張 赟 蘇家林 盧朝霞 謝淑琴 鄭九生▲

1.江西省婦幼保健院產(chǎn)科，江西南昌 330000；2.江西省婦幼保健院腫瘤科，江西南昌 330000

妊娠期高血壓疾病屬于妊娠期常見(jiàn)并發(fā)癥，嚴(yán)重影響孕產(chǎn)婦、圍生兒健康，同時(shí)也是令母嬰死亡的因素之一[1-2]。截止目前，臨床未查詢到頭發(fā)妊娠期高血壓疾病的病因，但隨病癥不斷發(fā)展，妊娠期高血壓疾病可能會(huì)損傷機(jī)體重要器官，其中腎損傷較為常見(jiàn)[3-4]。腎損傷臨床判別指標(biāo)為尿微量蛋白與腎小球?yàn)V過(guò)率，但兩項(xiàng)數(shù)值的變化往往體現(xiàn)在較為嚴(yán)重的腎損傷之后，缺乏一定敏感性，因此不能對(duì)早期腎損傷進(jìn)行評(píng)估[5-6]?；诖耍狙芯恐荚谔接懭焉锲诟哐獕杭膊≡缙谀I損傷產(chǎn)婦檢測(cè)血清胱抑素C（serun cystatin C，SCys C）、尿液腎損傷分子-1（renal injury molecule-1，KIM-1）的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至12月江西省婦幼保健院收治的30 例妊娠期高血壓疾病早期腎損傷產(chǎn)婦作為試驗(yàn)組，選取同期30 例妊娠期高血壓疾病而無(wú)腎損的產(chǎn)婦作為對(duì)照組。試驗(yàn)組產(chǎn)婦年齡22～37 歲，平均（29.5±4.0）歲；孕齡24～31 周，平均（27.5±3.0）周；孕次1～3 次，平均（2.5±0.3）次；單胎18 例，多胎12 例。對(duì)照組產(chǎn)婦年齡23～38 歲，平均（30.5±4.5）歲；孕齡25～32 周，平均（28.5±3.5）周；孕次1～3 次，平均（2.5±0.3）次；單胎19 例，多胎11 例。兩組產(chǎn)婦的年齡、孕齡、孕次等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本次研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①處于妊娠期，孕周＞22 周；②意識(shí)清晰，溝通無(wú)阻礙；③24 h 尿蛋白定量水平增高；④產(chǎn)婦或家屬對(duì)本研究知曉并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①同時(shí)參與另一研究者；②每日酗酒、抽煙者；③原發(fā)腎臟損傷者。

1.2 方法

實(shí)驗(yàn)試劑與設(shè)備： 尿KIM-1 試劑盒、 血清CysC試劑盒，全自動(dòng)生化分析儀（西門子ADVIA2400），紫外線分光光度儀（型號(hào)：UV2100）。

兩組產(chǎn)婦入院第2 天清晨采集尿液標(biāo)本，離心分離處理后留取上層尿液，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)KIM-1，步驟如下：取出試劑盒與尿標(biāo)本，在酶標(biāo)包被板上設(shè)置選取10 孔標(biāo)準(zhǔn)品孔，將標(biāo)準(zhǔn)品與稀釋液標(biāo)準(zhǔn)品加入孔內(nèi)； 將樣本稀釋液直接標(biāo)記為標(biāo)準(zhǔn)濃度0.1 mg/L；加樣：選取空白孔與待測(cè)樣品孔，將50 ml樣品放入空白孔內(nèi)； 將50 ml 樣品稀釋液放置空白孔； 依次在另一側(cè)孔中放入40 ml 樣品稀釋液、10 ml待測(cè)樣；在酶標(biāo)板孔底部置入樣品，期間盡量不去觸碰孔壁，輕晃混勻。酶標(biāo)板經(jīng)版模加固封閉后，將其放入37℃保溫箱內(nèi)，時(shí)間為30 min；配備30 倍蒸餾水與30 倍濃縮洗滌液作為備用，將酶標(biāo)板上板膜揭掉并將其甩干，在每孔內(nèi)徑洗滌后并注滿，連續(xù)洗滌5 次之后將其甩干；將50 ml 酶標(biāo)試劑放入每孔內(nèi)，之后展開(kāi)洗滌與溫育；以此經(jīng)50 ml 顯色劑A、50 ml 顯色劑B 加入每個(gè)孔內(nèi)，混勻輕震，避開(kāi)室溫環(huán)境，顯色15 min；在每孔內(nèi)放置50 ml 終止液，此時(shí)藍(lán)色會(huì)立即轉(zhuǎn)化為黃色； 加入終止液15 min 后，利用酶標(biāo)儀在450 mm 波長(zhǎng)處測(cè)定每孔吸光度。

兩組產(chǎn)婦入院2 d 清晨空腹下抽取靜脈血，置于無(wú)菌管，室溫靜置10 min，2000 r/min，將血清離心分離，留取上清液，應(yīng)用乳膠增強(qiáng)免疫比濁法測(cè)定血清Cys C 濃度。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

比較兩組產(chǎn)婦的尿N-乙酰葡糖胺（N-acetylglucosamine，NAG）、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 水平及不良母嬰結(jié)局發(fā)生率。①觀察兩組腎功能相關(guān)指標(biāo)，判定依據(jù)：尿NAG 正常值0.3～12 U/L；24 h 尿蛋白定量正常值＜150 mg；SCys C 正常值0.5～1.1 mg/L；KIM-1 正常值＜1 μmol/L；②不良母嬰結(jié)局包括胎兒生長(zhǎng)受限、新生兒窒息、新生兒低血糖與呼吸窘迫。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組產(chǎn)婦腎功能指標(biāo)的比較

試驗(yàn)組產(chǎn)婦的尿NAG、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 兩組產(chǎn)婦腎功能指標(biāo)的比較（±s）

表1 兩組產(chǎn)婦腎功能指標(biāo)的比較（±s）

組別 尿NAG（U/L）24 h 尿蛋白定量（mg）SCys C（mg/L）KIM-1（μmol/L）試驗(yàn)組（n=30）對(duì)照組（n=30）t 值P 值8.91±1.24 1.72±0.35 30.565 0.000 272.08±26.88 118.13±15.39 27.223 0.000 7.05±1.02 0.86±0.12 33.012 0.000 3.26±0.44 0.86±0.13 28.651 0.000

2.2 兩組不良母嬰結(jié)局發(fā)生率的比較

試驗(yàn)組的不良母嬰結(jié)局胎兒生長(zhǎng)受限、新生兒窒息、 新生兒低血糖與呼吸窘迫發(fā)生率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

3 討論

通過(guò)文獻(xiàn)資料分析，妊娠期高血壓引起的腎損傷在孕產(chǎn)婦死亡原因中排在前三，由此可知，該疾病屬于孕產(chǎn)婦嚴(yán)重并發(fā)癥，同時(shí)在臨床產(chǎn)科中屬于重要研究課題之一[7-8]。該疾病發(fā)展過(guò)程中，產(chǎn)婦全身出現(xiàn)異常，即原本體內(nèi)正常小血管發(fā)生痙攣，繼而引發(fā)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，嚴(yán)重時(shí)或疾病病程發(fā)展，會(huì)逐漸發(fā)生局部缺血，令其原有器官、系統(tǒng)血液灌流量降低[9]。血肌酐屬于人體肌肉代謝生成的小分子物質(zhì)，會(huì)經(jīng)腎小球過(guò)濾，隨尿液排出，因此臨床將該指標(biāo)作為反應(yīng)腎小球過(guò)濾功能的標(biāo)志之一。尿素氮主要是由腎臟排泄的蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物，機(jī)體腎功能產(chǎn)生改變時(shí)，尿素氮正常排泄受到影響，其含量升高，因此臨床會(huì)采用兩項(xiàng)指標(biāo)對(duì)早期腎損傷進(jìn)行判斷。但因檢測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)果靈敏度較低，加之該水平值結(jié)果易受到他類干擾因素，因此不能直觀地對(duì)早期腎損傷進(jìn)行診斷，從而臨床需選取早期腎損傷標(biāo)志物為疾病實(shí)施診斷與早期治療[10-11]。

尿NAG 臨床中屬于腎功能相關(guān)指標(biāo)，可對(duì)腎臟進(jìn)行監(jiān)測(cè)。該指標(biāo)為早期腎臟損傷監(jiān)測(cè)指標(biāo)之一，各種腎臟實(shí)質(zhì)性疾病引起的腎小管損害都有可能會(huì)導(dǎo)致尿NAG 升高。Cys C 屬于人體中的一種血清因子，即半胱氨酸蛋白酶抑制，其屬性可與體內(nèi)所有核細(xì)胞進(jìn)行合成、分泌，因此穩(wěn)定生成速率較高[12]。該抑制劑體積、分量較小，因此在腎小球中可自由暢行，并順利留置原尿中，但該因子存在于原尿中時(shí)，臨近腎臟近曲小管會(huì)將其全部吸收，吸收后實(shí)施分離與分解，分解可成為小分子肽或是氨基酸。分離后的因子，腎臟近曲小管無(wú)法再次進(jìn)行吸收與釋放[13-14]，故可將Cys C作為臨床上對(duì)腎小球?yàn)V過(guò)功能的理想內(nèi)源性物質(zhì)之一。KIM-1 最早發(fā)現(xiàn)是在1998年臨床動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，其本質(zhì)在臨床中屬于T 細(xì)胞免疫球蛋白黏膜結(jié)構(gòu)域1。有研究發(fā)現(xiàn)，KIM-1 的表達(dá)方式與其他細(xì)胞不同，或是不以任何表達(dá)形式，但當(dāng)機(jī)體受多類疾病損傷時(shí)，該指標(biāo)會(huì)顯現(xiàn)與腎小管上皮細(xì)胞表面的表達(dá)中，即表達(dá)形式可為，水平值處于上升階段，且KIM-1 作為Ⅰ型跨膜糖蛋白時(shí)，其表達(dá)數(shù)據(jù)也只會(huì)在腎臟損傷時(shí)出現(xiàn)，故而臨床將其指標(biāo)作為診斷早期腎小管損傷的標(biāo)志物之一[15]。本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組產(chǎn)婦的尿NAG、24 h 尿蛋白定量、SCys C、KIM-1 均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示Cys C、KIM-1 檢測(cè)可用于對(duì)妊娠期高血壓早期腎損傷產(chǎn)婦的早期篩查。

綜上所述，SCys C、UKIM-1 檢測(cè)對(duì)于妊娠期高血壓疾病早期腎損傷診斷具有一定價(jià)值。