□ 陸榮榮 揚(yáng)州市疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科 毛 炎 揚(yáng)州市衛(wèi)生監(jiān)督所 黃 瑤 徐婭雯 周麗萍 揚(yáng)州市疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科

食品安全問題一直是國(guó)家及人民共同關(guān)注的一個(gè)熱點(diǎn)問題，特別是在現(xiàn)今時(shí)代發(fā)展，人民生活水平逐步提高這一背景下，食品安全引起了極大的重視和關(guān)注，特別是近幾年中出現(xiàn)的各類食品安全問題，使得人們?cè)桨l(fā)注重這方面。為了有效減少食品安全問題，就需對(duì)食品中微生物的含量進(jìn)行檢測(cè)，而對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)自然就需要先進(jìn)的技術(shù)，以保證檢測(cè)結(jié)果真實(shí)、有效。下面就對(duì)快速測(cè)試片在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行闡述。

1 將濾紙作為載體的測(cè)試片

在選擇測(cè)試食品微生物的濾紙時(shí)需嚴(yán)格檢查其質(zhì)量，并保證選用的濾紙無毒、吸附性強(qiáng)、尺寸為4 cm×5 cm。隨后在無菌培養(yǎng)基中添加TTC，并運(yùn)用無菌濾紙進(jìn)行吸附，接著再對(duì)其進(jìn)行干燥處理，在這些步驟完成后就可將其放入聚丙烯材質(zhì)的袋子中保存。在無菌培養(yǎng)基中添加TTC的主要目的是運(yùn)用其氧化還原特性，讓其與氫進(jìn)行反應(yīng)，當(dāng)兩者發(fā)生反應(yīng)后，培養(yǎng)基中能夠看到較為明顯的紅點(diǎn)，通過計(jì)算紅點(diǎn)，即可計(jì)算出細(xì)菌的數(shù)量。當(dāng)然在采取這一方法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)時(shí)需要科學(xué)合理控制TTC的使用，避免影響后續(xù)的檢測(cè)結(jié)果。專業(yè)人員在測(cè)試時(shí)，還需合理控制培養(yǎng)基的溫度，一般會(huì)控制在37 ℃左右，測(cè)試時(shí)間大約為17 h[1]。

2 立足于染色法的大腸菌群測(cè)試片

這一方法需要制作浸液，這就需要對(duì)乳化劑、瓊脂以及TTC等用料進(jìn)行細(xì)致的把控，設(shè)置滅菌溫度115 ℃、浸泡溫度60 ℃、烘干溫度55 ℃，調(diào)整pH范圍為6.8～7.0，培養(yǎng)時(shí)間為17 h。若培養(yǎng)基里出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)，外周黃暈或紙片產(chǎn)生黃色背景，在黃色背景上出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)或片狀黃暈者為陽性。不過需要注意的是，培養(yǎng)液中的選擇性以及生物酶作用中的特異性，都會(huì)直接影響到大腸菌群測(cè)試片的最后測(cè)驗(yàn)結(jié)果。基于此，相關(guān)專業(yè)人員需要嚴(yán)格檢測(cè)TTC和瓊脂粉的用量。

3 熒光法大腸桿菌測(cè)試片檢測(cè)食品微生物

細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生一些代謝酶或產(chǎn)物，可以根據(jù)細(xì)菌的這一特性，建立酶—底物反應(yīng)法。工作人員將即將進(jìn)行檢測(cè)細(xì)菌所需的養(yǎng)料、酶促底物和抑制雜菌的成分固相化在紙片上，然后檢測(cè)大腸菌群與大腸桿菌所產(chǎn)生的有關(guān)酶的活性，進(jìn)而達(dá)成細(xì)菌計(jì)數(shù)這一目的。現(xiàn)有的兩種測(cè)試片能夠?qū)Υ竽c菌群與大腸桿菌進(jìn)行檢測(cè)，這兩種細(xì)菌都需在37℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，然后24 h后使用波長(zhǎng)為365nm的熒光燈進(jìn)行檢測(cè)，得出具體結(jié)果[2]。

4 以Petrifilm為基礎(chǔ)的測(cè)試片

Petrifilm測(cè)試片主要由上下兩層薄膜組建而成，下層薄膜的主要材質(zhì)為聚乙烯，它上面有網(wǎng)格，覆蓋于培養(yǎng)基上，而上層則主要是聚丙烯薄膜。微生物生長(zhǎng)和生化實(shí)驗(yàn)需要的營(yíng)養(yǎng)試劑，通過冷水可溶性凝膠劑附著在上下兩層薄膜上。Petrifilm測(cè)試片在國(guó)際上也得到了廣泛認(rèn)可，我國(guó)也有400多個(gè)實(shí)驗(yàn)室采用這一測(cè)試片檢測(cè)食品微生物，這一測(cè)試片的主要檢測(cè)對(duì)象為：大腸菌群、金黃色葡萄球菌。這一檢測(cè)方法效率較高，檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性也較高，值得被信賴。

5 菌落總數(shù)測(cè)試片的使用

將1 mL樣品滴入紙片中央，然后將原本翻開的膠片進(jìn)行回蓋操作，從而保證樣品的均勻性。為了保證凝膠的固化作用，需要靜置1 min，這一測(cè)試方法也需要在37 ℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其培養(yǎng)時(shí)間大約為48 h[3]。

6 測(cè)試霉菌和酵母菌

檢測(cè)霉菌及酵母菌在食品中的含量主要運(yùn)用到了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和菌落生長(zhǎng)指示劑等。對(duì)這類細(xì)菌的培養(yǎng)溫度需要保持在21～25 ℃，時(shí)間為3～5 d。酵母菌菌落主要為小型菌落，且有著明顯的邊緣，菌落為灰白色到藍(lán)綠色，也會(huì)呈現(xiàn)出粉色，顏色較為一致，中心也沒有暗色表現(xiàn)。霉菌菌落較大，質(zhì)地也較為疏松，外觀表現(xiàn)主要為干燥，不透明，還會(huì)呈現(xiàn)出一種或緊或松的狀態(tài)，顏色也較為雜亂，同時(shí)還具有扁平性特點(diǎn)。

7 結(jié)語

檢測(cè)食品微生物時(shí)使用的快速測(cè)試片法，其操作過程較為簡(jiǎn)單，而且在消毒保存與運(yùn)輸攜帶方面也較為便利。快速測(cè)試片也較為經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，對(duì)環(huán)境也不會(huì)造成污染，這使得食品微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)其極為青睞，不僅能節(jié)約成本，也符合綠色化發(fā)展需求。