董 博， 譚蘭蘭， 胡駿豪， 牛 歡， 周 騏， 武曉靜△

（1深圳大學(xué)總醫(yī)院心血管內(nèi)科，廣東深圳 518055；2重慶醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科，重慶 400010）

心力衰竭（heart failure，HF）主要由心臟左心系統(tǒng)疾病引起，是高血壓、冠心病和心臟瓣膜病等多種心血管疾病發(fā)展的結(jié)局。臨床上約60%～70%左心功能不全患者會(huì)出現(xiàn)肺動(dòng)脈高壓（pulmonary hypertension，PH），稱為心力衰竭相關(guān)肺動(dòng)脈高壓（HFPH）［1-2］。已有報(bào)道心力衰竭進(jìn)展過(guò)程中伴隨代謝過(guò)程的改變［3-4］，改善心肌代謝常常能改善心衰患者的臨床表現(xiàn)和預(yù)后［5］。然而，代謝在心力衰竭相關(guān)肺動(dòng)脈高壓形成和發(fā)展中的作用尚不清楚。為進(jìn)一步闡明HF-PH 代謝的變化及調(diào)節(jié)機(jī)制，我們通過(guò)復(fù)制大鼠主動(dòng)脈弓縮窄（transverse aortic constriction，TAC）建立HF-PH 模型，探討了PH 形成過(guò)程中血清代謝組的變化及可能的代謝途徑。

材 料 和 方 法

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（6

周齡）26 只，合格證號(hào)為No. 44007200091380，體質(zhì)量（200±20）g，由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供并飼喂于重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心IVC 級(jí)動(dòng)物飼養(yǎng)室，健康情況良好。

1.2 主要儀器和試劑 TripleTOF 5600/6600 質(zhì)譜儀（SCIEX）；1290 Infinity LC 超高效液相色譜（ultraperformance liquid chromatography，UPLC）儀（Agilent）；5430R 低溫高速離心機(jī)（Eppendorf）。色譜柱：Water，ACQUITY UPLC BEH Amide 1.7 μm，2.1 mm×100 mm column，Water，ACQUITY UPLC HSS T3 1.8 μm，2.1 mm×100 mm column。乙腈（Merck）；乙酸銨（Sigma）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 TAC 模型的制備及分組 6 周齡SD 大鼠20 只行TAC，其中1 只死于術(shù)中出血，1 只死于麻醉意外，18 只存活。根據(jù)術(shù)后不同時(shí)間分為0 周、6 周和9 周組（均n=6）；另設(shè)假手術(shù)（sham）組（n=6），手術(shù)過(guò)程與手術(shù)組相同，但不結(jié)扎主動(dòng)脈弓。TAC 模型的建立［6］：腹腔注射戊巴比妥（60 mg/kg）麻醉后，仰臥位將其固定于37 ℃的加熱墊上。行氣管插管，潮氣量為4～6 mL/200 g，呼吸頻率為70 min-1，呼吸比為1∶1。在手術(shù)區(qū)域消毒備皮，從左胸部剪開(kāi)皮膚，鈍性分離胸大肌和胸小肌，暴露出肋骨。在近左胸骨旁第2～3肋間無(wú)菌操作下剪開(kāi)約1.0 cm 水平切口，鈍性分離血管、筋膜，撥開(kāi)胸腺，暴露主動(dòng)脈弓。用特殊制備的彎鑷在右無(wú)名和左頸總動(dòng)脈之間挑起主動(dòng)脈弓穿一根2-0絲線后，在主動(dòng)脈弓旁邊放置去掉針尖的彎曲的16G 針頭（直徑1.6mm），結(jié)扎主動(dòng)脈后迅速取出針頭，將胸腺放回胸腔。結(jié)扎確認(rèn)無(wú)出血后逐層關(guān)胸，縫合皮膚。繼續(xù)通氣10 min 左右，待大鼠恢復(fù)自主呼吸后，拔出氣管插管，放回動(dòng)物房飼養(yǎng)。術(shù)后使用大鼠尾部測(cè)量?jī)x測(cè)量大鼠心率和血壓。

2.2 超聲心動(dòng)圖檢測(cè) 采用VisualSonics 的VeVo 2100 型高分辨小動(dòng)物超聲儀，由超聲科具有小動(dòng)物超聲操作經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)師檢測(cè)。將各組檢測(cè)大鼠用2%戊巴比妥腹腔注射麻醉后，其四肢固定于泡沫板上，脫去胸前毛發(fā)充分暴露胸骨和左胸廓位置，然后行M 型超聲心動(dòng)圖檢測(cè)舒張期室間隔厚度（interventricular septum thickness at diastole，IVSTd）、收縮期室間隔厚度（interventricular septum thickness at systole，IVSTs）、左室舒張末期內(nèi)徑（left ventricular internal diameter at diastole，LVIDd）、左室收縮末期內(nèi)徑（left ventricular internal diameter at systole，LVIDs）、左室舒張后壁厚度（left ventricular posterior wall thickness at diastole，LVPWd）、左室收縮后壁厚度（left ventricular posterior wall thickness at systole，LVPWs）、左室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fraction，LVEF）、左室短軸縮短率（left ventricular fractional shortening，LVFS）、左室心肌質(zhì)量（left ventricular mass，LV mass）和左室舒張末期容積（left ventricular end-diastolic volume，LVEDV）等指標(biāo)。

2.3 血流動(dòng)力學(xué)的檢測(cè) 大鼠經(jīng)2%的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后仰臥固定于操作臺(tái)上，暴露右頸外靜脈，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，于近心端作一斜切口，用充盈肝素鹽水的硬膜外麻醉管于結(jié)扎點(diǎn)近心端，順血管走向插入1 mL 注射器針頭，沿針頭切口送入右心導(dǎo)管后，將測(cè)壓管與壓力換能器連接，從頸外靜脈緩緩送入至上腔靜脈、右心房，連接壓力換能器與三通管，依據(jù)計(jì)算機(jī)屏幕顯示的圖像和波幅變化，判斷導(dǎo)管尖端位置，根據(jù)穩(wěn)定后的壓力波形，測(cè)定右心室收縮壓（right ventricular systolic pressure，RVSP）；導(dǎo)管再繼續(xù)往前至肺動(dòng)脈檢測(cè)平均肺動(dòng)脈壓（mean pulmonary arterial pressure，mPAP）。

2.4 非靶代謝組學(xué)檢測(cè) 樣本采集：用采血針從腹主動(dòng)脈采集5 mL 血液于肝素抗凝管中，室溫靜置30 min 后，2 000 r/min 離心10 min 分離血清血漿，取上清，液氮速凍，-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

樣本預(yù)處理：分別取各組樣本100 μL，加入400 μL 預(yù)冷的甲醇乙腈溶液（體積比1∶1），渦旋60 s，于-20 ℃放置1 h 沉淀蛋白，14 000×g、4 ℃離心20 min，取上清冷凍干燥。

色譜條件：樣品采用Agilent 1290 Infinity LC UPLC 系統(tǒng)的HILIC 色譜柱進(jìn)行分離；柱溫25 ℃；流速0.3 mL/min；流動(dòng)相組成A 為水+25 mmol/L 乙酸銨+25 mmol/L 氨水，B 為乙腈。梯度洗脫程序如下：0～0.5 min，95% B；0.5～7 min，B 從95%線性變化至65%；7～8 min，B 從65%線性變化至40%；8～9 min，B 維持在40%；9～9.1 min，B 從40%線性變化至95%；9.1～12 min，B維持在95%。

Q-TOF 質(zhì)譜條件：分別采用電噴霧電離（electrospray ionization，ESI）正離子和負(fù)離子模式進(jìn)行檢測(cè)。樣品經(jīng)UPLC 分離后用Agilent 6550 質(zhì)譜儀進(jìn)行質(zhì)譜分析。ESI 源條件如下：氣體溫度：250 ℃；干燥氣體流量：16 L/min；霧化器壓強(qiáng)：20 psig；鞘氣體溫度：400 ℃；鞘氣體流量：12 L/min；毛細(xì)管電壓：3000 V；噴嘴電壓：0 V；Fragment 電壓：175 V；mass range：50～1 200 m/z；acquisition rate：4 Hz；cycle time：250 ms。

樣本檢測(cè)完畢后，采用TripleTOF 6600質(zhì)譜儀對(duì)代謝物進(jìn)行鑒定，采集QC 樣品的一級(jí)、二級(jí)譜圖。ESI 源條件如下：Ion Source Gas1（Gas1）：40；Ion Source Gas2（Gas2）：80；Curtain gas（CUR）：30；source temperature： 650 ℃ ； IonSapary Voltage Floating（ISVF）±5 000 V（正負(fù)兩種模式）；二級(jí)質(zhì)譜采用information-dependent acquisition（IDA）獲得，并且采用high sensitivity 模式；declustering potential（DP）：±60 V（正負(fù)兩種模式）；collision energy：（35±15）eV；IDA 設(shè)置如下：exclude isotopes within 4 Da，candidate ions to monitor per cycle：10。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

Q-TOF數(shù)據(jù)采集按mass range進(jìn)行分段，50～300、290～600、590～900和890～1 200，從而擴(kuò)大二級(jí)譜圖的采集率，每個(gè)方法每段采集4個(gè)重復(fù)。將采集的原始數(shù)據(jù)經(jīng)ProteoWizard 轉(zhuǎn)換成.mzXML 格式，然后采用XCMS 程序進(jìn)行峰對(duì)齊、保留時(shí)間校正和提取峰面積。代謝物結(jié)構(gòu)鑒定采用精確質(zhì)量數(shù)匹配（＜25 ppm）和二級(jí)譜圖匹配的方式，檢索實(shí)驗(yàn)室自建數(shù)據(jù)庫(kù)。

將Q-TOFMS 和UPLC-QTOFMS 獲得的數(shù)據(jù)經(jīng)Pareto-scaling 預(yù)處理后，進(jìn)行多維統(tǒng)計(jì)分析，包括無(wú)監(jiān)督主成分分析（principal component analysis，PCA），有監(jiān)督偏最小二乘法判別分析（partial leastsquares discrimination analysis，PLS-DA）和正交偏最小二乘法判別分析（orthogonal partial least-squares discrimination analysis，OPLS-DA）。對(duì)于多維統(tǒng)計(jì)分析變量權(quán)重值（variable important in projection，VIP）＞1 的差異代謝物，進(jìn)一步采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行篩選（P＜0.05）。最后，利用KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www. genome. jp/kegg/）對(duì)差異代謝物進(jìn)行代謝通路富集分析，對(duì)篩選代謝物進(jìn)行受試者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析，計(jì)算ROC 曲線下面積（area under curve，AUC）以及模型敏感性和特異性。

使用SPSS 19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。組間比較采用單因素方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1 左心衰竭相關(guān)肺動(dòng)脈高壓模型的建立

與假手術(shù)組相比，主動(dòng)脈弓縮窄0 周鼠尾動(dòng)脈壓、心率、體重、左室大小和功能等參數(shù)均無(wú)明顯差異。與0 周組相比，術(shù)后6 周和9 周鼠尾動(dòng)脈壓增高。心臟超聲提示，與0 周組相比，術(shù)后6 周和9 周LV mass 和LVPW 均增高，6 周時(shí)LVEF 與0 周組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，9 周組LVEF 顯著降低（表1）。血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)提示，與0周組相比，術(shù)后6周mPAP增高，但仍在正常范圍之內(nèi)［（19.53±0.97）mmHgvs（15.81±0.78）mmHg，n=6，P＜0.05］，術(shù)后9 周mPAP 增高［（30.08±1.07）vs（15.81±0.78）mmHg，n=6，P＜0.01），見(jiàn)圖1A。術(shù)后6 周和9 周RVSP 均增高，見(jiàn)圖1B。結(jié)合心臟超聲和血流動(dòng)力學(xué)結(jié)果，TAC術(shù)后6 周已出現(xiàn)左室重構(gòu)，肺動(dòng)脈壓力開(kāi)始升高，術(shù)后9 周進(jìn)展為HF-PH，提示TAC 術(shù)后6 周到9 周為肺動(dòng)脈高壓形成和發(fā)展階段。

表1 TAC術(shù)后左心結(jié)構(gòu)和功能變化Table 1. The structure and function changes of left heart after TAC surgery（Mean±SD.n=6）

Figure 1. Changes of mPAP and RVSP after TAC surgery. Mean±SD.n=6.*P＜0.05vs 0-week group；?P＜0.05vs 6-week group.圖1 TAC對(duì)平均肺動(dòng)脈壓和右室收縮壓的影響

2 代謝模式分析

我們進(jìn)一步分析了TAC 術(shù)后6 周和9 周的代謝分布模式。TAC 術(shù)后9 周組和6 周組樣本在正負(fù)離子模式下TIC 比較結(jié)果顯示各色譜峰的響應(yīng)強(qiáng)度和保留時(shí)間基本重疊，說(shuō)明在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中儀器誤差引起的變異較?。贿M(jìn)一步行OPLS-DA 分析代謝物的二維分布模式，在POS 和NEG 模式下，9 周組與6周組相比代謝模式均明顯分離，POS 模式下R2 和Q2 分別為0.805 和0.356；NEG 模式下R2 和Q2 分別為0.994 和0.446。結(jié)果提示數(shù)據(jù)擬合、重復(fù)性好，模型穩(wěn)定有效，心衰發(fā)展為肺動(dòng)脈高壓過(guò)程中代謝模式發(fā)生顯著變化，見(jiàn)圖2。

Figure 2. OPLS-DA analysis of metabolites by a solvent system under positive and negative ion modes. A：score plot under positive ion mode；B：score plot under negative ion mode；C：permutation test under positive ion mode；D：permutation test under negative ion mode。圖2 OPLS-DA分析代謝物分布模式

3 差異代謝物

我們進(jìn)一步分析了TAC 術(shù)后9 周組和6 周組的差異代謝物。根據(jù)由OPLS-DA模型獲得的特征變量VIP 值，篩選出VIP＞1 且P＜0.05 的差異代謝物，我們發(fā)現(xiàn)與6周組相比，9周時(shí)差異明顯的代謝物有16個(gè)（表2 及圖3），涉及類(lèi)固醇及衍生物（cholic acid 和chenodeoxycholate）、胺類(lèi)（triethanolamine）、有機(jī)酸（urea 和L-pyroglutamic acid）和脂肪酸（L-palmitoylcarnitine）等。

Figure 3. The clustering results of hierarchical cluster analysis based on the significantly different metabolites between 6-week（6w）and 9-week（9w）groups after TAC surgery under positive and negative models.圖3 TAC術(shù)后6周和9周組差異代謝物的聚類(lèi)分析

表2 TAC術(shù)后9周和6周組相比差異代謝物Table 2. Identified significantly different metabolites between 9-week and 6-week groups

我們分析了9 周與6 周組相比代謝通路的變化，發(fā)現(xiàn)可能參與肺動(dòng)脈高壓形成的代謝通路有aminoacyl-tRNA biosynthesis、ABC transporters、arginine biosynthesis、valine，leucine and isoleucine biosynthesis、pantothenate and CoA biosynthesis、phenylalanine，tyrosine and tryptophan biosynthesis、mTOR signaling pathway、vitamin digestion and absorption、valine，leucine and isoleucine degradation 和primary bile acid biosynthesis，其中與初級(jí)膽汁酸合成相關(guān)的代謝物有膽酸和鵝脫氧膽酸，見(jiàn)表3。

表3 KEGG富集代謝通路Table 3. KEGG enrichment pathway analysis

5 ROC曲線分析

我們進(jìn)一步分析了初級(jí)膽汁酸合成代謝通路相關(guān)代謝物膽酸和鵝脫氧膽酸預(yù)測(cè)HF-PH 的價(jià)值，ROC 分析兩者預(yù)測(cè)肺動(dòng)脈高壓的AUC 分別為和0.929和0.905，見(jiàn)圖4。

Figure 4. ROC analysis of cholic acid and chenodeoxycholate in predicting PH-HF. A：ROC for cholic acid；B：ROC for chenodeoxycholate.圖4 ROC分析初級(jí)膽汁酸合成通路代謝物預(yù)測(cè)心力衰竭并發(fā)肺動(dòng)脈高壓的價(jià)值

討論

肺動(dòng)脈高壓是左心衰竭的常見(jiàn)并發(fā)癥，心力衰竭常伴能量代謝改變，本研究中我們通過(guò)TAC 建立左心衰竭相關(guān)肺動(dòng)脈高壓模型，通過(guò)非靶代謝組學(xué)等方法研究了心力衰竭發(fā)展過(guò)程中與肺血流動(dòng)力學(xué)和肺動(dòng)脈高壓形成相關(guān)的代謝物和代謝通路。我們發(fā)現(xiàn)TAC 術(shù)后6 周mPAP 開(kāi)始升高，9 周時(shí)出現(xiàn)HFPH，在PH 形成和發(fā)展過(guò)程中，代謝模式和代謝物發(fā)生顯著改變，膽汁酸合成可能參與了HF-PH 形成和發(fā)展的過(guò)程。

根據(jù)WHO 分類(lèi)，肺動(dòng)脈高壓分為五大類(lèi)，其中由左心疾病引起的肺動(dòng)脈高壓屬于第二大類(lèi)。左心疾病中，心力衰竭是引起肺動(dòng)脈高壓最常見(jiàn)的病因［1-2］。與特發(fā)性肺動(dòng)脈高壓不同，通常認(rèn)為血流動(dòng)力學(xué)異常是左心疾病導(dǎo)致HF-PH 的重要初始因素。左心功能衰竭時(shí)左室和左房負(fù)荷增高，增高的左心負(fù)荷逆向傳遞使肺靜脈壓升高、肺泡毛細(xì)血管床屏障破壞，肺血管內(nèi)壓力持續(xù)升高會(huì)引起肺小動(dòng)脈收縮及肺血管重構(gòu)，形成肺動(dòng)脈高壓［7］。本研究中我們通過(guò)TAC 建立左心壓力超負(fù)荷模型，發(fā)現(xiàn)TAC 術(shù)后6 周LV mass 和LVPW 均增高，mPAP 開(kāi)始升高但仍在正常范圍；9 周時(shí)LVEF 降低，mPAP 顯著升高，形成HF-PH，提示6～9 周是HF-PH 形成和發(fā)展的過(guò)程。

雖然HF-PH 由心力衰竭引起，但基于心臟重構(gòu)的治療和血管活性藥物的應(yīng)用并不能完全有效改善肺血流動(dòng)力學(xué)［8］。目前對(duì)心力衰竭引起肺血管重構(gòu)的機(jī)制尚缺乏深入研究。由于心力衰竭而常伴能量代謝改變，本研究中我們分析了肺動(dòng)脈高壓形成過(guò)程中血清代謝組學(xué)變化，發(fā)現(xiàn)TAC 術(shù)后9周與6周相比，血清代謝模式發(fā)生顯著改變，根據(jù)VIP＞1 且P＜0.05 的標(biāo)準(zhǔn)篩選出16 個(gè)差異代謝物，涉及類(lèi)固醇及衍生物、胺類(lèi)、有機(jī)酸、脂肪酸等。進(jìn)一步KEGG 分析提示多條代謝相關(guān)通路發(fā)生變化，膽汁酸合成是變化顯著的代謝通路之一，與膽汁酸合成途徑相關(guān)的代謝物有膽酸和鵝脫氧膽酸。

膽汁酸在體內(nèi)最重要的生理功能是幫助脂類(lèi)物質(zhì)的消化和吸收，可分為初級(jí)膽汁酸和次級(jí)膽汁酸。初級(jí)膽汁酸通常以膽固醇為主要原料在肝細(xì)胞合成，主要包括膽酸和鵝去氧膽酸，是膽汁酸合成途徑的直接產(chǎn)物。初級(jí)膽汁酸在腸道細(xì)菌作用下第7 位α羥基脫氧轉(zhuǎn)化為次級(jí)膽汁酸，包括脫氧膽酸和石膽酸等。合成膽汁酸是膽固醇在人體內(nèi)的主要代謝方式，約99%膽固醇隨膽汁經(jīng)腸道排出體外。然而，隨著對(duì)膽汁酸作用的深入認(rèn)識(shí)，近年發(fā)現(xiàn)其不僅參與脂代謝，還是屬于信號(hào)分子，參與消化以外多種生理、病理功能的調(diào)節(jié)［9］。Zhao等［10］分析了8例特發(fā)性肺動(dòng)脈高壓（IPAH）患者的肺組織標(biāo)本，非靶代謝組研究發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組正常肺組織相比，IPAH 患者肺組織多種膽汁酸代謝物增高，包括?；悄懰帷⒏拾蹦懰?、?；蛆Z膽酸鹽等，進(jìn)一步基因芯片和RNA 及蛋白水平研究發(fā)現(xiàn)肺組織細(xì)胞色素P450B1（CYP7B1）高表達(dá)，他們的研究提示除肝組織外，肺組織可能也具有從頭合成膽汁酸的作用，而膽汁酸代謝可能參與了IPAH的發(fā)展。

膽汁酸是核受體法尼酯衍生物X 受體（famesoid X receptor，F(xiàn)XR）的天然配體。而FXR 通常在肝、腎和胃腸道等器官高表達(dá)，在非經(jīng)典膽汁酸靶組織如肺和血管中亦有表達(dá)，在人呼吸道上皮細(xì)胞、肺血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞中均能檢測(cè)到FXR。膽汁酸和FXR 結(jié)合后可直接參與多種基因調(diào)控，包括編碼調(diào)控脂質(zhì)、葡萄糖、能量代謝穩(wěn)態(tài)以及炎癥和纖維化等蛋白質(zhì)的基因。FXR 活化能夠抑制炎癥反應(yīng)并促進(jìn)肺損傷后的肺修復(fù)［11］。Vignozzi 等［12］和Comeglio等［13］通過(guò)野百合堿誘導(dǎo)大鼠肺動(dòng)脈高壓模型，發(fā)現(xiàn)FXR 受體激動(dòng)劑奧貝膽酸治療能顯著改善肺動(dòng)脈高壓大鼠的運(yùn)動(dòng)耐量和肺血管重構(gòu)，提示膽汁酸代謝的心肺保護(hù)作用。本研究中我們通過(guò)TAC 建立左心壓力超負(fù)荷大鼠心衰模型，發(fā)現(xiàn)膽汁酸代謝可能還參與了HF-PH 的發(fā)展，與6 周組相比，TAC 術(shù)后9 周時(shí)血清膽酸增加4.16 倍，鵝脫氧膽酸增加3.67 倍；同時(shí)，ROC 分析提示膽酸和鵝脫氧膽酸預(yù)測(cè)心力衰竭并發(fā)肺動(dòng)脈高壓的AUC 分別為0.929 和0.905。結(jié)合膽汁酸激活FXR受體通路發(fā)揮抗炎和抗纖維化的作用，我們的研究提示膽汁酸代謝在HF-PH 中可能也發(fā)揮保護(hù)作用，血清膽酸和鵝脫氧膽酸可能成為預(yù)測(cè)心衰并發(fā)肺動(dòng)脈高壓的血清標(biāo)志物。

膽汁酸的代謝需在腸道微生物的作用下完成，因此膽汁酸與腸道微生物之間存在動(dòng)態(tài)的相互作用。而腸道菌群和腸道微生物在心血管疾病中的作用逐漸引起關(guān)注［14］，近年認(rèn)為肺動(dòng)脈高壓是個(gè)系統(tǒng)性疾病，多項(xiàng)研究表明肺動(dòng)脈高壓時(shí)腸道微生物的分類(lèi)和功能均發(fā)生改變［15-16］。膽汁酸通過(guò)與腸道微生物群和FXR 受體的相互作用參與調(diào)節(jié)機(jī)體代謝、免疫、炎癥以及纖維化等過(guò)程，我們的結(jié)果提示腸道菌群可能也參與了HF-PH 的形成和發(fā)展，以膽汁酸受體及腸道微生物為靶點(diǎn)的治療，可能為臨床上HFPH的干預(yù)提供新方法。

綜上所述，代謝組學(xué)通過(guò)檢測(cè)靶向代謝物，通常能為疾病的發(fā)生機(jī)制、疾病嚴(yán)重程度、疾病進(jìn)展和潛在治療方法提供新線索。本研究中我們發(fā)現(xiàn)初級(jí)膽汁酸合成途徑可能參與了HF-PH的形成，可能成為預(yù)測(cè)早期肺動(dòng)脈高壓的標(biāo)志物。本研究主要來(lái)源于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，存在一定局限性，初級(jí)膽汁酸合成途徑與臨床病例的相關(guān)性和臨床意義尚待進(jìn)一步驗(yàn)證。我們的研究為HF-PH的早期識(shí)別和治療提供新思路。