陳利輝

（中紡檢測(cè)（福建）有限公司，福建泉州 362000）

飲料中的食品添加劑種類較多，在食品添加劑檢測(cè)時(shí)，氣相色譜法、光度法等檢測(cè)方法，存在準(zhǔn)確性低、難以定性等問(wèn)題。液相色譜法為常用食品添加劑測(cè)定方法，常規(guī)液相色譜法流程復(fù)雜，需大量實(shí)驗(yàn)試劑，且分析緩慢，不滿足食品快速檢測(cè)需求，可使用超高效液相色譜法解決該問(wèn)題。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

本文以市售碳酸飲料為樣本，測(cè)定糖精鈉、苯甲酸、日落黃及檸檬黃4種食品添加劑，使用試劑包括甲醇、乙酸銨、磷酸二氫銨。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理

目前市售的飲料種類繁多，不同飲料處理方式不同。對(duì)于碳酸飲料或茶飲料，將飲料置于超聲波清洗器中，進(jìn)行除氣處理，精確稱取5～10 g（精確至小數(shù)點(diǎn)后3位）除氣后的飲料，置于50 mL帶蓋離心管中，加水至20 mL左右，使用漩渦混合器振蕩，超聲20 min，加水定容至刻度，置于離心機(jī)內(nèi)離心處理10 min（轉(zhuǎn)速為10 000 r/min），取上清液過(guò)0.22 μm的濾膜，濾液即為樣品溶液[1]。

1.2.2 色譜條件優(yōu)化

在超高效液相色譜檢測(cè)中，色譜條件影響飲料中不同種類食品添加劑的分離效果，進(jìn)而影響檢測(cè)靈敏度與檢測(cè)準(zhǔn)確性。在超高效液相色譜測(cè)飲料中食品添加劑時(shí)，應(yīng)注重以下色譜條件的選擇。

（1）流動(dòng)相。當(dāng)對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行優(yōu)化選擇時(shí)，基于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，流動(dòng)相應(yīng)選擇水溶性強(qiáng)的溶液，此類溶液不易在色譜柱上殘留，可保障各類食品添加劑有效分離；常用流動(dòng)相包括乙酸銨、乙腈、甲醇、磷酸二氫鉀和磷酸二氫銨等，可基于性質(zhì)變化，選擇一種或兩種溶液作為流動(dòng)相，取得更精準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果[2]。如乙腈、乙酸作為流動(dòng)相，乙腈本身的洗脫效果較好，使添加劑能夠直接被沖刷下來(lái)，但是很難達(dá)成添加劑的分離。如甲醇、乙酸銨作為流動(dòng)相，則可以充分利用甲醇、乙酸銨的應(yīng)用屬性，具有良好的添加劑分離效果。需要注意的是，由于等度洗脫難以達(dá)成良好的添加劑分離效果，在這種情況下，便可以不斷優(yōu)化調(diào)整流動(dòng)相比例，應(yīng)用梯度洗脫程序，從而得到最佳分離條件[3]。

（2）檢測(cè)波長(zhǎng)。按照《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中合成著色劑的測(cè)定》（GB5009.35—2016），不同食品添加劑在不同檢測(cè)波長(zhǎng)的敏感度不同，如糖精鈉的最大吸收波長(zhǎng)為206.2 nm，安賽蜜的最大吸收波長(zhǎng)為230 nm等。如果采用單一檢測(cè)波長(zhǎng)的方式，將會(huì)降低檢測(cè)效果，檢測(cè)人員可通過(guò)變量控制實(shí)驗(yàn)，測(cè)定不同波長(zhǎng)下，各個(gè)目標(biāo)食品添加劑的最佳檢測(cè)波長(zhǎng)，在保障檢測(cè)準(zhǔn)確性與靈敏度的基礎(chǔ)上，減少其他物質(zhì)干擾。在檢測(cè)波長(zhǎng)期間，還需要將出峰時(shí)間、紫外干擾等因素進(jìn)行綜合考量，通過(guò)反復(fù)對(duì)比實(shí)驗(yàn)，獲取得到最佳檢測(cè)波長(zhǎng)[4]。

（3）檢測(cè)器。液相色譜檢測(cè)可用紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器（PDA），后者適用范圍更廣，為檢測(cè)首選。

（4）色譜柱。在超高效液相色譜檢測(cè)中，可用色譜柱包括TC-C18、ZORBAX SB-C18等，色譜柱類型與規(guī)格均會(huì)影響食品添加劑分離效果，需根據(jù)目標(biāo)食品添加劑，選擇合適色譜柱，以取得理想基線分離效果[5]。

最終確定的超高效液相色譜法的色譜條件為ZORBAX SB-C18色譜柱，柱溫為35 ℃；流動(dòng)相A選用甲醇；流動(dòng)相B選用乙酸銨與0.1 mol/L的磷酸二氫銨；檢測(cè)器為PDA；

1.2.3 檢測(cè)參數(shù)

使用超高效液相色譜法逐一測(cè)定4種食品添加劑，進(jìn)行對(duì)比分析。4種食品添加劑的檢測(cè)參數(shù)如表1所示。

表1 4種食品添加劑的檢測(cè)參數(shù)

2 結(jié)果與分析

2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比

由表2可知，超高效液相色譜法的檢測(cè)結(jié)果與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中的方法法相差不大，RSD均低于2.12%，證實(shí)超高效液相色譜法能夠用于飲料中食品添加劑的測(cè)定，且檢測(cè)精密度較高，可在實(shí)踐中普及。

2.2 要點(diǎn)分析

本文運(yùn)用超高效液相色譜，基于《飲料中乙?；前匪徕浀臏y(cè)定》等多個(gè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，合理展開食品添加劑的測(cè)定工作。在使用超高效液相色譜法測(cè)定飲料中的食品添加劑時(shí)，應(yīng)按照規(guī)范流程測(cè)定：①選擇合適的儀器與試劑，制備標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；②樣品前處理；③按照最佳色譜條件開始測(cè)定；④分析處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。在上述過(guò)程中，操作要點(diǎn)在于樣品前處理與色譜條件優(yōu)化。

3 結(jié)論

在使用超高效液相色譜測(cè)飲料中食品添加劑時(shí)，需做好樣品前處理與色譜條件優(yōu)化工作，根據(jù)檢測(cè)樣品的類型，選擇不同樣品前處理方案，優(yōu)化流動(dòng)相、檢測(cè)波長(zhǎng)、檢測(cè)器與色譜柱，規(guī)范檢測(cè)操作，發(fā)揮超高效液相色譜的優(yōu)勢(shì)，提高飲料中食品添加劑的檢測(cè)質(zhì)量。