李云 段相會 朱映霞 李苗 黃麗珍 符美華

白血病是一組威脅生命的血液和骨髓惡性疾病。在青少年(AYA)人群中,急性白血病最為普遍,而慢性粒細(xì)胞白血病則很少見［1］。隨著年齡的增長,與更具侵略性的疾病生物學(xué)相關(guān)的因素傾向于頻率增加,臨床中常見的急性白血病有急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)和急性非淋巴細(xì)胞白血病(ANLL)［2］。準(zhǔn)確地診斷血液系統(tǒng)惡性腫瘤對臨床管理至關(guān)重要。急性白血病是一組具有各種臨床表現(xiàn)、預(yù)后和優(yōu)選治療方案的惡性腫瘤。有研究顯示［3］,VEGF、LDH 及β2-MG 水平在患者實(shí)體腫瘤及淋巴增值性疾病中數(shù)值顯著升高,可見該指標(biāo)可能與血液系統(tǒng)腫瘤存在密切關(guān)聯(lián),因此本文通過檢測急性白血病患者中的VEGF、LDH 及β2-MG水平變化情況來探究其在臨床診斷及預(yù)后中的價(jià)值,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2018 年1 月～2020 年1 月期間本院血液科治療的急性白血病患者55 例作為觀察組,健康體檢者55 例作為對照組,觀察組又分為化療緩解組(35 例)及未緩解組(20 例)。觀察組中,男29 例,女26 例；年齡16～70 歲,平均年齡(45.1±9.8)歲。對照組中,男30 例,女25 例；年齡17～70 歲,平均年齡(46.5±9.9)歲。觀察組和對照組研究對象的性別、年齡一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究獲得本院倫理委員會批準(zhǔn),研究對象及其家屬均知情同意簽署同意書,研究過程嚴(yán)格遵循倫理學(xué)原則,保障研究對象隱私和安全。急性白血病納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)、骨髓細(xì)胞免疫表型、染色體核型分析確診；②具有完整的臨床資料；③隨訪到完整的遠(yuǎn)期生存數(shù)據(jù)。

1.2 方法 觀察組患者在進(jìn)行化療前1 d 清晨需進(jìn)行無菌促凝管靜脈血采集,告知患者夜間10:00 之后禁食禁水,空腹完成標(biāo)本采集工作,采集數(shù)量為4 ml。將血清先離心后分離,操作轉(zhuǎn)數(shù)設(shè)置為3800 r/min,離心時(shí)間為8 min。將分裝后的標(biāo)本存放在冰箱中,溫度設(shè)置為-80℃,便于日后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行VEGF 檢測,酶標(biāo)儀測量波長吸光度,將吸光度數(shù)值及不同濃度的VEGF 數(shù)值整合并繪制成標(biāo)準(zhǔn)的曲線,根據(jù)繪制的曲線找出對應(yīng)的VEGF 質(zhì)量濃度。試劑來自北京健平金星生物科技有限公司。LDH 檢測應(yīng)用全自動生化分析儀進(jìn)行檢測。β2-MG 應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法完成檢測,試劑來自深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司,以上三種檢測均應(yīng)控制在4 h 內(nèi)。

觀察組患者按照中國急性白血病診療規(guī)范進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的誘導(dǎo)化療治療,其中急性淋巴細(xì)胞白血病患者采用VDCLP 方案或HyperCVAD-A 方案,根據(jù)費(fèi)城染色體結(jié)果陽性與否決定是否聯(lián)合伊馬替尼治療。急性非淋巴細(xì)胞白血病患者采用標(biāo)準(zhǔn)DA、IA、HA 方案等誘導(dǎo)治療。在化療期間應(yīng)對患者進(jìn)行保護(hù)肝臟、胃黏膜、止吐等藥物干預(yù),減輕患者臨床不適癥狀。同時(shí)每日使用淡鹽水漱口,防止唾液感染,密切觀察患者的各項(xiàng)臨床指標(biāo),出現(xiàn)個別患者嚴(yán)重感染時(shí)應(yīng)及時(shí)給予相應(yīng)的急救治療。

治療19～35 d 后,根據(jù)患者化療后復(fù)查的骨髓細(xì)胞學(xué)結(jié)果緩解與否,得到化療緩解組和未緩解組。

1.3 觀察指標(biāo) 對比化療緩解組和未緩解組患者治療前后及對照組的VEGF、LDH、β2-MG 水平,判斷其在診斷急性白血病及判斷預(yù)后中的價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組VEGF 水平對比 化療緩解組和未緩解組治療前后的VEGF 水平均高于對照組,化療緩解組治療前后的VEGF 水平均低于未緩解組,化療緩解組治療后的VEGF 水平低于本組治療前,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；未緩解組治療前后的VEGF 水平對比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 三組VEGF 水平對比(,pg/ml)

表1 三組VEGF 水平對比(,pg/ml)

注：與對照組對比,aP<0.05；與未緩解組對比,bP<0.05；與治療前對比,cP<0.05

2.2 三組LDH 水平對比 化療緩解組和未緩解組治療前后的LDH 水平均高于對照組,化療緩解組治療前后的LDH 水平均低于未緩解組,化療緩解組治療后的LDH 水平低于本組治療前,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；未緩解組治療前后的LDH 水平對比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 三組LDH 水平對比(,IU/L)

表2 三組LDH 水平對比(,IU/L)

注：與對照組對比,aP<0.05；與未緩解組對比,bP<0.05；與治療前對比,cP<0.05

2.3 三組β2-MG 水平對比 化療緩解組和未緩解組治療前后的β2-MG 水平均高于對照組,化療緩解組治療后的β2-MG 水平低于本組治療前及未緩解組治療后,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；化療緩解組和未緩解組治療前及未緩解組治療前后的β2-MG 水平對比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 三組β2-MG 水平對比(,mg/L)

表3 三組β2-MG 水平對比(,mg/L)

注：與對照組對比,aP<0.05；與未緩解組對比,bP<0.05；與治療前對比,cP<0.05

3 討論

急性白血病是一種惡性疾病,源于造血干細(xì)胞克隆,其發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、惡化均在新生血管中完成。血管生成是從已建立的血管中形成新的毛細(xì)血管,并且是生長發(fā)育、傷口愈合和生殖的重要過程［4］。但是,它為惡性細(xì)胞提供了比正常細(xì)胞更大的生存優(yōu)勢,并具有轉(zhuǎn)移潛力。腫瘤相關(guān)血管生成的主要正調(diào)節(jié)劑之一是VEGF［5］。據(jù)報(bào)道［6］,腫瘤組織內(nèi)、尿液、血清和血漿的VEGF 水平在許多實(shí)體瘤患者中均有升高趨勢,并具有預(yù)后意義。VEGF 以高親和力結(jié)合到VEGFR-1受體酪氨酸激酶(RTK)的FLT-1 和VEGFR-2 的Flk-1,KD 中,在配體結(jié)合成為酪氨酸磷酸化并激活細(xì)胞底物［7］。VEGF 和VEGFR-2 在新生血管生成和實(shí)體瘤生長過程中起著重要作用。

VEGF,也稱為VEGF-A,是生理和病理性血管生成的最重要的積極介體之一［8］。VEGF 傳統(tǒng)上在發(fā)育和病理環(huán)境中均被認(rèn)為是旁分泌因子。它促進(jìn)血管生長和重塑的過程,并為內(nèi)皮細(xì)胞提供有絲分裂和生存刺激［9］。它已被證明與人類各種癌癥的進(jìn)展和腫瘤血管生成密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示,化療緩解組和未緩解組治療前后的VEGF 水平均高于對照組,化療緩解組治療前后的VEGF 水平均低于未緩解組,化療緩解組治療后的VEGF 水平低于本組治療前,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示了血管生成在許多不同的血液系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)病機(jī)理中至關(guān)重要,包括急性淋巴細(xì)胞白血病,急性非淋巴細(xì)胞白血病,慢性淋巴細(xì)胞性白血病,慢性髓細(xì)胞性白血病和多發(fā)性骨髓瘤［10］。VEGF 及其受體在急性白血病細(xì)胞中的高表達(dá)均會促進(jìn)病情的發(fā)展及發(fā)生,可將其含量水平作為后續(xù)的診斷及預(yù)后判斷的重要因素［11］。

血清β2-MG 水平可以幫助預(yù)測急性白血病患者的結(jié)局,建議臨床上使用。β2-MG 是一種12-kDa 的輕鏈蛋白結(jié)合Ⅰ類MHC(MHCⅠ)分子,它在MHCⅠ分子中起雙重作用。是組裝的復(fù)合體的結(jié)構(gòu)子單元。已知血清β2-MG 水平可反映腎功能和膜更新,這與腫瘤的大小和生長速率有關(guān)［12］。在包括多發(fā)性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、急性淋巴細(xì)胞白血病、費(fèi)城染色體陽性的慢性髓性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病和骨髓增生異常綜合征等幾種惡性血液病中,升高的血清β2-MG 水平能夠預(yù)測比較差的存活率。本研究結(jié)果顯示,化療緩解組和未緩解組治療前后的β2-MG 水平均高于對照組,化療緩解組治療后的β2-MG 水平低于本組治療前及未緩解組治療后,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示了β2-MG 與急性白血病的活動呈正相關(guān),與急性白血病病情密切相關(guān),在整個治療過程中應(yīng)密切觀測其數(shù)值,針對性的進(jìn)行治療。在急性白血病患者血清中β2-MG 水平高于對照組,但治療后其含量明顯下降。

LDH 以5 種同工酶LDH-1-5 的形式出現(xiàn)在不同的細(xì)胞系統(tǒng)中。LDH-1 和LDH-5 的產(chǎn)生受兩個基因的作用控制,而中間部分(LDH-2-4)被認(rèn)為是LDH-1和LDH-5 的雜合形式,通過肽的締合形成LDH-1 和LDH-5 的四聚體。在正常人血漿中,同工酶1 和2 占主導(dǎo)地位,但這種活性的來源尚未明確。在具有組織損傷和快速細(xì)胞更新的情況下,例如惡性腫瘤,血清LDH 可能升高,同工酶分布通常反映了受損器官和細(xì)胞的分布。本研究結(jié)果顯示,化療緩解組和未緩解組治療前后的LDH 水平均高于對照組,化療緩解組治療前后的LDH 水平均低于未緩解組,化療緩解組治療后的LDH 水平低于本組治療前,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)?？煽闯黾毙园籽』颊週DH 初發(fā)病和未緩解時(shí)均比正常人含量高,可能與患者體內(nèi)存在腫瘤負(fù)荷有一定的關(guān)聯(lián),LDH 含量水平的升高因素主要因?yàn)榘籽〖?xì)胞的數(shù)量,可見腫瘤負(fù)荷與其之間有良好的相關(guān)性,故可動態(tài)觀察LDH 含量的變化用來預(yù)測急性白血病的治療效果及預(yù)后。

綜上所述,VEGF、LDH 及β2-MG 水平與急性白血病的診斷及預(yù)后息息相關(guān),能夠反映患者體內(nèi)的腫瘤負(fù)荷情況,三者之間相互促進(jìn),均參與了發(fā)病的過程,可通過實(shí)時(shí)監(jiān)測血清中VEGF、LDH、β2-MG 水平來作為急性白血病診斷、判斷預(yù)后及指導(dǎo)治療的經(jīng)濟(jì)便捷的科學(xué)依據(jù),建議在臨床上廣泛應(yīng)用。