樊蓉

（寧夏靈武市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局畜牧水產(chǎn)技術(shù)推廣服務(wù)中心 750400）

1 試驗(yàn)?zāi)康?/h2>

目前關(guān)于低聚糖對肉雞腸道形態(tài)及盲腸揮發(fā)性脂肪酸影響的研究較少，本試驗(yàn)根據(jù)已有研究推薦的添加劑量，在肉雞基礎(chǔ)日糧中添加3 種不同劑量的低聚糖，比較其對肉雞腸道形態(tài)及盲腸內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸的影響，為低聚糖在肉雞上的應(yīng)用提供指導(dǎo)。

2 試驗(yàn)方法

選用健康、體重相近的1 日齡黃羽肉雞360 只。隨機(jī)分為5 組，分別為對照組、抗生素組、低聚異麥芽糖組（基礎(chǔ)日糧+3g/kg 低聚異麥芽糖）、低聚棉籽糖組（基礎(chǔ)日糧+3g/kg 低聚棉籽糖）和低聚殼聚糖組（基礎(chǔ)日糧+30mg/kg 低聚殼聚糖），每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12 只雞。試驗(yàn)期56d，分為前期（1～28 日齡）和后期（29～56 日齡）兩個(gè)階段。

2.1 回腸形態(tài)結(jié)構(gòu)

取回腸后1/2 段1～2cm（距末端2cm），用生理鹽水沖洗干凈后，放入裝有10%甲醛的離心管備用。蘇木素染色5～10min，蒸餾水沖洗后PBS 返藍(lán)；伊紅染色3～5min，再次使用蒸餾水沖洗。梯度酒精（95%～100%）脫水，每級5min。置于二甲苯中兩次，每次10min，中性樹膠封片。顯微鏡下觀察并測量3處平直且形態(tài)完整的絨毛高度（Villous Height，VH），以及相應(yīng)的隱窩深度（Crypt Depth，CD)，計(jì)算絨毛高度/隱窩深度值（VH/CD）。

2.2 盲腸揮發(fā)性脂肪酸

取盲腸食糜于凍存管（半管左右），放入液氮中速凍，并立即轉(zhuǎn)-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。解凍后離心15min（4000r/min），取0.5ml 上清液，加入等量流動相混勻，離心5min（13000r/min），取上清液1ml，經(jīng)0.45μm 濾膜過濾后，用氣相色譜法測乙酸、丙酸、正丁酸、異丁酸含量。

3 試驗(yàn)結(jié)果

3.1 低聚糖對肉雞腸道形態(tài)的影響

與空白組比較，28 日齡時(shí)，在日糧中添加抗生素和低聚糖均能顯著提高黃羽肉雞的絨毛高度，且低聚棉籽糖組的效果最好；與抗生素組比較，低聚異麥芽糖組的回腸絨毛高度顯著降低，低聚棉籽糖組和低聚異麥芽糖組無顯著差異。與空白組和抗生素組比較，各低聚糖組的隱窩深度顯著降低，V/C (絨毛高度/隱窩深度) 值顯著升高，且低聚棉籽糖組和低聚殼聚糖組V/C 值顯著高于低聚異麥芽糖組。

56 日齡時(shí)，低聚棉籽糖組的絨毛高度顯著高于其余各組；抗生素組和各低聚糖組的隱窩深度都顯著低于空白組，與抗生素組比較，低聚棉籽糖組和低聚異麥芽糖組的隱窩深度顯著降低；與空白組相比，抗生素組和各低聚糖組的V/C 值顯著提高，與抗生素組比較，低聚棉籽糖組V/C 值顯著提高，低聚異麥芽糖組和低聚殼聚糖組無顯著差異。

3.2 低聚糖對肉雞盲腸揮發(fā)性脂肪酸的影響

與空白組和抗生素組相比，在黃羽肉雞日糧中添加低聚異麥芽糖可以顯著提高盲腸中的戊酸含量，丁酸含量也有提高趨勢，但差異不顯著。

4 討論

絨毛高度、隱窩深度及絨毛高度/隱窩深度（V/C）是反映腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)最直觀的指標(biāo)。由于腸道內(nèi)養(yǎng)分的吸收主要依賴于腸絨毛，因此，絨毛高度的增加意味著養(yǎng)分與絨毛接觸面積的增加，這有利于腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。腸道上皮細(xì)胞的分化能力取決于隱窩深度，隱窩底部的腸細(xì)胞通過分化和遷移達(dá)到腸絨毛頂部為腸道上皮細(xì)胞的一次更新。隱窩深度大于正常值時(shí)，意味著腸黏膜可能出現(xiàn)病變[1]。在本試驗(yàn)中，低聚異麥芽糖、低聚棉籽糖和低聚殼聚糖都顯著提高了回腸前期和后期的絨毛高度和V/C 值，降低了隱窩深度。說明日糧添加3 種低聚糖都能改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)。已有大量試驗(yàn)證明，低聚異麥芽糖可以提高腸道絨毛高度。在試驗(yàn)日糧中添加0.1%的低聚殼聚糖，結(jié)果表明，低聚殼聚糖可以提高肉仔雞絨毛密度，有利于絨毛的生長，其結(jié)論與本試驗(yàn)類似。在斷奶仔豬日糧中添加低聚殼聚糖后發(fā)現(xiàn)，低聚殼聚糖并不會影響小腸的絨毛高度和隱窩深度，造成差異的原因可能與試驗(yàn)動物、試驗(yàn)階段和添加劑量不同有關(guān)。3 種低聚糖顯著改善腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的原因可能與腸道微生物的改變及腸道內(nèi)產(chǎn)生的揮發(fā)性脂肪酸對腸絨毛的營養(yǎng)作用有關(guān)。

揮發(fā)性脂肪酸是腸道微生物發(fā)酵腸道中碳水化合物等難消化性食物的終產(chǎn)物。微生物菌群將碳水化合物發(fā)酵成短鏈脂肪酸，可為腸上皮細(xì)胞提供能量。因此，微生物的區(qū)系特征會影響揮發(fā)性脂肪酸的含量和組成。Zhang 等[2]發(fā)現(xiàn)，0.3%的低聚異麥芽糖可以提高空腸中的異丁酸含量，但降低了異戊酸的含量。在斷奶仔豬日糧中添加0.05%的低聚異麥芽糖，結(jié)果顯示，低聚異麥芽糖組盲腸的乙酸和丙酸濃度顯著高于對照組。低聚異麥芽糖可以提高斷奶仔豬盲腸和結(jié)腸的總揮發(fā)性脂肪酸濃度。在本試驗(yàn)中，低聚異麥芽糖組的異丁酸含量顯著高于其余低聚糖組，異戊酸的含量顯著高于其余各組。與上述試驗(yàn)結(jié)論稍有差異，但總體趨勢都是低聚異麥芽糖可以提高揮發(fā)性脂肪酸的濃度，造成差異的原因可能與試驗(yàn)動物和動物腸斷不同有關(guān)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，低聚異麥芽糖組在科水平上，占比最高的瘤胃球菌科的相對豐度高于對照組。瘤胃球菌大量存在于反芻動物的瘤胃中，對纖維具有一定的降解和消化能力，這可能是日糧中添加低聚異麥芽糖導(dǎo)致黃羽肉雞盲腸中部分揮發(fā)性脂肪酸含量升高的原因。

5 結(jié)論

抗生素和3 種低聚糖都能顯著提高黃羽肉雞回腸的絨毛高度和V/C 值，并降低其隱窩深度，低聚異麥芽糖還可提高盲腸中戊酸和異丁酸含量。