劉夢穎，姚 婧，李廷榮

(重慶市沙坪壩區(qū)疾病預(yù)防控制中心，重慶 400038)

目前，我國新型冠狀病毒肺炎(新冠肺炎)疫情防控工作常態(tài)化，為落實國家和重慶市關(guān)于加快二級及以上醫(yī)療機構(gòu)實驗室新型冠狀病毒核酸檢測能力建設(shè)相關(guān)文件精神，重慶市沙坪壩區(qū)新建、改建了4家區(qū)級二級醫(yī)療機構(gòu)核酸檢測實驗室。面對重慶市沙坪壩區(qū)新增的核酸檢測實驗室，根據(jù)近年來衛(wèi)生監(jiān)督部門對轄區(qū)病原微生物實驗室的生物安全監(jiān)督檢查結(jié)果，以及新冠肺炎疫情初期對轄區(qū)已開展新型冠狀病毒核酸檢測實驗室的檢查結(jié)果，意識到可能存在一定的生物安全隱患，對其開展生物安全現(xiàn)狀調(diào)查研究是非常有必要的。

1 資料與方法

1.1調(diào)查對象 選取重慶市沙坪壩區(qū)4個區(qū)級二級醫(yī)療機構(gòu)和1家區(qū)疾病預(yù)防控制中心核酸檢測實驗室作為研究對象。

1.2調(diào)查方法 通過問卷調(diào)查和現(xiàn)場檢查相結(jié)合的方式全面分析重慶市沙坪壩區(qū)4家區(qū)級二級醫(yī)療機構(gòu)和1家區(qū)疾病預(yù)防控制中心核酸檢測實驗室生物安全管理情況。參考《病原微生物實驗室生物安全管理條例》[1]、《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定》[2]、《實驗室生物安全通用要求》(GB 19489-2008)[3]、《病原微生物實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》(WS 233-2017)[4]、《新型冠狀病毒實驗室生物安全指南(第二版)》[5]及相關(guān)文獻(xiàn)資料，自行設(shè)計調(diào)查問卷和現(xiàn)場檢查表，經(jīng)專家審核、預(yù)調(diào)查驗證后定稿，并組織調(diào)查員進(jìn)行集中培訓(xùn)學(xué)習(xí)，統(tǒng)一判定標(biāo)準(zhǔn)、檢查手段、結(jié)果記錄、數(shù)據(jù)錄入等。調(diào)查問卷內(nèi)容包括人員基本情況、實驗室生物安全相關(guān)法律法規(guī)、操作技術(shù)規(guī)范、個人防護、樣本管理及運輸、消毒滅菌與廢棄物處置、意外事故處置等，共25道題?，F(xiàn)場檢查表內(nèi)容包括實驗室資質(zhì)、實驗室組織管理、實驗室布局及工作流程、實驗室生物安全設(shè)施設(shè)備配置、實驗室人員管理、實驗室樣本管理及運輸、實驗室消毒滅菌與廢棄物處置7個方面。調(diào)查員將調(diào)查問卷二維碼通過手機端發(fā)放給轄區(qū)5家區(qū)級核酸檢測實驗室負(fù)責(zé)人，由實驗室負(fù)責(zé)人組織人員填寫問卷。在區(qū)衛(wèi)生監(jiān)督部門的協(xié)助下調(diào)查員到核酸檢測實驗室現(xiàn)場開展現(xiàn)場檢查，填寫現(xiàn)場檢查表最后由實驗室負(fù)責(zé)人簽字確認(rèn)。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理 由一名調(diào)查員錄入數(shù)據(jù)，另一名調(diào)查員對錄入的數(shù)據(jù)進(jìn)行復(fù)核。采用Excel2007軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及分析，計數(shù)資料以例數(shù)或百分率進(jìn)行描述性統(tǒng)計分析。

2 結(jié) 果

2.1問卷調(diào)查結(jié)果 在規(guī)定時間內(nèi)收到67份有效的調(diào)查問卷。調(diào)查對象中檢測人員和采樣人員占85.1%(57/67)，管理人員占14.9%(10/67)。正確率最高為回答對23道題，正確率最低為回答對11道題。人員對個人防護、樣本管理及運輸、廢棄物處置等知識掌握較好，對實驗室生物安全相關(guān)法律法規(guī)、操作技術(shù)規(guī)范、消毒滅菌、意外事故處置等知識熟悉不夠。調(diào)查問卷完成情況見表1。

表1 調(diào)查問卷完成情況(n=67)

2.2現(xiàn)場檢查結(jié)果

2.2.1實驗室資質(zhì) 所調(diào)查的5家實驗室均已取得二級生物安全實驗室備案憑證，其中3家實驗室只開展新型冠狀病毒核酸檢測，另外2家實驗室除了開展新型冠狀病毒核酸檢測外，還開展了其他病原菌的核酸檢測工作。

2.2.2實驗室組織管理 5家實驗室均建立了生物安全相關(guān)管理制度,制定了生物安全意外事件應(yīng)急預(yù)案。1家實驗室無生物安全意外事件處置記錄，1家實驗室未定期開展生物安全意外事件應(yīng)急演練，其余4家實驗室雖然開展了生物安全應(yīng)急演練，但演練以桌面演練為主，實戰(zhàn)演練較少。5家實驗室有專、兼職工作人員定期開展實驗室生物安全檢查，并對發(fā)現(xiàn)的問題進(jìn)行了記錄和整改情況的跟蹤驗證。3家實驗室未開展新型冠狀病毒核酸檢測實驗活動風(fēng)險評估，1家實驗室雖開展了風(fēng)險評估，但內(nèi)容不完整。

2.2.3實驗室布局及工作流程 3家實驗室分為3區(qū)，2家實驗室分為4區(qū)，均符合基因擴增檢驗實驗室布局要求。其中2家實驗室為負(fù)壓實驗室。5家實驗室核酸檢測工作流程均符合要求，穿脫防護服的地點均合理。

2.2.4實驗室生物安全設(shè)施設(shè)備配置 5家實驗室均設(shè)置門禁系統(tǒng)，在實驗區(qū)域內(nèi)安裝有洗眼器、生物安全柜、高壓滅菌器、紫外燈等設(shè)備，2家實驗室樣本處理區(qū)有樣本病毒滅活的恒溫水浴箱，4家實驗室樣本處理區(qū)有空氣消毒設(shè)備及器材。除了2家實驗室無洗眼器使用維護記錄、1家實驗室洗眼器使用維護記錄不完整外，5家實驗室對以上其他設(shè)施設(shè)備的使用維護均建立了記錄，內(nèi)容均較完整。5家實驗室的高壓滅菌器、生物安全柜均完成定期檢定或校準(zhǔn)并合格，同時均對高壓滅菌器定期進(jìn)行了滅菌效果監(jiān)測，對紫外燈紫外強度進(jìn)行了定期監(jiān)測。5家實驗室生物安全設(shè)施設(shè)備配置情況見表2。

表2 5家實驗室生物安全設(shè)施設(shè)備配置情況[n(%)，n=5]

2.2.5實驗室人員管理 5家實驗室人員均經(jīng)過生物安全培訓(xùn)，專門針對穿脫防護服進(jìn)行了培訓(xùn)、考核、演練。實驗室為人員提供了較充足的個人防護用品。對非實驗室人員進(jìn)入實驗室區(qū)域進(jìn)行了控制，但有1家實驗室無進(jìn)出登記記錄，1家實驗室登記記錄不完整。

2.2.6實驗室樣本管理及運輸 5家實驗室新型冠狀病毒樣本的管理均符合《新型冠狀病毒生物安全指南(第二版)》相關(guān)要求，新型冠狀病毒樣本的醫(yī)院外運輸符合要求，均辦理了轉(zhuǎn)運證。

2.2.7實驗室消毒滅菌及廢棄物處理 5家實驗室消毒劑及噴灑器材等均滿足核酸實驗室工作需要，均編制了消毒記錄，但有2家實驗室消毒記錄不完整。5家實驗室新型冠狀病毒相關(guān)廢棄物處理符合《新型冠狀病毒生物安全指南(第二版)》相關(guān)要求。

3 討 論

截至2020年底，重慶市沙坪壩區(qū)共有5家區(qū)級核酸檢測實驗室，其中4家為區(qū)級二級醫(yī)療機構(gòu)實驗室，1家為疾病預(yù)防控制中心實驗室。4家區(qū)級二級醫(yī)療機構(gòu)核酸檢測實驗室均為新建或改建的實驗室。本研究對5家核酸檢測實驗室通過問卷調(diào)查和現(xiàn)場檢查相結(jié)合的方式，從意識層面和實施層面全面分析核酸檢測實驗室的生物安全管理情況。

通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，各醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)和疾控機構(gòu)均按照上級要求加強了對實驗室核酸檢測能力建設(shè)，新建或改建的實驗室進(jìn)一步優(yōu)化實驗室布局和流程，2家實驗室還具備負(fù)壓條件。實驗室加強了硬件設(shè)施的投入，配備了生物安全柜、高壓蒸汽滅菌器、消毒設(shè)備等，配備了充足的個人防護用品和消毒用品及器材。但在實驗室軟件方面存在一些問題：(1)實驗室專業(yè)技術(shù)人員和管理人員對生物安全相關(guān)法律法規(guī)、操作技術(shù)規(guī)范、消毒滅菌和意外事件的處置等方面的知識較欠缺，尤其是對新型冠狀病毒檢測相關(guān)的生物安全知識掌握得不夠牢固。在現(xiàn)場檢查人員培訓(xùn)相關(guān)資料時也發(fā)現(xiàn)，各實驗室組織的培訓(xùn)多以理論培訓(xùn)為主，操作演練涉及很少，有部分實驗室未開展培訓(xùn)效果的評價。(2)部分實驗室未定期開展生物安全意外事件應(yīng)急演練或無生物安全意外事件處置記錄；而且人員對意外事件處置的相關(guān)知識錯誤率較高。(3)部分實驗室風(fēng)險評估工作落實不到位，人員的風(fēng)險評估意識薄弱。(4)部分實驗室工作記錄不完善。

為進(jìn)一步提高轄區(qū)核酸檢測實驗室的生物安全管理水平，確保順利開展新冠肺炎疫情常態(tài)化防控工作，提出以下改進(jìn)對策：(1)加強學(xué)習(xí)培訓(xùn)，提高人員生物安全意識。新冠肺炎疫情期間，國家為指導(dǎo)各地做好新冠肺炎疫情防控工作，不斷修訂新型冠狀病毒實驗室相關(guān)的技術(shù)規(guī)范和要求，作為實驗室工作人員和管理人員應(yīng)及時收集最新的政策文件，加強自我學(xué)習(xí)；另外，各實驗室應(yīng)加強人員培訓(xùn)，培訓(xùn)內(nèi)容必須包括法律法規(guī)，做到知法、懂法、守法。培訓(xùn)形式應(yīng)多樣化，一定要做好培訓(xùn)效果評價，要根據(jù)培訓(xùn)效果不斷優(yōu)化培訓(xùn)方式，僅依靠理論培訓(xùn)可能無法達(dá)到良好的效果，尤其是在儀器設(shè)備的正確操作、防護用品的正確選擇及使用、意外事件的處置等方面，只有反復(fù)、多次的操作演練才能牢固掌握知識要點并正確運用到實際工作中[6]。(2)動態(tài)管理生物安全意外事件應(yīng)急預(yù)案，加強應(yīng)急演練。應(yīng)急預(yù)案不是一成不變的，各實驗室應(yīng)根據(jù)人員、實驗活動范圍、檢測對象等變化及時修訂應(yīng)急預(yù)案。開展應(yīng)急演練的目的在于進(jìn)一步加深實驗室工作人員對意外事件處置的認(rèn)識，進(jìn)一步改進(jìn)完善應(yīng)急預(yù)案，使其更加符合實際情況，在真正遇到意外事件時能做到臨危不亂、處變不驚。(3)重視風(fēng)險評估，形成常態(tài)化工作內(nèi)容。對新型冠狀病毒核酸檢測開展實驗室生物安全風(fēng)險評估是新冠肺炎疫情防控環(huán)節(jié)中不可或缺的重要部分[7]。在開展新型冠狀病毒相關(guān)檢測前必須依據(jù)新型冠狀病毒特征、實驗活動范圍和內(nèi)容、設(shè)施設(shè)備、人員能力、廢棄物處置、安全管理措施等方面進(jìn)行綜合分析評估，識別生物安全危險因素，并采取相應(yīng)的風(fēng)險控制措施，以確保實驗室人員和環(huán)境的安全。(4)加強實驗室生物安全自查和監(jiān)督檢查。檢查只是手段，其目的是督促實驗室生物安全管理工作落實到位。醫(yī)療機構(gòu)和疾控機構(gòu)應(yīng)有獨立于實驗室的專門部門和人員定期組織開展實驗室生物安全檢查；同時，衛(wèi)生監(jiān)督管理部門應(yīng)加強日常監(jiān)督檢查，尤其在新冠肺炎疫情防控階段，要加大檢查頻率、處罰力度，確保無實驗室生物安全事故發(fā)生。

當(dāng)前，《中華人民共和國生物安全法》[8]已正式實施，標(biāo)志著我國將生物安全的重要性提高到了前所未有的新高度。作為實驗室管理者要充分意識到實驗室安全工作的重要性，加強實驗室生物安全管理，嚴(yán)守法律責(zé)任底線；作為實驗室工作人員要增強生物安全意識，再好的個人防護也替代不了良好的個人工作行為習(xí)慣；作為衛(wèi)生監(jiān)督管理部門要依法開展執(zhí)法檢查和專項檢查，使生物安全監(jiān)管工作常態(tài)化、制度化、標(biāo)準(zhǔn)化。