仇煒 王思旭 田野 蘇明

移植后感染可嚴(yán)重影響移植腎功能，并使受者生活質(zhì)量顯著下降[1]。BK病毒(BKV)屬于乳多空病毒家族成員[2]，在強(qiáng)免疫抑制下可被重新激活[3]。BKV感染與泌尿系統(tǒng)功能障礙密切相關(guān)[2]，BKV重新激活主要表現(xiàn)為BK病毒尿癥或病毒血癥，可通過實(shí)驗(yàn)室核酸檢測(cè)(NAT)診斷[4]。雖然BKV感染在腎移植中有重要作用，但該病毒的宿主細(xì)胞仍有待進(jìn)一步證實(shí)。有報(bào)道發(fā)現(xiàn)，腎內(nèi)多種細(xì)胞均可被BKV感染，如腎小管上皮細(xì)胞和腎小球細(xì)胞等[5-7]。有研究發(fā)現(xiàn)，BKV能感染微血管內(nèi)皮細(xì)胞，從而激活I(lǐng)RF3和STAT1以應(yīng)對(duì)感染[8]。內(nèi)皮細(xì)胞是腎臟濾過屏障的關(guān)鍵組分，內(nèi)皮細(xì)胞功能不全可引起血流動(dòng)力學(xué)和濾過異常[9,10]。此外，內(nèi)皮損傷還能激活凝血系統(tǒng)，導(dǎo)致局部血栓形成，引起移植腎功能障礙[11]。因此，本研究采用彩色多普勒超聲(color doppler ultrasound，CDU)對(duì)BKV感染者的阻力指數(shù)(resistanceindex，RI)進(jìn)行分析，同時(shí)分析BKV感染與凝血項(xiàng)目的關(guān)系，旨在明確BKV感染對(duì)移植腎血流動(dòng)力學(xué)和凝血功能的影響，為該病的臨床診斷及治療提供新線索。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇北京友誼醫(yī)院2015年3月1日至2019年5月31日接受腎移植手術(shù)的患者，均排除移植排異、急性感染和炎癥、嚴(yán)重器官衰竭、癌癥、移植物功能破壞、血栓形成和出血性疾病的患者?；颊呔M(jìn)行BKV載量和CDU檢測(cè)。共183例腎移植受者，其中男135例，女48例；平均年齡(42.4±11.8)歲。在所有病例中有56例患者進(jìn)行了對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)凝血常規(guī)檢測(cè)。采用1～5 MHz掃描探針多普勒超聲系統(tǒng)(飛利浦IU22)，測(cè)定移植物峰值收縮速度(PSV)、舒張末期速度(EDV)并計(jì)算阻力指數(shù)(RI)。計(jì)算小葉間動(dòng)脈和小葉間動(dòng)脈RIs：RI=(PSV-EDV)/PSV。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢查 使用BKV實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒(鑫諾美迪，中國(guó)北京)對(duì)尿液和血漿樣品BKV進(jìn)行定量。尿或血漿BKV定量高于2×103拷貝/ml的患者診斷為BKV感染陽性，以BKV定量高于2×107拷貝/ml為強(qiáng)陽性。相關(guān)研究中，BKV載量進(jìn)行以10為底的對(duì)數(shù)變換，以BKV(log)表示。采用Labospet008自動(dòng)分析儀(日本東京日立)測(cè)定血清肌酐(Cr)。采用Sysmex CS-5100止血系統(tǒng)檢測(cè)凝血指標(biāo)，包括凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶原活性(PTA)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、D-二聚體、纖維蛋白原(FBG)和纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)。

2 結(jié)果

2.1 BKV感染與RI的關(guān)系 根據(jù)BK病毒尿或病毒血癥分組，非BKV感染115例，BKV感染者68例，其中包括病毒血癥者16例。3組患者小葉間動(dòng)脈、小葉間動(dòng)脈RI及血清Cr均無顯著變化。依據(jù)BKV定量結(jié)果，進(jìn)一步將患者分為尿BKV強(qiáng)陽性和弱陽性進(jìn)行分析，顯示葉間動(dòng)脈或小葉間動(dòng)脈RI均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。采用RI≥0.7為界值，將所有患者分為高RI(hRI)和正常RI(nRI)。BKV感染(病毒尿或病毒血癥)不增加hRI人數(shù)，但BKV感染者與未感染者相比，小葉間動(dòng)脈hRI率更低。然而，尿BKV載量(log)與BKV感染者RI之間無相關(guān)性。見表1～3，圖1。

圖1 尿BKV載量與移植腎RI相關(guān)性分析；A 葉間動(dòng)脈RI；B 小葉間動(dòng)脈RI

表1 BKV感染與移植腎RI的關(guān)系

2.2 BKV感染與凝血指標(biāo)的關(guān)系 共納入56例患者，其中男45例，女11例；年齡(43.7±12.0)歲。根據(jù)BKV感染情況，將患者分為BKV陽性(n=24)和BKV陰性(n=32)組。各項(xiàng)指標(biāo)在2組PTA、APTT、

表2 尿BKV載量與移植腎RI的關(guān)系

表3 移植腎動(dòng)脈RI升高率與BKV感染的關(guān)系 例(%)

D-二聚體、FBG和FDP均無顯著性差異(P>0.05)。尿BKV定量(log)與上述凝血指數(shù)之間也無顯著相關(guān)性(P>0.05)。BKV感染不能引起腎移植受者凝血系統(tǒng)紊亂。見圖2，表4。

圖2 尿BKV載量與凝血指標(biāo)相關(guān)性分析；尿BKV載量 (log)與 PT (a)、 PTA (b)、 APTT (c)、D-Dimer (d)、FBG (e)以及FDP (f)之間的相關(guān)性

表4 BKV感染與凝血指標(biāo)相關(guān)性分析

3 討論

BKV是移植后感染中最常見的病原體之一，與移植腎功能障礙和移植腎丟失密切相關(guān)[12]。本研究發(fā)現(xiàn)BKV感染可能與移植腎RI或凝血指標(biāo)無關(guān)。由此表明，BKV感染可能不影響移植腎的血流動(dòng)力學(xué)改變或系統(tǒng)性凝血障礙。而在BKV感染者中，腎小葉間RI升高率卻有下降趨勢(shì)，目前尚不明確其原因。

BKV可引起B(yǎng)KV相關(guān)性腎病和出血性膀胱炎，該病毒也可感染多種細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)，BKV可在腎小球血管復(fù)制[7]。與腎近端小管上皮細(xì)胞相比，內(nèi)皮細(xì)胞在BKV感染時(shí)能夠產(chǎn)生IFNβ和CXCL10，表明內(nèi)皮細(xì)胞可能在BKV感染后參與了防御反應(yīng)[8]。在內(nèi)皮損傷過程中，凝血系統(tǒng)可被激活[13]。研究發(fā)現(xiàn)部分病毒感染如SARS-CoV-2，可引起凝血功能障礙[14]。本研究發(fā)現(xiàn)BKV感染不足以引起腎移植患者系統(tǒng)性凝血功能障礙。然而，目前還不能明確BKV對(duì)移植腎內(nèi)皮損傷或局部微血栓形成的影響。

本研究中，我們應(yīng)用CDU探討移植腎血流動(dòng)力學(xué)變化。CDU廣泛用于監(jiān)測(cè)移植腎的血流動(dòng)力學(xué)變化[15]。根據(jù)CDU參數(shù)可以計(jì)算出反映移植腎血流動(dòng)力學(xué)的RI[16]，RI是反映移植腎血流動(dòng)力學(xué)的理想指標(biāo)[17]。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)BKV感染不增加葉間或小葉間RI值。然而，根據(jù)本研究結(jié)果，BK病毒尿癥患者表現(xiàn)出較低的小葉間RI升高率。目前還無法解釋這一現(xiàn)象，需要進(jìn)一步研究證實(shí)。