侯娟，葉峰山，陳煥文，陳成塔

（廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院杏林分院檢驗(yàn)科，福建 廈門 361000）

艾滋病是以CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量減少為典型特征的傳染性疾病，該病導(dǎo)致患者免疫功能受損甚至缺陷，引發(fā)其他嚴(yán)重并發(fā)癥，最終導(dǎo)致死亡[1-2]。人體免疫缺陷病毒（HIV）感染是引發(fā)艾滋病的根本原因，其傳播途徑眾多，如高危性行為、母嬰、不規(guī)范醫(yī)療操作、使用被污染的血制品等[3]。隨著艾滋病引發(fā)的社會(huì)問題越來越多，國家對(duì)其重視程度也不斷加強(qiáng)，對(duì)HIV監(jiān)測的要求也逐漸提高[4]。目前HIV的檢測流程是先行抗體初篩，若抗體檢測呈陽性再行確診檢查，常見的初篩方法以免疫檢驗(yàn)為主，以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、膠體金免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法應(yīng)用最廣泛，但3 種免疫檢驗(yàn)方法各有優(yōu)劣，臨床對(duì)于最優(yōu)檢測方法尚存在爭議[5]?；诖?，本研究選取于本院檢測確診為HIV 的143 例患者作為研究對(duì)象，對(duì)比酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、膠體金免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法檢測HIV抗體的可靠性，旨在為臨床工作順利開展提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年9月至2020年9月于本院檢測確診為HIV 的143 例患者，其中男79 例，女64 例；年齡22～71歲，平均年齡（38.66±9.50）歲；HIV抗體陽性97例，HIV抗體陰性46 例。所有患者均對(duì)本研究知情，并自愿簽署知情同意書。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者均經(jīng)蛋白免疫印跡法檢測確認(rèn)，并符合《中國艾滋病診療指南（2018版）》[6]的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②無肺結(jié)核等其他傳染病。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并血液系統(tǒng)疾??；②合并免疫系統(tǒng)疾病；③合并嚴(yán)重精神疾病導(dǎo)致樣本采集失敗。

1.2 方法 采集患者血液樣本，分別行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、膠體金免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法檢測，其中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)使用廈門英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)的檢測試劑盒與北京天石科技有限責(zé)任公司生產(chǎn)的SM-3型酶標(biāo)儀，按照試劑盒與儀器說明書進(jìn)行檢測與判定，觀察抗體和抗原結(jié)合后的顏色反應(yīng)情況并進(jìn)行定量分析，若測定值/臨界值＞1則判斷HIV抗體陽性，反之則為陰性。膠體金免疫層析法使用廈門英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)的檢測試劑盒，將血液樣本浸入加樣區(qū)，全部浸沒后持續(xù)10 s，觀察試紙上質(zhì)控點(diǎn)和測定點(diǎn)變化，若兩點(diǎn)同時(shí)出現(xiàn)則判斷HIV抗體陽性，僅出現(xiàn)質(zhì)控點(diǎn)而未見測定點(diǎn)為陰性，未出現(xiàn)質(zhì)控點(diǎn)則重新檢測?；瘜W(xué)發(fā)光法使用美國雅培公司生產(chǎn)的I2000化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑，按照說明書進(jìn)行檢測，根據(jù)檢測臨界值指數(shù)（COI）判斷結(jié)果，COI值＞1則判斷HIV抗體陽性，反之則為陰性。

1.3 觀察指標(biāo) 比較3種免疫檢驗(yàn)方法的檢測結(jié)果，并評(píng)價(jià)對(duì)HIV 抗體的檢測效能，其中靈敏度=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%；特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+真陽性例數(shù)）×100%；準(zhǔn)確率=（真陽性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)HIV抗體的檢測效能 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測出HIV 抗體陽性標(biāo)本93 例，HIV 抗體陰性標(biāo)本50例，檢測靈敏度為92.78%，特異度為93.48%，準(zhǔn)確率為93.01%，見表1。

表1 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)HIV抗體的檢測效能

2.2 膠體金免疫層析法對(duì)HIV抗體的檢測效能 膠體金免疫層析法檢測出HIV 抗體陽性標(biāo)本96 例，HIV 抗體陰性標(biāo)本47例，檢測靈敏度為91.75%，特異度為84.78%，準(zhǔn)確率為89.51%，見表2。

表2 膠體金免疫層析法對(duì)HIV抗體的檢測效能

2.3 化學(xué)發(fā)光法對(duì)HIV抗體的檢測效能 化學(xué)發(fā)光法檢測出HIV抗體陽性標(biāo)本98例，HIV抗體陰性標(biāo)本45例，檢測靈敏度為98.97%，特異度為95.65%，準(zhǔn)確率為97.90%，見表3。

表3 化學(xué)發(fā)光法對(duì)HIV抗體的檢測效能

2.4 3 種方法檢測HIV 抗體的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率比較化學(xué)發(fā)光法檢測HIV 抗體的靈敏度高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、膠體金免疫層析法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、化學(xué)發(fā)光法檢測HIV抗體的特異度、準(zhǔn)確率均高于膠體金免疫層析法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表4。

表4 3種方法檢測HIV抗體的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率比較（%）

3 討論

臨床實(shí)踐表明，及時(shí)監(jiān)測HIV感染并予以有效干預(yù)是控制艾滋病發(fā)展的重要手段[7]。蛋白免疫印跡法由于高效、敏感度高、分析容量大等優(yōu)點(diǎn)，已作為HIV抗體檢測的金標(biāo)準(zhǔn)，但該方法所用材料與試劑價(jià)格昂貴，在HIV大范圍初篩中難以有效開展，因此，實(shí)驗(yàn)室常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、膠體金免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法等進(jìn)行抗體檢測[8]。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是先將酶分子與目標(biāo)抗體共價(jià)結(jié)合，隨后與固相載體上吸附的抗原特異性結(jié)合，滴加底物溶液進(jìn)行氧化還原反應(yīng)，即可通過隨之出現(xiàn)的顏色反應(yīng)對(duì)抗體進(jìn)行定性或定量分析[9]。膠體金免疫層析法是利用膠體金作為示蹤標(biāo)志物，其在弱堿環(huán)境下帶有負(fù)電荷，可與蛋白質(zhì)分子正電荷發(fā)生靜電結(jié)合，從而對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記[9-10]。化學(xué)發(fā)光法是基于待測物濃度與體系化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度呈線性定量關(guān)系這一原理，通過對(duì)體系化學(xué)發(fā)光進(jìn)行測量，確定相應(yīng)抗體屬性[10-12]。此類方法均具有快速、簡便、價(jià)格低廉等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于HIV 初篩，但3 種方法各有優(yōu)劣，均可能對(duì)檢測結(jié)果造成影響，為降低漏檢可能，提高篩查準(zhǔn)確度，因此，需探尋最優(yōu)檢測方法。

本研究結(jié)果表明，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、化學(xué)發(fā)光法檢測HIV 抗體的特異度、準(zhǔn)確率均高于膠體金免疫層析法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、化學(xué)發(fā)光法對(duì)HIV抗體的檢測效果與蛋白免疫印跡法相似，而膠體金免疫層析法檢測效能較差，分析原因?yàn)?，該方法診斷效果與實(shí)驗(yàn)材料質(zhì)量，滲濾膜、層析材料、試劑條等相關(guān)[13]。此外，本研究中，化學(xué)發(fā)光法檢測HIV抗體靈敏度高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（P＜0.05），分析原因?yàn)?，酶?lián)免疫吸附試驗(yàn)耗時(shí)相對(duì)更長，且步驟繁瑣，實(shí)驗(yàn)過程中易被類風(fēng)濕因子、溶血、甲胎蛋白等因素干擾，從而導(dǎo)致假陽性率與假陰性率較高[14]。

綜上所述，化學(xué)發(fā)光法檢測HIV 抗體效能更高，可在疾病篩查時(shí)有效避免漏檢，值得臨床推廣運(yùn)用。