吳柳萍
(羅城仫佬族自治縣中醫(yī)醫(yī)院,廣西 羅城,546400)
感染性疾病是指由真菌、細菌、病毒等致病微生物引起的相關(guān)疾病,該類疾病多為炎癥性疾病,對呼吸、消化等多系統(tǒng)均產(chǎn)生影響。常有肺炎、泌尿系統(tǒng)、腸炎等,患者多伴有體溫升高、局部炎癥等全身癥狀,面對該類疾病需提高警惕,及時給予合理有效的診斷及治療,謹防疾病惡化給患者生命健康造成嚴重傷害[1-2]、降低疾病傳播風險。傳統(tǒng)微生物檢驗技術(shù)被廣泛應用于該類疾病的診療中,但有研究[3-4]表明該技術(shù)存在檢測效率低、準確率不足等弊端。隨著現(xiàn)代醫(yī)學技術(shù)不斷進步,微生物快速檢驗技術(shù)得到更多應用,該技術(shù)可有效針對人體各個系統(tǒng)的感染性疾病,彌補傳統(tǒng)檢驗技術(shù)的不足。本文通過分析幾種常見的微生物快速檢測技術(shù)應用進展,現(xiàn)報道如下:
傳統(tǒng)微生物鑒定技術(shù)需經(jīng)過漫長細菌培養(yǎng)階段,這樣的方式會顯著降低檢測效率,且該操作易出現(xiàn)失誤[5]。蘇章庭,周露的研究[6]對比了傳統(tǒng)技術(shù)與微生物自動化鑒定技術(shù),結(jié)果發(fā)現(xiàn)微生物自動化鑒定技術(shù)檢測時間低于前者,且在節(jié)省人力資源、提升檢測精準度方面均有優(yōu)勢。全自動微生物專家檢測系統(tǒng):這一專家系統(tǒng)是美國微生物學會1999年首次提出,該系統(tǒng)是指根據(jù)臨床微生物種類等,同時結(jié)合臨床發(fā)表、出版的數(shù)據(jù)信息,為檢測結(jié)果提供解釋說明[7-8]。該技術(shù)大幅度提升了檢測速度,在幾小時內(nèi)即可輸出檢測結(jié)果。該技術(shù)為臨床傳染性疾病提供診斷依據(jù)與治療建議。全自動微生物培養(yǎng)檢測系統(tǒng):該系統(tǒng)采用不可逆CO2顏色改變技術(shù),可快速檢測出培養(yǎng)皿內(nèi)是否有微生物生長[9]。其優(yōu)勢在于技術(shù)人員不需要做復雜操作,僅需要將培養(yǎng)皿置于檢測儀器中,檢測結(jié)束后,儀器會自動分開陽性與陰性結(jié)果[10],顯著提升了檢測效率及精準度。
臨床對于抗原及抗體檢測時均要對患者行靜脈抽血提取血清,故存在于體外的抗原及抗體反應亦被稱為血清學試驗。該試驗極大簡化了微生物病原檢測的步驟,提高了檢測效率,是臨床微生物檢測的主要方法之一[11]。
2.1 凝集反應在溫度、酸堿度、電解質(zhì)合適的條件細菌等抗原與抗體可發(fā)生特異性結(jié)合,并能出現(xiàn)肉眼可觀察到的凝集反應,即反應后出現(xiàn)的凝集塊[12]。該反應較適用于肺炎鏈球菌、志賀菌、沙門菌等菌落的分型與鑒定。有研究[13]指出該檢測手段具有操作便捷、檢測效率高、準確度高、特異性強等優(yōu)勢。
2.2 沉淀反應該反應是指可溶性抗原與相應抗體在有電解質(zhì)存在的情況下,按適當比例所形成的可見沉淀物現(xiàn)象。主要包括環(huán)狀、瓊脂擴散法、絮狀三種類型。其中環(huán)狀類型常用于炭疽、肺炎鏈球菌的診斷、鑒定。絮狀常用于定量測定毒素、類毒素等[14]。
2.3 酶聯(lián)免疫技術(shù)該技術(shù)于1974 法國研究者首次提出,近些年數(shù)據(jù)[15]發(fā)現(xiàn),免疫酶技術(shù)在臨床使用頻率正不斷提高,使用范圍極廣,該技術(shù)主要通過酶的特殊作用將所檢物質(zhì)轉(zhuǎn)化,其主要利用了抗原抗體的特殊反應。同時提取微生物代謝出來的酶,并將其置于特殊的顯色底板上并觀察顯色反應,最后對培養(yǎng)微生物進行著色。該技術(shù)主要應用于傳染性流感及肺炎等,其具有靈敏度較高、特異性強等優(yōu)勢,同時其可從定性及定量兩個方向展開檢測。
2.4 熒光免疫技術(shù)熒光免疫技術(shù)是指將抗原抗體特異與熒光技術(shù)結(jié)合,檢測過程中將熒光素作為特殊標記物,檢測主要通過顯微鏡下對熒光素的觀察來確定。這種技術(shù)具有靈敏度高、操作簡便等特點。另外有研究[16]提出在該技術(shù)上改造出來的快速檢驗紙片法在特殊微生物檢測方面效果良好,靈敏度較高。例如,金黃色葡萄菌,大腸菌等。
2.5 補體結(jié)合反應該反應原理是補體能被任何抗原抗體復合物激活,并且其能將紅細胞和溶血素的復合物結(jié)合。多用于檢測立克次體、螺旋體患者體內(nèi)抗體及病毒分型中。
近些年研究[17-19]表明微生物快速檢查過程中有諸多注意事項,其是影響最終檢測結(jié)果的重要因素,故在檢測過程中需提高重視程度。根據(jù)研究得出以下幾個結(jié)論,培養(yǎng)基的滅菌及使用:配制是需仔細查看是否在有效期內(nèi)并保證其是密封保存,培養(yǎng)基在使用前需經(jīng)過嚴格消毒處理,嚴格管理培養(yǎng)基保存溫度;檢測環(huán)境的維持:大環(huán)境方面需保證檢測室門窗關(guān)閉,避免空氣流動對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。小環(huán)境方面及時對檢查設(shè)備進行清理及滅菌,并在檢測前提前開啟紫外燈;樣本采集及檢測:保證采樣器的無菌性,采集人員在采集樣本前要充分做到手部及身體暴露部位滅菌處理。
微生物培養(yǎng)環(huán)節(jié)需嚴格按照《微生物檢驗規(guī)范》進行,定時觀察培養(yǎng)基情況,若出現(xiàn)異常應及時處理,防止其對后期檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。
隨著近些年傳染病的爆發(fā),微生物檢驗技術(shù)越來越受到人們重視,同時在傳染病大規(guī)模傳播的情況下,各種微生物快速檢測的效率及精準度成了臨床需面對的巨大挑戰(zhàn)。臨床微生物檢驗技術(shù)需充分結(jié)合數(shù)字化、自動化等高新技術(shù),綜合考慮疾病因素及患者情況,為患者選用最有效率的檢測方法。臨床目前的微生物快速檢驗技術(shù)已基本成熟,但尚未形成統(tǒng)一規(guī)范化、統(tǒng)一性檢測方案,同時隨著醫(yī)療技術(shù)進步,各種新型微生物檢驗技術(shù)開始應用于臨床,故后續(xù)研究仍需在提升檢測效率、增強檢測精準度等方面作出深入探討。