鄭楚麗，宋 碩，譚曉瑜，符愛(ài)珍

（廣東醫(yī)科大學(xué)，廣東 湛江 524000）

宮頸癌（cervical cancer）已成為威脅世界女性健康的第4 大惡性腫瘤[1]。近年來(lái)我國(guó)子宮頸癌發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。該病起源于宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN），而人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染是CIN 及宮頸癌的高危因素。自噬是高度保守的生物過(guò)程，通過(guò)降解細(xì)胞長(zhǎng)壽蛋白質(zhì)和細(xì)胞器及其成分以維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的獨(dú)特而基本的機(jī)制[2]。當(dāng)發(fā)生能量限制、氧化應(yīng)激和營(yíng)養(yǎng)不良等細(xì)胞應(yīng)激事件時(shí)，受損或有害的蛋白質(zhì)和細(xì)胞器積聚，并且驅(qū)動(dòng)自噬以維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)[3]。自噬可分為3 種形式：大自噬、小自噬和分子伴侶介導(dǎo)的自噬。與婦科癌癥有關(guān)的自噬的主要途徑涉及PI3K/AKT/mTOR 軸。哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是AKT 的下游效應(yīng)物，是自噬的抑制劑。PI3K/AKT/mTOR 信號(hào)的快速激活和自噬損害均容易介導(dǎo)HPV 感染，從而促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生[2]。大量HPV 病毒被持續(xù)轉(zhuǎn)錄成E6、E7 mRNA 時(shí)，E6、E7 癌蛋白大量表達(dá)[4]，并分別通過(guò)p53 和pRb 信號(hào)傳導(dǎo)途徑導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展。在Tingting C 等[5]研究顯示，在宮頸癌細(xì)胞起始和降解階段，E6/E7 可通過(guò)加速自噬通量來(lái)維持適當(dāng)?shù)幕罨允赡芰?，從而保持了?xì)胞活力。多項(xiàng)研究表明[6，7，13，15，21]，在宮頸癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，自噬相關(guān)蛋白表達(dá)被抑制，自噬下調(diào)誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生。自噬相關(guān)蛋白（autophagy-related protein，Atg）是一類(lèi)自噬組成蛋白，參與細(xì)胞自噬的啟動(dòng)和調(diào)控，在腫瘤中，這些蛋白通常會(huì)發(fā)生消融或突變，從而消除或增強(qiáng)自噬的發(fā)生，具有一定的病理學(xué)和預(yù)后意義。現(xiàn)研究較多集中于Beclin1、LC3、p62 這幾種自噬相關(guān)蛋白，本文章將集中講述這3 種自噬相關(guān)蛋白在宮頸癌中的表達(dá)情況，從而闡述自噬在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 Beclin1

Beclin-1 是一種關(guān)鍵的自噬蛋白，在激活自噬的信號(hào)通路中起重要作用，并且參與自噬體形成的初始步驟[6]。目前眾多研究表明Beclin-1 與宮頸癌相關(guān)[7，8]。Beclin-1 表達(dá)水平在宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中顯著降低，在宮頸癌標(biāo)本中更低，這證實(shí)了HPV介導(dǎo)的宮頸轉(zhuǎn)化過(guò)程中自噬反應(yīng)逐漸減弱，另外，Beclin-1 水平與宮頸癌的細(xì)胞分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)[7]。而Shen MX 等[8]提出了不同結(jié)論，雖然Beclin-1 在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌組織中的表達(dá)水平同樣顯著下降，但不同的是，Beclin-1 在宮頸癌組織中的表達(dá)水平與細(xì)胞分化或淋巴轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)?？偟膩?lái)說(shuō)，Beclin-1 表達(dá)降低可提示宮頸癌變風(fēng)險(xiǎn)，但不能確定其是否能預(yù)示癌變程度。

Beclin-1 可與Bcl-2 抗凋亡蛋白結(jié)合，其復(fù)合物可抑制自噬。研究表明，雙氫青蒿素（DHA）可通過(guò)上調(diào)Bcl-2 磷酸化，使其從Beclin-1 上解離，從而B(niǎo)eclin-1 表達(dá)水平上升誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞自噬，發(fā)揮抗癌作用[9]。Tsai JH 等[10]研究發(fā)現(xiàn)，1-（2-羥基-5-甲基苯基）-3-苯基-1，3-丙二酮（HMDB）通過(guò)調(diào)節(jié)AMP 激活的蛋白激酶（AMPK）和mTOR 信號(hào)傳導(dǎo)途徑，促進(jìn)LC3 和Beclin-1 的表達(dá)，誘導(dǎo)自噬，從而抑制宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)。土貝母苷甲（Tubeimoside I，TBM）是從中藥土貝母中提取出來(lái)的一種抗腫瘤藥物。研究表明[11]，TMB 可以通過(guò)激活A(yù)MPK，使Bcl-2 與Beclin1 解離，啟動(dòng)自噬，發(fā)揮抗腫瘤作用，另外研究中發(fā)現(xiàn)，TBM 可能會(huì)增強(qiáng)順鉑和紫杉醇等化療藥物對(duì)宮頸癌的治療作用。由此可見(jiàn)，不少抗癌藥物通過(guò)上調(diào)Beclin-1 表達(dá)水平發(fā)揮抗癌作用。

2 LC3

LC3 以可溶性（LC3-Ⅰ）和膜結(jié)合形式（LC3-Ⅱ）存在，包括LC3A、LC3B、LC3C 這3 種亞型，負(fù)責(zé)形成自噬體的雙膜的延伸。研究認(rèn)為L(zhǎng)C3Ⅱ/Ⅰ比率是最可靠的自噬生物標(biāo)志物[12]。兩個(gè)自噬途徑中產(chǎn)生的蛋白Atg7 和Agt3 則是LC3Ⅰ向LC3Ⅱ逐漸轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵指標(biāo)。LC3 含量的改變與發(fā)生HR HPV 感染以及出現(xiàn)臨床腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)關(guān)系，即受HPV 感染的宮頸組織中自噬通量減少，且受影響的患者的臨床病理特征更差[7]。Hu YF等[13]采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)80 例宮頸鱗狀細(xì)胞癌、40 例高級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）和40 例正常宮頸組織中LC3 的表達(dá)水平，檢測(cè)出宮頸癌、高級(jí)別CIN 和正常宮頸上皮細(xì)胞分別表達(dá)28.8%、70.0%和75.0%，但在宮頸鱗癌中未觀察到LC3 表達(dá)與臨床病理參數(shù)（包括年齡、FIGO 分期、分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）之間的顯著關(guān)聯(lián)。Leisching G 等[14]研究發(fā)現(xiàn)LC3 在HSIL 和宮頸癌組織中表達(dá)顯著上調(diào)，提示自噬在宮頸癌進(jìn)展中的重要作用，這與Hu YF 等的實(shí)驗(yàn)結(jié)論相反，具體機(jī)制需更多的研究進(jìn)一步證實(shí)。與HPV 陰性的正常子宮頸組織相比，HPV 陽(yáng)性的正常子宮頸組織LC3-Ⅱ/Ⅰ的表達(dá)比率降低，且在HPV 陽(yáng)性的子宮頸癌組織中進(jìn)一步減少，提示HPV 感染可進(jìn)一步抑制細(xì)胞自噬，促進(jìn)腫瘤發(fā)展。

多種抗腫瘤藥物通過(guò)調(diào)節(jié)LC3 表達(dá)水平發(fā)揮抗癌作用。朱芳等[16]研究發(fā)現(xiàn)，在一定濃度范圍內(nèi)，宮頸癌細(xì)胞LC3 表達(dá)水平隨著順鉑藥物濃度的增加而增加。另有研究發(fā)現(xiàn)順鉑通過(guò)上調(diào)自噬小泡的形成，促進(jìn)LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的轉(zhuǎn)化以及增加自噬相關(guān)基因7（Atg7）的表達(dá)水平，從而誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞的自噬過(guò)程，發(fā)揮抗腫瘤作用[17]。Tsai JP 等[18]發(fā)現(xiàn)黃酮類(lèi)葡萄糖苷中的淫羊藿苷可通過(guò)4 個(gè)方面發(fā)揮其抗癌活性，分別是促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的自噬、濃度依賴(lài)性地增強(qiáng)LC3Ⅱ表達(dá)水平、誘導(dǎo)活性氧（ROS）的產(chǎn)生和阻斷mTOR/PI3K/AKT 信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)。此外，Davis MA 等[19]發(fā)現(xiàn)，病毒蛋白酶抑制劑奈非那韋通過(guò)上調(diào)LC3-Ⅱ表達(dá)水平發(fā)揮其抗腫瘤作用。

3 p62

p62 是另一個(gè)在細(xì)胞自噬過(guò)程中重要的基因，p62 通過(guò)結(jié)合KEAP1（Kelch-like ECH-associated protein 1）抑制KEAP1 與氧化應(yīng)激蛋白NRF2（NFE2-related factor 2）結(jié)合，從而引起自噬的發(fā)生[20]。在正常的自噬過(guò)程中，細(xì)胞質(zhì)中p62 蛋白不斷被降解；當(dāng)自噬活性減弱時(shí)，p62 蛋白會(huì)在細(xì)胞質(zhì)中不斷累積。Wang F 等[15]實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)HPV 感染的正常宮頸組織中p62 表達(dá)水平較無(wú)HPV 感染的組織升高，并且在HPV 感染的宮頸癌組織中進(jìn)一步升高。與鄰近的正常組織相比，p62 的表達(dá)通過(guò)子宮頸組織從LSIL 到HSIL 的異常增生轉(zhuǎn)化而逐漸增加[21]。由此可見(jiàn)，p62 的表達(dá)水平與是否有HPV 感染以及病變程度相關(guān)，即自噬抑制程度與HPV 感染及病變程度相關(guān)。

在一定濃度范圍內(nèi)，宮頸癌細(xì)胞P62 表達(dá)水平隨著順鉑藥物濃度的增加而降低，即自噬逐漸增強(qiáng)[16]。由此表明順鉑通過(guò)增強(qiáng)自噬發(fā)揮其抗癌作用。紫杉醇暴露可引起宮頸癌細(xì)胞胞質(zhì)中自噬體的聚集，導(dǎo)致p62 的表達(dá)水平下調(diào)[22]，這表明紫杉醇可誘導(dǎo)自噬，且賦予腫瘤細(xì)胞抗凋亡的保護(hù)作用。Xiang W等[23]發(fā)現(xiàn)，從吉祥草中分離的甾體皂苷RCE-4 是一種潛在的抗宮頸癌藥物。其可通過(guò)上調(diào)p62 表達(dá)水平、損害溶酶體組織蛋白酶的活性并抑制自噬通量，從而發(fā)揮抗宮頸腫瘤細(xì)胞作用。番荔枝（Annona coriacea Mart）是一種具有廣譜生物活性的植物，其作用于宮頸癌細(xì)胞系時(shí)可促進(jìn)p62 的積累和LC3Ⅱ的減少，以及酸性囊泡水平的降低，從而抑制自噬，特別是針對(duì)順鉑敏感細(xì)胞系時(shí)其作用更加明顯，可見(jiàn)番茄枝可作為治療順鉑敏感宮頸癌新型藥物[24]。

4 總結(jié)

目前已經(jīng)證實(shí)細(xì)胞自噬在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中具有重要的作用，但其具體作用機(jī)制仍未完全闡明。Beclin1、LC3、p62 可作為協(xié)助宮頸癌及癌前病變?cè)\斷的手段，也是多種抗腫瘤藥物的作用靶點(diǎn)，由此可見(jiàn)，若對(duì)自噬再更深層次地探討研究，必將有更多地自噬相關(guān)蛋白及相應(yīng)的信號(hào)通路可用于宮頸腫瘤的診斷與治療。