)和市場(chǎng)的追捧。

1.3 人工液體發(fā)酵栽培技術(shù)

液體發(fā)酵栽培現(xiàn)多采用液體發(fā)酵罐進(jìn)行培養(yǎng)。將培養(yǎng)基裝入試管內(nèi)，高溫滅菌后擺成斜坡式，把斜面試管菌種接種到培養(yǎng)液中，置于搖床上振蕩培養(yǎng)，然后進(jìn)行種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)，再將高濃度的菌液進(jìn)行液體發(fā)酵罐深層發(fā)酵，最后離心分離獲得成熟蛹蟲(chóng)草?？砂凑詹煌纳a(chǎn)指標(biāo)要求，選擇適合蛹蟲(chóng)草生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基組分。以蟲(chóng)草素含量為研究指標(biāo)，已篩選出以下3種液體培養(yǎng)基配方：1）23 g·L-1葡萄糖、0.4 g·L-1的MgSO4·7H2O、0.6 g·L-1的KH2PO4和0.01 g·L-1的維生素B1[3];2）50 g·L-1的蔗糖、30 g·L-1的玉米漿、0.5 g·L-1 的MgSO4·7H2O和0.5 g·L-1的KH2PO4[4];3）53.36 g·L-1葡萄糖、2.19 g·L-1的MgSO4·7H2O、26.72 g·L-1蛋白胨和0.50 g·L-1的KH2PO4[5]。液體發(fā)酵培養(yǎng)菌絲生長(zhǎng)速度快、產(chǎn)量高，生產(chǎn)條件安全、容易控制，更適合實(shí)現(xiàn)工業(yè)化和機(jī)械化生產(chǎn)，是蛹蟲(chóng)草人工培養(yǎng)領(lǐng)域內(nèi)擁有廣闊前景的培養(yǎng)方式。

2 蛹蟲(chóng)草人工栽培的影響因素

2.1 營(yíng)養(yǎng)條件

人工固體培養(yǎng)中以大米為主要栽培基質(zhì)，蠶蛹粉為唯一氮源的蟲(chóng)草活性成分含量最高，以蛋白胨為唯一氮源的蟲(chóng)草多糖含量最高[6];氮源為蠶蛹粉與檸檬酸銨組合，可顯著提高蛹蟲(chóng)草主要成分含量[7]。方華舟等以葡萄糖、果糖、蔗糖、麥芽糖及淀粉等常見(jiàn)碳源為實(shí)驗(yàn)組，比較觀(guān)察后發(fā)現(xiàn)，這幾種常見(jiàn)碳源對(duì)菌絲體生長(zhǎng)均有促進(jìn)作用，固體培養(yǎng)基中添加適量蔗糖或葡萄糖為佳，液體培養(yǎng)基中添加適量葡萄糖為佳[8]。蛹蟲(chóng)草以蔗糖為碳源時(shí)，生長(zhǎng)最好，最佳濃度為7.2 g·L-1，此時(shí)的蛹菌絲生長(zhǎng)速度快，菌絲量中等，狀態(tài)最好;以可溶性淀粉為碳源時(shí)，可獲得最大菌絲量[9]。無(wú)機(jī)鹽對(duì)蟲(chóng)草生長(zhǎng)的影響較小，其中簡(jiǎn)利茹等對(duì)無(wú)機(jī)鹽的影響效果作了較為全面的實(shí)驗(yàn)，以小麥為主要栽培基質(zhì)，測(cè)定了FeSO4等5種無(wú)機(jī)鹽對(duì)蛹蟲(chóng)草生長(zhǎng)的影響，結(jié)果表明，1.0 mg·L-1的FeSO4培養(yǎng)基中蛹蟲(chóng)草干重、蟲(chóng)草素和腺苷的生成量最高，同時(shí)KH2PO4和MgSO4添加量對(duì)蛹蟲(chóng)草品質(zhì)影響最不明顯[10]。

2.2 溫度

菌類(lèi)的生長(zhǎng)過(guò)程中，溫度是極其重要的一個(gè)影響因素。菌絲生長(zhǎng)速率與生長(zhǎng)環(huán)境溫度有關(guān)，且對(duì)溫度變化較為敏感，最適溫度在15～18 ℃，這個(gè)溫度范圍的蟲(chóng)草長(zhǎng)勢(shì)最好，最有利于發(fā)菌[11]。事實(shí)上，在適宜的光照和適度條件下，不同的生長(zhǎng)階段所需要的最適溫度不同：當(dāng)環(huán)境溫度達(dá)到22.7 ℃時(shí)菌絲體生長(zhǎng)速率達(dá)到最高值，18.1 ℃為子座分化的最佳溫度，14～17 ℃更適合子座的生長(zhǎng)。因此，對(duì)于蛹蟲(chóng)草的栽培，采用變溫管理極其重要。

2.3 光照

光照是蛹蟲(chóng)草重要的生長(zhǎng)條件之一。普遍認(rèn)為，蛹蟲(chóng)草在發(fā)菌初期需要無(wú)光或弱光條件，在隨后的各階段生長(zhǎng)過(guò)程中均需要一定的散射光，且所需光照強(qiáng)度不同。1995年，姜明蘭等發(fā)現(xiàn)，蛹蟲(chóng)草暗培養(yǎng)后轉(zhuǎn)散射光繼續(xù)培養(yǎng)，可獲得品質(zhì)優(yōu)良、膨大的棒狀子實(shí)體[12]。隨著蛹蟲(chóng)草生長(zhǎng)的持續(xù)，其所需的光照強(qiáng)度呈上升趨勢(shì)，只有達(dá)到了各階段的最適光照強(qiáng)度，蛹蟲(chóng)草的活性成分含量才能達(dá)到最高值[7]。光照強(qiáng)度205 lx，光照時(shí)間9.2 h·d-1的培養(yǎng)條件更有利于提高蛹蟲(chóng)草子座生長(zhǎng)期的生物學(xué)效率[13]。此外，光質(zhì)對(duì)蛹蟲(chóng)草菌絲體形態(tài)也會(huì)產(chǎn)生明顯的影響：藍(lán)光更有利于蛹蟲(chóng)草的轉(zhuǎn)色，綠光可以促進(jìn)子座的延伸和增產(chǎn)，增加紅光和黃光會(huì)使子座長(zhǎng)得更為粗壯。

光質(zhì)也是影響蟲(chóng)草生長(zhǎng)的又一重要因素。藍(lán)光不會(huì)降低子實(shí)體產(chǎn)量，且與自然光照的結(jié)果無(wú)差別;光質(zhì)對(duì)過(guò)氧化氫酶（Catalase，CAT）活性影響不大，而超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）活性在藍(lán)光光照下會(huì)降低;光質(zhì)不是影響子實(shí)體腺苷含量的主要因素[14]。雖然藍(lán)光對(duì)蟲(chóng)草素的產(chǎn)生及胞內(nèi)多糖的積累有一定抑制作用，但是可提高類(lèi)胡蘿卜素含量，達(dá)到改善子實(shí)體顏色的目的。因此，根據(jù)蛹蟲(chóng)草的生長(zhǎng)階段選擇最適的光照強(qiáng)度、光照時(shí)間和光質(zhì)組合，是確保和提升蛹蟲(chóng)草品質(zhì)的重要措施之一。

2.4 CO2濃度

近年來(lái)，為探究蛹蟲(chóng)草的最適栽培環(huán)境，優(yōu)化人工栽培過(guò)程，科研人員對(duì)CO2這一因素展開(kāi)了深入的探究，發(fā)現(xiàn)密閉條件不利于蟲(chóng)草的生長(zhǎng)，空氣中的CO2濃度是影響蛹蟲(chóng)草生長(zhǎng)的重要因素之一。在菌絲生長(zhǎng)階段和子座生長(zhǎng)階段，CO2最適濃度分別為3.85%和2.03%，超過(guò)這個(gè)濃度抑制其生長(zhǎng);在子座生長(zhǎng)階段，CO2濃度為1.08%和2.03%時(shí)子座中多糖含量較高;CO2濃度為2.03%時(shí)，子座中蟲(chóng)草酸、游離氨基酸含量最高;有利于子座中蟲(chóng)草素合成的CO2濃度為2.03%和3.34%[15]。因此，控制不同生長(zhǎng)階段的CO2濃度，是優(yōu)化蛹蟲(chóng)草人工栽培技術(shù)的重要環(huán)節(jié)。

3 結(jié)語(yǔ)

作為重要的食藥兼用真菌資源，蛹蟲(chóng)草的生物學(xué)功能已經(jīng)得到了較為廣泛的開(kāi)發(fā)和利用，中國(guó)是蛹蟲(chóng)草商業(yè)化生產(chǎn)的主要國(guó)家，蛹蟲(chóng)草工廠(chǎng)化和標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)技術(shù)的研發(fā)備受矚目。目前，液體發(fā)酵栽培公認(rèn)為是蛹蟲(chóng)草工廠(chǎng)化栽培的最佳方法，最佳的碳源和氮源分別為葡萄糖、蔗糖和蛋白胨、蠶蛹粉。但是，蛹蟲(chóng)草的大規(guī)模栽培工藝仍需要進(jìn)一步優(yōu)化和改進(jìn)，以應(yīng)對(duì)不同市場(chǎng)對(duì)蟲(chóng)草干重、蟲(chóng)草色澤、蟲(chóng)草素等生物活性成分的個(gè)性化需求。

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（責(zé)任編輯：劉寧寧）

收稿日期：2021-08-15

作者簡(jiǎn)介：劉佳慧（2000—），女，黑龍江哈爾濱人，本科在讀，研究方向?yàn)樯锛夹g(shù)。E-mail：1541602564@qq.com。