李江鵬
(桂林市人民醫(yī)院,廣西 桂林,541000)
免疫組織化學指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,也是對相應抗原進行定性、定位和定量測定的一種新技術[2]。免疫組織化學檢測陽性對照合理設置的情況下,不僅能夠有效提高敏感性、特異性和穩(wěn)定性的情況下,也能夠對免疫組織化學檢測的質量進行有效控制[3]。臨床中免疫組織化學檢測常用的陽性對照包括組織內陽性對照、單個組織陽性對照等。基于此,本文就免疫組織化學檢測陽性對照的應用現狀與進展展開分析,內容如下。
在楊紅麗[4]等人的研究中,選取800例PD-L1免疫組織化學切片,分別統(tǒng)計分析陽性率<1%,1%~49%,≥50%的患者。結果顯示:PD-L1陽性率<1%、1%~49%、≥50%的患者分別占63.88%(511/800)、29.38%(235/800)、6.75%(54/800)??梢缘贸雒庖邔W組織檢測腫瘤患者具有良好效果。陽性對照組種類包含了組織內陽性對照、單個組織陽性對照、組織芯片陽性對照、多組織對照體系對照、多組織羊膜卷陽性對照、組織碎片懸液陽性對照以及細胞系液態(tài)陽性對照等。其中組織內陽性對照主要是等到檢測的正常組織可以表達目的抗原,將該組織作為陽性對照,也就是組織內進行對照。在進行檢測的過程中,此種陽性對照組方法要優(yōu)于外對照,因為組織內陽性對照的蛋白表達相對比較穩(wěn)定,而且該組織和等待檢測組織細胞分析前后的參數是抑制的,并不用再選取其他陽性組織進行對照切片,一定程度上可以節(jié)約時間與成本。不過該檢測方式也存在一定問題,比如不是所有的組織都能夠進行該方式對照。
單個組織陽性對照,此種對照方式是挑選抗體陽性的組織蠟塊,并選擇具有代表性的區(qū)域,和等待檢測組織一起進行檢測。此種檢測方式主要是和等到檢測組織放在同一載玻片上,操作相對而言比較簡單。不過此種檢測方式需要耗費比較大的人力物力制作切片,而且對半定量的指導性有著一定局限性,比如針對乳腺癌一些指標結果的判定。組織芯片陽性對照,在相關研究中顯示,該方式主要是需要挑選具有明確陽性的組織蠟塊和相應切片,并選擇最有代表性的區(qū)域[5]。在進行此種方式檢測過程中,需要在切片上進行標記,并使用組織芯片將芯柱取出來之后放在提前設計好的蠟塊上,并將其放在平整的操作臺上,最后放置在溫箱中。此外是組織碎片懸液陽性對照,在相關研究中顯示,進行檢測期間需要選擇腫瘤豐富陽性組織蠟塊,連續(xù)切片后放入50ml的干凈燒杯中,并用玻璃棒輕輕攪碎,后進行溶解于離心等一系列操作后制成懸液,將其滴在空白載玻片上,染色后觀察細胞分布情況[6]。
在陳培瓊[7]等人的研究中,多組織對照體系對照檢測手機外檢的闌尾、結腸腺癌以及甲狀腺等組織,經過4%中性甲醛液的固定,以及常規(guī)脫水、浸蠟、包埋等方式,選擇明確病例診斷結果剩余的標本進行試驗。此種檢測方式具有組織靈活自由的特點,將平時取材后剩余的組織進行檢測就可以,并不需要耗費大量人力物力,不過在制作過程中需要進行取材、固定和脫水等程序。細胞系液態(tài)陽性對照是臨床中應用效果較好的方法,能夠批量培養(yǎng)不同種類抗原細胞,以及生產不同抗體陽性對照。在李韜等人的研究中,采用已知的HER-2免疫組織化學染色呈強陽性的乳腺癌,胃癌組織制作液態(tài)陽性對照,在3個月內的不同時間將制作的液態(tài)陽性對照進行HER-2免疫組織化學染色并實際用于乳腺癌。結果顯示:HER-2免疫組織化學染色的液態(tài)陽性對照在保存3個月內不同時間的檢測結果有良好的一致性,用于腫瘤組織HER-2免疫組織化學染色結果判讀效果較好[8]。由以上結果可以得出,此種檢測方式有著良好效果。
根據免疫組織化學檢測判讀原則的而不同可以分為定性和半定量兩種,其中定性主要用在病例診斷中,此種方式只需要作出陰性和陽性的判斷。而半定量主要用于腫瘤組織中激素受體蛋白和藥敏試驗等檢測中,該方式在臨床治療中有著重要作用[9]。免疫組織化學檢測具有準確和快速的特點,使得其在臨床診斷中得到廣泛應用,能夠進一步診斷腫瘤良性惡性、一些感染性疾病、臨床用藥指導以及對預后的評估等,均有良好應用效果。隨著臨床醫(yī)學水平不斷進步與發(fā)展的基礎上,免疫組織化學檢測在臨床靶向治療的靶標篩選中也起到一定作用,能夠更好地輔助醫(yī)師進行藥物選擇,提高治療的科學性和安全程度。在進行免疫組織化學檢測的過程中,對照的選擇、切片處理、脫蠟效果以及載玻片的選擇都直接影響著最終檢測結果。所以在進行檢測的過程中,應當進一步提高實驗室內部合理布局,并對檢測技術人員與醫(yī)師進行定期培訓,提高檢測規(guī)范性。
免疫組織化學檢測屬于一種過程性的指標,在進行檢測的過程中需要保證每一步的操作都具有規(guī)范性,并設置合理的對照,這樣才能夠提高實驗檢測的科學性,為患者的后續(xù)治療提供依據[10]。在進行免疫組織化學檢測的過程中,對照設置是控制該檢測質量的主要內容,也是判斷的最終依據,能夠明確抗原是否充分表達或者是否存在缺失狀況。所以,在展開免疫組織化學檢測期間,應當加強陽性對照的選擇,提高檢測準確性,為后續(xù)治療提供科學依據,促進患者疾病恢復。