王 磊，劉海霞，王艷曉

(1.天津市農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)中心，天津 300402；2.天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司，天津 300402)

0 引言

畜禽疫病是制約我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的因素之一。近年來，在我國(guó)流行的禽流感、新城疫、口蹄疫等疫病屢見報(bào)道，給畜牧業(yè)和養(yǎng)殖戶帶來了很大的損失。因此預(yù)防重大畜禽疫病的大規(guī)模暴發(fā)成為我國(guó)動(dòng)物防疫工作的重中之重。

免疫抗體檢測(cè)技術(shù)是依據(jù)畜禽疫病病原體為抗原的特異性免疫識(shí)別的抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)的檢測(cè)技術(shù)。目前，在國(guó)內(nèi)重大畜禽疫病預(yù)防中，AIAD提供了較好的技術(shù)支撐，發(fā)揮了不可替代的作用。本文總結(jié)AIAD在預(yù)防重大畜禽疫病中的重要作用，以期為更好地應(yīng)用該項(xiàng)技術(shù)，促進(jìn)畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展提供有益建議。

1 動(dòng)物免疫抗體檢測(cè)技術(shù)對(duì)預(yù)防重大畜禽疫病的作用

1.1 對(duì)畜禽疫病的診斷確認(rèn)

由于流行疫病的突變性和不可控性，需要采用科學(xué)的手段進(jìn)行檢測(cè)，才能對(duì)疫病進(jìn)行確診。利用動(dòng)物免疫抗體檢測(cè)技術(shù)可以對(duì)畜禽是否患有疫病進(jìn)行生物學(xué)檢測(cè)，對(duì)采集的畜禽血清、分泌物等樣本，采用血清學(xué)檢測(cè)法、酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測(cè)法、免疫層析檢測(cè)法等進(jìn)行測(cè)定分析，可以檢測(cè)出采集樣本中是否含有疫病病原體，而且可以定量分析出樣本中所含有的抗體數(shù)量，從而確定患病畜禽感染的嚴(yán)重程度。如對(duì)某養(yǎng)雞場(chǎng)死亡的50日齡肉雞解剖后，排除細(xì)菌感染，取雞胚囊素液進(jìn)行雞新城疫病毒(NDV)抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示，30只雞抗體水平異常偏高，結(jié)合臨床表現(xiàn)，即可診斷為雞新城疫強(qiáng)毒感染。

1.2 對(duì)畜禽接種疫苗效果評(píng)估

對(duì)于高風(fēng)險(xiǎn)、高致病性的畜禽疫病，可采用接種疫苗進(jìn)行預(yù)防。我國(guó)畜牧業(yè)監(jiān)管部門對(duì)于常見多發(fā)疫病都有免疫密度和免疫抗體合格率的具體要求。免疫抗體檢測(cè)技術(shù)可用于檢驗(yàn)畜禽接種疫苗的免疫程度，通過多克隆抗體檢測(cè)技術(shù)、單克隆抗體檢測(cè)技術(shù)等研究免疫效果，為疫苗接種效果提供評(píng)價(jià)依據(jù)。通過免疫抗體檢測(cè)技術(shù)對(duì)某一地區(qū)的禽流感和家畜口蹄疫抗體水平進(jìn)行檢測(cè)，可以準(zhǔn)確直觀地反映該地區(qū)的畜禽重大疫病疫苗的免疫情況，對(duì)接種疫苗的效果進(jìn)行評(píng)價(jià)[2]。運(yùn)用免疫抗體檢測(cè)技術(shù)對(duì)動(dòng)物免疫抗體進(jìn)行監(jiān)測(cè)，可為免疫質(zhì)量的評(píng)估提供重要依據(jù)，從而推動(dòng)重大動(dòng)物疫病防疫工作的防控效果。在大面積集中免疫后，通過對(duì)動(dòng)物免疫抗體的監(jiān)測(cè)，可以評(píng)估該群體的免疫合格率。在監(jiān)測(cè)過程中，加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物群體抗體動(dòng)態(tài)變化的監(jiān)控，同時(shí)還可以評(píng)估抗體的持續(xù)時(shí)間，為疫苗的接種周期提供科學(xué)依據(jù)。在監(jiān)測(cè)過程中，可采用隨機(jī)抽樣和重點(diǎn)抽樣相結(jié)合的方式進(jìn)行檢測(cè)，以保證檢測(cè)結(jié)果的代表性。

1.3 疫苗生產(chǎn)和疫苗質(zhì)量檢測(cè)的基礎(chǔ)

在重大畜禽動(dòng)物疫病防控中，最重要的方法是通過接種動(dòng)物疫苗進(jìn)行預(yù)防，做好動(dòng)物疫病的預(yù)防工作比做好動(dòng)物疫病的診治工作具有更重要的意義。做好畜禽重大疫病預(yù)防工作與畜禽疫苗的質(zhì)量有著直接的關(guān)系。畜禽疫苗的研究和生產(chǎn)主要通過免疫抗體檢測(cè)技術(shù)實(shí)現(xiàn)。有研究報(bào)道，豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)中應(yīng)用了血清抗體ELISA檢測(cè)和各種類型的RT-PCR檢測(cè)方法，以及由此開發(fā)出的活疫苗、滅活苗、亞單位疫苗、DNA疫苗以及載體疫苗等不同類型的單苗以及聯(lián)苗。在實(shí)際接種過程中，接種疫苗的質(zhì)量受很多因素的影響，主要包括接種時(shí)間、接種劑量及接種程序等，對(duì)于不同動(dòng)物機(jī)體的免疫應(yīng)答能力不一樣，接種效果也不一樣。所以，當(dāng)接種疫苗后，還應(yīng)對(duì)疫苗的接種質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，這同樣離不開抗體檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用。

1.4 為重大畜禽疫病的流行提供預(yù)警監(jiān)測(cè)

預(yù)警機(jī)制是指事件發(fā)生前預(yù)先發(fā)出警示的機(jī)制。建立重大畜禽疫病流行預(yù)警機(jī)制對(duì)于預(yù)防疫病的流行十分重要?？茖W(xué)合理地建立預(yù)警機(jī)制離不開對(duì)疫病檢測(cè)技術(shù)的成熟運(yùn)用。應(yīng)當(dāng)完善重大畜禽疫病監(jiān)測(cè)體系，充分掌握動(dòng)物免疫抗體檢測(cè)技術(shù)，使其在監(jiān)測(cè)疫病過程中發(fā)揮準(zhǔn)確高效的警示作用，從而為建立重大畜禽疫病預(yù)警系統(tǒng)提供科學(xué)依據(jù)。

動(dòng)物疫病一般在春季和秋季容易集中發(fā)生，因此應(yīng)在春季和秋季進(jìn)行集中監(jiān)測(cè)，并對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)、屠宰場(chǎng)及交易市場(chǎng)等，做好采樣監(jiān)測(cè)工作，對(duì)免疫效果進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估。集中監(jiān)測(cè)就是做好重大動(dòng)物疫病的集中免疫工作。定點(diǎn)監(jiān)測(cè)就是根據(jù)當(dāng)?shù)氐膭?dòng)物疫病流行特點(diǎn)，在區(qū)域內(nèi)設(shè)立固定的監(jiān)測(cè)點(diǎn)，并進(jìn)行持續(xù)監(jiān)測(cè)。應(yīng)急監(jiān)測(cè)則是針對(duì)突發(fā)的動(dòng)物疫病及時(shí)組織監(jiān)測(cè)，并評(píng)估動(dòng)物的免疫保護(hù)水平和疫病范圍，從而組織疫病的防治工作[6]。

2 存在的主要問題

2.1 動(dòng)物免疫抗體檢測(cè)技術(shù)需要進(jìn)一步完善

目前免疫抗體檢測(cè)技術(shù)，如膠體金免疫層析法、單克隆抗體技術(shù)等由于敏感性好、特異性強(qiáng)、可重復(fù)使用、結(jié)果便于長(zhǎng)期保存等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物疫病的預(yù)防、疫苗的研究和疫情的診斷等實(shí)際工作中[7]。但是免疫抗體檢測(cè)方法中用到的抗原或抗體制備、篩選過程比較復(fù)雜，要求純度比較高，疫病的病原體變異快，特異性位點(diǎn)不易確定，同時(shí)存在單克隆抗體細(xì)胞株不穩(wěn)定，酶結(jié)合物的特異性、陽性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)的確定等一系列問題。因此，在應(yīng)用過程中還需要進(jìn)一步探索其發(fā)展規(guī)律，揚(yáng)長(zhǎng)避短。

2.2 動(dòng)物免疫抗體檢測(cè)技術(shù)研究力量需提升

近年來，伴隨經(jīng)濟(jì)不斷發(fā)展，科學(xué)技術(shù)水平逐漸提升，我國(guó)獸醫(yī)檢驗(yàn)用動(dòng)物免疫抗體檢測(cè)技術(shù)一直在不斷進(jìn)步與發(fā)展。但是，上述免疫檢測(cè)技術(shù)力量多集中在較發(fā)達(dá)的城市，對(duì)于畜禽養(yǎng)殖一線及其附近邊遠(yuǎn)城市，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備落后，診斷疫情不及時(shí)，對(duì)重大動(dòng)物疫病防控工作影響較大。

2.3 研究人員專業(yè)水平不高

動(dòng)物免疫抗體檢測(cè)技術(shù)對(duì)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室人員的專業(yè)要求很高。而獸醫(yī)研究人員的培養(yǎng)一直以來都是一件非常困難的事情，在進(jìn)行日常免疫預(yù)防、免疫監(jiān)測(cè)等工作的技術(shù)人員往往不具備高精尖的技術(shù)水平，導(dǎo)致疫病確診率及監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)采集可能不準(zhǔn)確。目前，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室人員專業(yè)素養(yǎng)不高的問題，短時(shí)間內(nèi)還沒有辦法得到根治，這不僅是獸醫(yī)專業(yè)技術(shù)研究發(fā)展的瓶頸，更給重大動(dòng)物疫病的防控帶來很大的難度。

3 建議及對(duì)策

3.1 積極運(yùn)用新的AIAD解決現(xiàn)有問題

目前，面對(duì)現(xiàn)有AIAD存在的問題，研究人員已利用其規(guī)律發(fā)現(xiàn)了新的AIAD，如免疫傳感器、蛋白質(zhì)芯片技術(shù)等，隨著新技術(shù)的不斷涌現(xiàn)，可以逐步突破原有技術(shù)的瓶頸。在分子生物學(xué)技術(shù)高速發(fā)展下，還可以應(yīng)用RT-PCR、基因芯片、RNA指紋圖譜等技術(shù)，對(duì)突變病原基因或突變位點(diǎn)進(jìn)行精準(zhǔn)定位，從而解決抗原單一且易突變等一系列問題，可極大提高我國(guó)畜禽疫病預(yù)防工作的成效。

3.2 建立完善的動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)

動(dòng)物免疫抗體監(jiān)測(cè)是預(yù)防重大動(dòng)物疫病的重要工作，要提升免疫抗體監(jiān)測(cè)的質(zhì)量和效果，就要建立完善的動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)布局要根據(jù)監(jiān)測(cè)目標(biāo)制訂明確的管理規(guī)范應(yīng)以區(qū)域監(jiān)控為主，覆蓋全部監(jiān)測(cè)區(qū)域。。在動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)過程中，要做好集中監(jiān)測(cè)、常規(guī)監(jiān)測(cè)、定點(diǎn)監(jiān)測(cè)和應(yīng)急監(jiān)測(cè)。

3.3 加強(qiáng)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)，提高人才隊(duì)伍專業(yè)技術(shù)水平

加強(qiáng)動(dòng)物抗體監(jiān)測(cè)就要進(jìn)一步完善養(yǎng)殖一線地區(qū)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)，重視專業(yè)人才隊(duì)伍的建設(shè)，不斷提升免疫監(jiān)測(cè)水平。在一些一線地區(qū)及邊遠(yuǎn)城市，須擴(kuò)大經(jīng)濟(jì)投入，因地制宜建立獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，配備相關(guān)儀器設(shè)備，建設(shè)專業(yè)人才隊(duì)伍，建立完善的檢測(cè)程序和數(shù)據(jù)錄入系統(tǒng)，滿足養(yǎng)殖業(yè)一線的檢測(cè)需求。應(yīng)更新老舊實(shí)驗(yàn)室及老舊設(shè)備，以提高檢測(cè)的精準(zhǔn)性，同時(shí)注重相關(guān)人員的培訓(xùn)，不斷提升實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員的業(yè)務(wù)水平和檢驗(yàn)水平。

4 結(jié)語

動(dòng)物免疫抗體技術(shù)在預(yù)防和控制畜禽動(dòng)物疫病發(fā)生過程中發(fā)揮著十分重要的作用，也是預(yù)防動(dòng)物疫情發(fā)生最關(guān)鍵的工作。在應(yīng)用動(dòng)物免疫抗體技術(shù)預(yù)防畜禽重大疫病過程中，必須將動(dòng)物免疫接種抗體監(jiān)測(cè)工作落到實(shí)處，保證免疫時(shí)間和免疫程序科學(xué)、有效，并選擇高質(zhì)量的疫苗，按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行免疫接種，提高免疫質(zhì)量，最大程度控制和減少畜禽重大動(dòng)物疫病的發(fā)生。