宗健敏，張?jiān)葡?，孫悅

生物參考區(qū)間是指參考人群實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)值分布的95%參考值范圍，可靠的參考區(qū)間是臨床解讀檢驗(yàn)項(xiàng)目的重要依據(jù)[1]。美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(CLSI)將建立參考區(qū)間的方法分為直接法和間接法[2]。直接法是在明確納入和排除標(biāo)準(zhǔn)后選擇合適的受試人群進(jìn)行分析，較大程度上篩選出符合標(biāo)準(zhǔn)的健康人群，但該法操作困難，成本高，耗時(shí)長(zhǎng)，難以在各級(jí)實(shí)驗(yàn)室間推廣。間接法是以實(shí)驗(yàn)室既有數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，借助統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析來建立參考區(qū)間，其技術(shù)要求較低，適合各級(jí)實(shí)驗(yàn)室開展。本資料旨在通過間接法初步建立本地區(qū)健康成人肺癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物的參考區(qū)間，并與廠家參考區(qū)間進(jìn)行比較，為臨床診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年11月—2020年12月南京中醫(yī)藥大學(xué)連運(yùn)港附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室管理系統(tǒng)中的健康體檢人群信息，排除標(biāo)準(zhǔn)：體格檢查、影像學(xué)檢查異常者；明確診斷患有急、慢性疾病者；妊娠或哺乳期婦女；3個(gè)月內(nèi)有藥物使用、手術(shù)史者；同一患者的多次檢測(cè)結(jié)果只保留初次檢測(cè)結(jié)果。

1.2 儀器與試劑 使用安圖A2000plus化學(xué)發(fā)光分析儀及其配套試劑和校準(zhǔn)品，采用中、高兩水平質(zhì)控和westgard多規(guī)則確保每日所得數(shù)據(jù)均處在室內(nèi)質(zhì)控在控下。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 19.0軟件分析數(shù)據(jù)，使用峰度-偏度法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)(四分位間距)表示，組間比較使用Mann-Whitney U檢驗(yàn)或Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 數(shù)據(jù)正態(tài)性檢驗(yàn) 采用箱式圖法，剔除數(shù)據(jù)兩側(cè)3倍以上的四分位間距的離群值，得到最終納入數(shù)據(jù)。用峰度-偏度法對(duì)受試數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，結(jié)果顯示數(shù)據(jù)呈非正態(tài)分布(P<0.05)。見表1。

表1 入組數(shù)據(jù)情況

2.2 不同性別間NSE、SCC-Ag、CYFRA21-1水平比較 SCC-Ag、CYFRA21-1水平在不同性別間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而NSE水平男性高于女性(P<0.001)。見表2。

表2 不同性別間NSE、SCC-Ag、CYFRA21-1水平比較 (ng/mL)

2.3 不同年齡間NSE、SCC-Ag、CYFRA21-1水平比較 不同年齡間NSE、SCC-Ag水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；CYFRA21-1水平在不同年齡組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，Spearman相關(guān)分析顯示，CYFRA21-1水平與年齡呈中等程度的正向秩相關(guān)關(guān)系(r=0.305，P<0.001)。見表3。(圖1)。

表3 不同年齡間NSE、SCC-Ag、CYFRA21-1水平比較 (ng/mL)

圖1 CYFRA21-1與年齡的散點(diǎn)圖

2.4 參考區(qū)間的建立 NSE、SCC-Ag、CYFRA21-1的CVA分別為7.44%，5.62%，6.01%，CVI分別是13.2%，39.2%，22.2%。指標(biāo)為單側(cè)參考區(qū)間時(shí)Z取1.64，計(jì)算得出SCC-Ag、CYFRA21-1自建參考區(qū)間與廠家參考區(qū)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，NSE自建參考區(qū)間與廠家參考區(qū)間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表4。

表4 自建參考區(qū)間與廠家參考區(qū)間的比較

3 討論

近年來，癌癥已成為全球重要的公共衛(wèi)生問題，其中肺癌在我國的發(fā)病率和死亡率均高居首位，五年生存率和發(fā)達(dá)國家尚存差距，其原因主要為臨床早診率較低[4-5]。目前，NSE、SCC-Ag、CYFRA21-1作為肺癌相關(guān)度較好的腫瘤標(biāo)志物在臨床上有著廣泛的應(yīng)用。NSE主要由神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生，其水平在小細(xì)胞肺癌中明顯升高。SCC-Ag從宮頸鱗狀上皮中分離出來，與鱗癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)；CYFRA21-1是細(xì)胞角蛋白過度降解的產(chǎn)物，目前廣泛用于非小細(xì)胞肺癌的監(jiān)測(cè)。研究表明，以上腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)可明顯提高肺癌診斷的敏感性和特異性[6-9]。

精確的診療離不開準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，不同的參考區(qū)間可賦予檢測(cè)結(jié)果不同的臨床意義。目前，國內(nèi)對(duì)于參考區(qū)間的使用情況并不統(tǒng)一，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室選擇直接套用廠家提供或國外已有的參考區(qū)間。考慮到檢測(cè)系統(tǒng)和受試人群的影響，套用參考區(qū)間可能與本地區(qū)實(shí)際情況不完全一致[10]。因此，為臨床提供更加具有適用性的參考區(qū)間是實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)積極開展的重要任務(wù)[11]。

本資料通過選取體檢人群信息作為分析對(duì)象，根據(jù)性別、年齡等因素分組討論，建立本地區(qū)特異性的參考區(qū)間，幫助臨床更好地進(jìn)行人群評(píng)估。結(jié)果顯示，血清NSE水平在性別組間存在差異，男性組(≤13.28 ng/mL)明顯高于女性組(≤11.88 ng/mL)，在重慶、南通地區(qū)的研究報(bào)告[12-13]也發(fā)現(xiàn)，健康體檢人群中男性群體NSE水平要顯著高于女性群體，產(chǎn)生這種差異很有可能與男性群體吸煙情況較多有關(guān)，也可能是性別相關(guān)的其他生理因素導(dǎo)致，比如激素水平，運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度等。同時(shí)，本資料還發(fā)現(xiàn)CYFRA21-1水平在不同年齡組間存在差異，且兩者間存在正相關(guān)(r=0.305，P<0.001)，江浙地區(qū)有關(guān)研究[14-15]也表明CYFRA21-1水平會(huì)隨著年齡增加呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，但目前尚未有研究得出其水平與年齡是否存在明顯的線性關(guān)系。根據(jù)年齡細(xì)分而建立的參考區(qū)間是否能在臨床上體現(xiàn)出實(shí)用價(jià)值還需要通過進(jìn)一步的研究來驗(yàn)證。此外，本資料通過計(jì)算參考區(qū)間的相對(duì)偏差和RCV進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)SCC-Ag、CYFRA21-1的相對(duì)偏差小于RCV，表明新建區(qū)間和廠商的參考區(qū)間較一致，也證實(shí)了間接法新建參考區(qū)間的可行性。而NSE的新建區(qū)間和廠商參考區(qū)間存在一定差異，其上限較廠商參考區(qū)間更低，可能的原因包括如下：本實(shí)驗(yàn)室和廠家之間的研究人群不同，廠商提供的參考區(qū)間是基于歐美人群建立，并不完全適用中國人；本資料樣本均來自于同一地區(qū)同一實(shí)驗(yàn)室，且樣本量不夠大，抽樣誤差的存在導(dǎo)致數(shù)據(jù)不具備良好的整體代表性；也可能是分析前的數(shù)據(jù)篩選缺乏統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，大部分實(shí)驗(yàn)室都是自行擬定數(shù)據(jù)納入和排除的相關(guān)條件，可能導(dǎo)致分析數(shù)據(jù)中包含了潛在的患病受試者的不合格數(shù)據(jù)；還可能是本實(shí)驗(yàn)室和廠家使用的檢測(cè)系統(tǒng)不同從而使得結(jié)果產(chǎn)生了較大差異。

綜上所述，實(shí)驗(yàn)室建立本地區(qū)人群的參考范圍是非常必要的，盡管間接法建立參考區(qū)間存在著一定偏差，但其針對(duì)人群和適用人群相符合的優(yōu)勢(shì)也是明顯的，這比直接套用廠家參考區(qū)間更有實(shí)際價(jià)值。本研究?jī)H初步探討了NSE、SCC-Ag、CYFRA21-1三項(xiàng)指標(biāo)，要幫助臨床實(shí)現(xiàn)肺癌輔助診斷仍需涉及更多實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目，日后還需進(jìn)一步推進(jìn)多機(jī)構(gòu)多實(shí)驗(yàn)室的聯(lián)合研究。