蔚利納

(鄭州市第一人民醫(yī)院 干細(xì)胞中心，河南 鄭州 450000)

重度燒傷屬于臨床常見(jiàn)創(chuàng)傷性疾病，該病不僅會(huì)干擾機(jī)體內(nèi)環(huán)境運(yùn)作，還會(huì)導(dǎo)致機(jī)體繼發(fā)一系列病理變化，表現(xiàn)為炎性因子水平異常升高、免疫功能減退；隨著體外免疫屏障功能的持續(xù)減退，重度燒傷患者體內(nèi)免疫因子或受到過(guò)度激活進(jìn)而形成免疫過(guò)激或免疫抑制，同時(shí)并發(fā)應(yīng)激反應(yīng)、加劇病菌清除機(jī)制紊亂情況，導(dǎo)致炎性物質(zhì)堆積[1]。由此可見(jiàn)，同時(shí)對(duì)以上兩個(gè)方面的波動(dòng)情況進(jìn)行分析有助于形成燒傷部位病情發(fā)展動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果，為臨床重度燒傷診治提供依據(jù)。關(guān)于監(jiān)測(cè)重度燒傷肌膚病變部位炎性因子水平是否能夠反映免疫功能減退情況，而免疫功能減退是否推動(dòng)機(jī)體炎癥介質(zhì)增殖，本研究就重度燒傷患者炎性因子與其T淋巴細(xì)胞水平的相關(guān)性進(jìn)行研究后，得出以下結(jié)論，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2020年1月至2021年1月在鄭州市第一人民醫(yī)院進(jìn)行治療的43例重度燒傷患者作為研究對(duì)象納入觀察組，同期選取43例到院體檢的健康者納入對(duì)照組。43例重度燒傷患者中，男24例，女19例；年齡為23～64歲，平均(46.71±12.63)歲；燒傷面積：20例燒傷面積占體表總面積的30%～45%，15例＞45%，8例為11%～20%Ⅲ度燒傷。43例健康者中，男26例，女17例；年齡為22～64歲，平均(47.84±13.20)歲；體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為19～23 kg/m2，平均(21.24±1.03) kg/m2。兩組性別、年齡構(gòu)成比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，86例入組對(duì)象及家屬均已簽署知情同意書(shū)。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)入組健康者B超、放射科檢查、血尿常規(guī)檢測(cè)結(jié)果均正常；(2)重度燒傷患者符合《中國(guó)燒傷專(zhuān)科手術(shù)分級(jí)評(píng)估方法專(zhuān)家共識(shí)(2019版)》[2]中重度燒傷診斷標(biāo)準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并免疫性疾病、慢性皮膚炎癥、肝腎綜合征、內(nèi)分泌系統(tǒng)功能障礙者。

1.3 檢測(cè)儀器及方法

1.3.1 檢測(cè)儀器

T淋巴細(xì)胞亞群水平和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平檢測(cè)采用美國(guó)BD公司所生產(chǎn)的FACSCanto II流式細(xì)胞儀；C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)所用熒光免疫定量分析儀由基蛋生物科技股份有限公司生產(chǎn)，型號(hào)為Getein1600。

1.3.2 檢測(cè)方法

受測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群包括自然殺傷細(xì)胞(NK)以及白細(xì)胞分化抗原CD4+、CD8+，采用單克隆抗體分析法進(jìn)行檢測(cè)，取100 μL血細(xì)胞抗凝混懸液置入檢測(cè)試管，后加入熒光素標(biāo)記單抗，震蕩混勻靜置20 min；接著加入細(xì)胞裂解液，離心吸取上清，加入400 μLPBS洗滌；后重懸于700 μLPBS洗滌液中。CRP及TNF-α采用免疫熒光法進(jìn)行檢測(cè)，采用抗凝試管收集250 g外周血液樣本混合實(shí)驗(yàn)緩沖液進(jìn)行稀釋、避光震蕩捕獲微球抗體，后于室溫環(huán)境下離心5min，使用移液槍吸取125 μL上層清液；接著往每管內(nèi)加入200 μL洗滌緩沖液，利用渦旋將微球重懸30 s，離心5 min后吸取200 μL血漿上層清液，盡量吸棄液體；最后根據(jù)流式細(xì)胞儀樣本檢測(cè)需求，于每管內(nèi)加入150～300 μL洗滌緩沖液，通過(guò)渦旋重懸微球抗體。于60 min內(nèi)上各指標(biāo)對(duì)應(yīng)儀器或采用對(duì)應(yīng)試劑進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 觀察指標(biāo)

比較對(duì)照組與觀察組的CRP、TNF-α以及NK、CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞水平，同時(shí)對(duì)重度燒傷患者CRP、TNF水平與NK、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞水平的相關(guān)性進(jìn)行分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)此次研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s表示，進(jìn)行t、r檢驗(yàn)，若檢驗(yàn)結(jié)果為P＜0.05則差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組炎性因子、T淋巴細(xì)胞亞群水平比較

觀察組CRP、TNF-α水平均高于對(duì)照組，NK、CD4+水平低于對(duì)照組，CD8+水平與對(duì)照組相比較高(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組炎性因子、T淋巴細(xì)胞亞群水平比較(±s )

表1 兩組炎性因子、T淋巴細(xì)胞亞群水平比較(±s )

組別 例數(shù) CRP/(mg·L-1) TNF-α/(ng·L-1) NK/% CD4+/(個(gè)/μL) CD8+/(個(gè)/μL)觀察組 43 38.25±5.13 99.58±21.46 5.08±1.52 356.30±36.57 1 526.72±417.84對(duì)照組 43 4.52±1.30 33.26±12.86 12.93±4.10 531.68±38.64 1 070.11±361.26 t 12.990 6.042 8.296 9.139 2.108 P＜0.001 0.008 ＜0.001 ＜0.001 0.042

2.2 重度燒傷患者炎性因子、T淋巴細(xì)胞亞群水平相關(guān)性分析

觀察組43例重度燒傷患者CER、TNF水平與NK細(xì)胞、CD4+均呈負(fù)相關(guān)，與CD8+細(xì)胞呈正相關(guān)(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 重度燒傷患者炎性因子、T淋巴細(xì)胞亞群水平相關(guān)性分析(±s )

表2 重度燒傷患者炎性因子、T淋巴細(xì)胞亞群水平相關(guān)性分析(±s )

炎性因子 NK/% CD4+/(個(gè)/μL) CD8+/(個(gè)/μL)r P r P r P CRP -0.449 0.016 -0.423 0.019 0.375 0.025 TNF -0.315 0.030 -0.377 0.024 0.405 0.019

3 討 論

重度燒傷引發(fā)炎性病變的病理機(jī)制被認(rèn)為與機(jī)體免疫力低下、炎性因子所致神經(jīng)內(nèi)分泌反應(yīng)、燒傷創(chuàng)面變形壞死組織為細(xì)菌提供良好培養(yǎng)基等因素有關(guān)；基于此，準(zhǔn)確評(píng)估重度燒傷患者炎性反應(yīng)程度，不僅是臨床感染診斷、治療效率提升的關(guān)鍵措施，也是有效改善患者預(yù)后的重要參考依據(jù)[3-4]。考慮到重度燒傷所引起的病理變化在發(fā)病機(jī)制上呈復(fù)雜性特征，對(duì)各項(xiàng)機(jī)制的相關(guān)性進(jìn)行分析，可提高臨床病理診斷分析的系統(tǒng)性及科學(xué)性。

本研究中，對(duì)健康者以及重度燒傷患者的炎性因子及T淋巴細(xì)胞水平進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，重度燒傷患者炎性因子、T淋巴細(xì)胞水平與正常人群差異較顯著，提示重度燒傷患者局部肌膚黏膜、器官病變會(huì)誘發(fā)不同程度的炎性反應(yīng)，同時(shí)破壞機(jī)體正常免疫屏障。有學(xué)者研究指出[5]，與一般輕度燒傷相比，重度燒傷患者皮損程度較嚴(yán)重，其局部黏膜屏障出現(xiàn)應(yīng)激性損傷、微生物移位的可能性較大；若此類(lèi)病變持續(xù)發(fā)展未得以控制，則易激活各類(lèi)炎性介質(zhì)，并在多種放大效應(yīng)引導(dǎo)下引發(fā)多器官連鎖應(yīng)激反應(yīng)。除了炎癥反應(yīng)以外，免疫調(diào)節(jié)失常也是機(jī)體遭遇各類(lèi)創(chuàng)傷、感染影響后出現(xiàn)的典型癥狀。T細(xì)胞、NK均參與到細(xì)胞免疫應(yīng)答過(guò)程中，其中活化后的NK細(xì)胞與免疫應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮釋放、分泌趨化因子的作用，T細(xì)胞亞群于機(jī)體出現(xiàn)創(chuàng)傷、失血性休克等疾病且并發(fā)免疫抑制時(shí)表現(xiàn)出較低的增殖活性；重度燒傷后，體表肌膚、皮下組織受損破潰，相應(yīng)區(qū)域的免疫屏障自然難以保持完整性[6]。

有關(guān)研究指出[7]，促炎—抗炎動(dòng)態(tài)調(diào)控機(jī)制失衡在免疫功能減弱過(guò)程中發(fā)揮重要推動(dòng)作用，而免疫抑制會(huì)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的生成。關(guān)于以上說(shuō)法中提到的炎癥反應(yīng)與免疫功能之間的相互作用，本研究對(duì)重度燒傷患者炎性因子及其T淋巴細(xì)胞水平相關(guān)性進(jìn)行分析后得出，其炎性因子與T淋巴細(xì)胞水平存在正相關(guān)或負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示重度燒傷患者發(fā)生炎性病變的同時(shí)往往伴隨著免疫功能減退。重度燒傷會(huì)刺激外源性、內(nèi)源性病原體相關(guān)模式分子大量釋放，同時(shí)激活自體免疫防御機(jī)制啟動(dòng)先天免疫反應(yīng)、誘導(dǎo)免疫細(xì)胞分泌趨化因子抵御炎癥介質(zhì)增殖；然而，T淋巴細(xì)胞所介導(dǎo)的獲得性免疫反應(yīng)主要通過(guò)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能來(lái)完成抗菌職能，而燒傷合并感染者巨噬細(xì)胞功能正處于抑制狀態(tài)，此情況或引發(fā)巨噬細(xì)胞代償性分泌大量炎性因子以維持促炎—抗炎機(jī)制平衡[8]。在巨噬細(xì)胞職能減退、代償性釋放炎性因子的影響下，T淋巴細(xì)胞活化受阻、CD4+與CD8+的動(dòng)態(tài)平衡被打破，機(jī)體抗炎能力持續(xù)下降；以上免疫調(diào)節(jié)機(jī)制失衡因素綜合作用會(huì)加劇炎性組織的積累，構(gòu)成惡性循環(huán)。

綜上所述，重度燒傷患者炎性因子與其T淋巴細(xì)胞水平存在顯著相關(guān)性。