張彩鳳

（浙江捷島檢測(cè)科技有限公司，杭州 310030）

有機(jī)錫是錫和碳元素直接復(fù)合所形成的金屬有機(jī)化合物，廣泛用作聚氯乙烯穩(wěn)定劑、防污涂料、殺蟲(chóng)劑、殺菌劑以及合成聚氨酯和硅酮等的穩(wěn)定劑。飲用水中有機(jī)錫污染主要來(lái)源于輸水系統(tǒng)中PVC管材和水源污染［1］。人們飲用被有機(jī)錫污染的水，有機(jī)錫化合物會(huì)在人體內(nèi)富集，不同形態(tài)的有機(jī)錫會(huì)對(duì)人體的內(nèi)臟器官或神經(jīng)系統(tǒng)造成不同程度的損害，其中三環(huán)錫（CYT）和三唑錫(AZT)屬于金屬類(lèi)農(nóng)藥，具有潛在的毒性，而三環(huán)錫還具有動(dòng)物致畸作用［2］，因此對(duì)水中有機(jī)錫的監(jiān)測(cè)十分重要。目前有機(jī)錫的檢測(cè)方法主要有液相色譜法［3］、氣相色譜法［4］、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法［5］、GC-ICP-MS 法［6］、HPLC-ICP-MS 法［7］、液相色譜-原子熒光光譜法［8］、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法［9］等。液相色譜法檢測(cè)限高，難以滿(mǎn)足痕量有機(jī)錫的檢測(cè)要求。氣相色譜法及其聯(lián)用技術(shù)，樣品需經(jīng)四乙基硼酸鈉衍生、正己烷萃取等，操作復(fù)雜且費(fèi)時(shí)。液相色譜與ICPMS 聯(lián)用技術(shù)，需配備外加氣控制單元、有機(jī)排廢管的霧化器、鉑采樣錐、鉑截取錐及有機(jī)專(zhuān)用矩管等。液相色譜與原子熒光光譜聯(lián)用技術(shù)，需使用鹽酸、硼氫化鉀等強(qiáng)腐蝕性、高毒性的化學(xué)試劑。近年來(lái)有關(guān)甲基錫、丁基錫、苯基錫、辛基錫的測(cè)定方法已有較多報(bào)道［10-20］，但有關(guān)三環(huán)錫、三唑錫的測(cè)定方法報(bào)道則較少。何智宇等［21］采用HPLC-MS／MS法對(duì)常量三唑錫類(lèi)進(jìn)行了檢測(cè)；朱萌萌等［22］以乙基溴化鎂、四乙基硼酸鈉為衍生試劑分別對(duì)三環(huán)錫、三唑錫進(jìn)行衍生，在此基礎(chǔ)上建立了氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水果、蔬菜中三唑錫、三環(huán)錫和苯丁錫殘留量的方法。筆者對(duì)樣品處理方法和儀器工作條件進(jìn)行了優(yōu)化，建立了同時(shí)測(cè)定飲用水中痕量三環(huán)錫（CYT）、三唑錫(AZT)6 種有機(jī)錫的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。該方法樣品處理簡(jiǎn)單，分析速度快，靈敏度高，適用于水質(zhì)中有機(jī)錫的日常檢測(cè)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

超高效液相色譜儀：Acquity UHPLC 型，配有四元梯度泵、樣品管理器、柱溫箱，沃特世科技（上海）有限公司。

串聯(lián)質(zhì)譜：XEVO TQ-S 型，沃特世科技（上海）有限公司。

化學(xué)工作站：Masslynx 型，沃特世科技（上海）有限公司。

電子分析天平：FA1004 型，感量為0.1 mg，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司。

移 液 槍?zhuān)?00～1 000 μL、20～200 μL、5～50 μL，賽默飛科技（中國(guó)）有限公司。

微孔濾膜：0.22 μm ，島津GL（上海）商貿(mào)有限公司。

二丁基二氯化錫(DBT)、二苯基二氯化錫(DPT)、三丁基氯化錫(TBT)、三苯基氯化錫（TPT）、三唑錫(AZT)標(biāo)準(zhǔn)品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為99.90%、97.90%、99.90%、97.10%、98.50%，壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。

三環(huán)錫（CYT）標(biāo)準(zhǔn)品：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.00%，德國(guó)Dr.Ehrenstorfer 公司。

甲醇：HPLC 級(jí)，德國(guó)默克公司。

甲酸：分析純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.0%，阿拉丁試劑（上海）有限公司。

甲酸銨：分析純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.0%，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

超純水系統(tǒng)：Milli-Q Element A10 型，美國(guó)默克公司。

氮?dú)獍l(fā)生器：GENIUS NM32LA 型，英國(guó)peak公司。

脫溶劑氣、錐孔氣、霧化氣：氮?dú)?，體積分?jǐn)?shù)不小于99.5%，由GENIUS NM32LA 型氮?dú)獍l(fā)生器制備。

碰撞氣體：高純氬氣，體積分?jǐn)?shù)為99.999%，杭州今工特種氣體有限公司。

待測(cè)樣品：杭州市某園區(qū)自來(lái)水。

實(shí)驗(yàn)用水為超純水，電阻率為18.2 MΩ·cm，由Milli-Q Element A10 型超純水系統(tǒng)制備。

1.2 溶液配制

6 種有機(jī)錫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：1 000 μg／mL，準(zhǔn)確稱(chēng)取64.5 mg DPT、56.5 mg TPT、65.0 mg DBT、56.0 mg TBT、51.0 mg CZT、51.0 mg AZT（精 確 至0.1 mg）有機(jī)錫標(biāo)準(zhǔn)品，分別置于6 只50 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并定容至標(biāo)線(xiàn)，搖勻，于4℃避光保存，備用。

6 種有機(jī)錫混合標(biāo)準(zhǔn)溶液Ⅰ：100 μg／mL，分別精密移取6 種有機(jī)錫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液各1.0 mL 于同一只10 mL 容量瓶中，用甲醇定容至標(biāo)線(xiàn)，搖勻，備用。

6 種有機(jī)錫混合標(biāo)準(zhǔn)溶液Ⅱ：1.0 μg／mL，精密移取6 種有機(jī)錫混合標(biāo)準(zhǔn)溶液Ⅰ100 μL，置于10 mL 容量瓶中，用甲醇定容至標(biāo)線(xiàn)，搖勻，備用。

6 種有機(jī)錫系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：精密移取6 種有機(jī)錫混合標(biāo)準(zhǔn)溶液Ⅱ1.0 mL，置于10 mL 容量瓶中，用甲醇-0.1%甲酸溶液（體積比為1∶1）定容至標(biāo)線(xiàn)，配制成6 種有機(jī)錫的質(zhì)量濃度均為100.0 ng／mL 混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。然后用甲醇-0.1 %甲酸溶液（體積比為1∶1）逐級(jí)稀釋?zhuān)玫? 種有機(jī)錫的質(zhì)量濃度均分別為100.0、50.0、25.0、10.0、5.0、2.5、1.0 ng／mL 的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.3 樣品采集與處理

用干凈的500 mL 棕色玻璃溶劑瓶，分別采集杭州市不同區(qū)域的三家自來(lái)水公司的自來(lái)水樣品各500 mL，在室溫下恒溫，精密移取10 mL 水樣，加入10.2 μL 甲酸，使得水樣中甲酸的體積分?jǐn)?shù)為0.1%，移取1.0 mL 樣品，再加入1.0 mL 甲醇，搖勻，經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后，待測(cè)。

1.4 儀器工作條件

1.4.1 液相色譜

色譜柱：Hypersil GOLD 柱[2.1 mm×50 mm ，5 μm，賽默飛科技（中國(guó)）有限公司]；流動(dòng)相：A 為甲醇-0.1 %甲酸溶液，B 為0.1%甲酸-5 mmol／L甲酸銨緩沖鹽溶液；洗脫方式：梯度洗脫；洗脫程序：初始A 為60%，B 為40%；0.00～2.00 min，A由60%逐漸增加至80%，B 由40%逐漸減少至20%，2.00～3.00 min，A 由80%逐漸增加至85%，B由20%逐漸減少至15%，保持1min，4.01 min，A 由85%減少至60%，B 由15 %增加至40%，保持2.99 min；流量：0.25 mL／min；進(jìn)樣體積：5 μL。

1.4.2 質(zhì)譜

離子源：電噴霧離子源(ESI)，正離子掃描模式；檢測(cè)模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；毛細(xì)管電壓：3 500 V；離子源溫度：150 ℃；脫溶劑：氮?dú)猓瑴囟葹?50℃，流量為11 L／min；錐孔氣：氮?dú)?，流量?.5 L／min；碰撞氣：氬氣，流量為0.11 mL／min；霧化氣：氮?dú)?，壓力?.7 MPa。6 種有機(jī)錫的質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表1。

表1 6 種有機(jī)錫質(zhì)譜參數(shù)

2 結(jié)果與討論

2.1 緩沖鹽溶液選擇

以6 種有機(jī)錫的質(zhì)量濃度均為10.0 ng／mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)作溶液為待測(cè)樣品，考察緩沖鹽溶液分別為甲酸溶液、甲酸-甲酸銨溶液、乙酸-乙酸銨溶液時(shí)對(duì)6種有機(jī)錫分離效果的影響。結(jié)果表明，以0.1%甲酸溶液為緩沖鹽溶液時(shí)，二苯基二氯化錫無(wú)響應(yīng)；當(dāng)甲酸的體積分?jǐn)?shù)增至0.5%時(shí)，6 種有機(jī)錫的色譜峰響應(yīng)值均無(wú)明顯改變。當(dāng)在0.1%甲酸溶液中加入5 mmoL／L 甲酸銨溶液時(shí)，基線(xiàn)波動(dòng)較小，6 種有機(jī)錫的色譜峰形對(duì)稱(chēng)、分離效果較好；當(dāng)甲酸銨的濃度提高至10 mmoL／L 時(shí)，分離效果無(wú)明顯改善，基線(xiàn)波動(dòng)增大；以0.1%乙酸-5 mmoL／L 乙酸銨溶液為緩沖鹽溶液時(shí)，基線(xiàn)波動(dòng)大，保留減弱，6種有機(jī)錫的色譜峰成駝峰狀，幾乎同時(shí)流出。綜合考慮選擇0.1%甲酸-5 mmoL／L 甲酸銨溶液為緩沖鹽溶液。

2.2 梯度洗脫程序選擇

以6 種有機(jī)錫的質(zhì)量濃度均為10.0 ng／mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液為待測(cè)樣品，選擇0.1%甲酸-5 mmoL／L甲酸銨溶液為緩沖鹽溶液，考察緩沖鹽溶液初始體積分?jǐn)?shù)分別為20%、40%、60%時(shí)6 種有機(jī)錫的分離效果。結(jié)果表明，當(dāng)緩沖鹽溶液初始體積分?jǐn)?shù)為60%時(shí)，各組分保留增強(qiáng)，響應(yīng)值減小，三環(huán)錫和三唑錫保留時(shí)間為7 min 左右；當(dāng)緩沖鹽溶液初始體積分?jǐn)?shù)為40%時(shí)，響應(yīng)值增加，三環(huán)錫和三唑錫保留時(shí)間為4 min 左右，6 種有機(jī)錫的分離度均大于1.5；當(dāng)緩沖鹽溶液初始體積分?jǐn)?shù)為20%時(shí)，保留減弱，6 種有機(jī)錫的保留時(shí)間均小于3 min，分離度小于1.5，因此選擇緩沖鹽溶液初始體積分?jǐn)?shù)為40%。

在緩沖鹽溶液初始體積分?jǐn)?shù)為40%時(shí)，進(jìn)一步考察洗脫程序?qū)Ψ治鼋Y(jié)果的影響。在0.10 min 內(nèi)，緩沖鹽溶液體積分?jǐn)?shù)由40%降到5%的突變式洗脫程序，基線(xiàn)波動(dòng)較大；在4.00 min 內(nèi)緩沖鹽溶液體積分?jǐn)?shù)由40%降至15%時(shí)，基線(xiàn)波動(dòng)小，而由15%降至5%時(shí)，基線(xiàn)波動(dòng)大，干擾增加，因此選擇緩沖鹽溶液終止體積分?jǐn)?shù)為15%。在一階漸變式洗脫程序基礎(chǔ)上，分別考察在1.00、2.00、3.00 min 內(nèi)緩沖鹽溶液體積分?jǐn)?shù)由40%降至30%、20%時(shí)，對(duì)各峰分離度的影響，結(jié)果表明，在2.00 min 內(nèi)，緩沖鹽溶液體積分?jǐn)?shù)由40%降至20%時(shí)，各峰的分離度均大于1.5。洗脫程序優(yōu)化結(jié)果見(jiàn)1.4.1。

2.3 流量選擇

以6 種有機(jī)錫的質(zhì)量濃度均為10.0 ng／mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液為待測(cè)樣品，考察流量分別為0.30、0.25、0.20 mL／min 時(shí)對(duì)分析結(jié)果的影響。結(jié)果表明，當(dāng)流量為0.30 mL／min 時(shí)，柱壓升高，基線(xiàn)波動(dòng)大，干擾增加；當(dāng)流量為0.25 mL／min 時(shí)，各組分受基線(xiàn)波動(dòng)干擾??；當(dāng)流量為0.20 mL／min 時(shí)，三環(huán)錫和三唑錫在基線(xiàn)干擾最大的位置出峰，影響組分的定量，因此選擇流量為0.25 mL／min。

2.4 質(zhì)譜條件選擇

以6 種有機(jī)錫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液為待測(cè)樣品，分別對(duì)錐孔電壓、碰撞電壓等質(zhì)譜參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，使6 種有機(jī)錫均能夠獲得更高的響應(yīng)值，優(yōu)化結(jié)果見(jiàn)1.4.2。

2.5 線(xiàn)性方程與檢出限

在1.4 儀器工作條件下，分別對(duì)1.2 中的6 種有機(jī)錫系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行測(cè)定，以各有機(jī)錫的質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)，以定量離子的豐度（y）為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸，計(jì)算線(xiàn)性方程和相關(guān)系數(shù)。以3 倍信噪比（S／N）對(duì)應(yīng)的有機(jī)錫的質(zhì)量濃度作為方法檢出限。6 種有機(jī)錫的線(xiàn)性范圍、線(xiàn)性方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限見(jiàn)表2。

表2 6 種有機(jī)錫的線(xiàn)性范圍、線(xiàn)性方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限

2.6 加標(biāo)回收與精密度試驗(yàn)

選取自來(lái)水樣品，加入質(zhì)量濃度分別為2.0、10.0、50.0 ng／mL 的6 種有機(jī)錫混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.3 樣品處理方法，每個(gè)加標(biāo)濃度點(diǎn)平行制備6 份樣品溶液，在1.4 儀器工作條件下分別進(jìn)行測(cè)定，并計(jì)算加標(biāo)回收率和測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見(jiàn)表3。由表3 可知，樣品在低、中、高3 個(gè)加標(biāo)濃度水平時(shí)的平均回收率為83.0 %～121.4%之間，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.00%～7.74%，表明該方法具有較高的準(zhǔn)確度和精密度。6 種有機(jī)錫加標(biāo)樣品色圖譜如圖1 所示。

圖1 6 種有機(jī)錫加標(biāo)樣品色圖譜

表3 加標(biāo)回收與精密度試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)語(yǔ)

建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定飲用水中三環(huán)錫、三唑錫等6 種有機(jī)錫的檢測(cè)方法，該方法不需要經(jīng)過(guò)繁瑣的衍生、萃取處理等過(guò)程，簡(jiǎn)化了樣品處理步驟，靈敏度高，可用于飲用水中多種有機(jī)錫化合物的同時(shí)測(cè)定。