趙新艷

（新鄉(xiāng)市中心血站供血科，河南新鄉(xiāng) 458000）

交叉配血試驗(yàn)的方法主要包括鹽水法、酶法、低離子凝聚胺法等。本研究對(duì)比低離子凝聚胺法與鹽水法檢驗(yàn)準(zhǔn)確性以及靈敏度，闡述低離子凝聚胺法在輸血治療中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：本研究供血者均為本院血液中心健康義務(wù)獻(xiàn)血人員，受血者為本院2018 年6 月至2020 年5 月140 例輸血治療患者，將低離子凝聚胺實(shí)施交叉配血檢驗(yàn)方法設(shè)定為低離子凝聚胺法，鹽水法開(kāi)展交叉配血試驗(yàn)為鹽水法。140 例受血患者中男74 例，女66 例；年齡5～78 歲，平均（42.38±9.41）歲；疾病類型包括：車禍38 例，食管靜脈破裂19 例，胃癌25 例，產(chǎn)后大出血26 例，髖關(guān)節(jié)置換手術(shù)13 例，慢性貧血19 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)傳染病、精神疾病；臨床病例資料完整；經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并免疫疾?。缓喜⒏文I功能不全或衰竭；妊娠期及哺乳期婦女。

1.2 方法

1.2.1 鹽水法：分別取受血者以及供血者血樣各3mL，轉(zhuǎn)速3000r/min，離心2min，將血清分離后，紅細(xì)胞配制成為3%～5%的紅細(xì)胞鹽水懸液。選擇潔凈試管1 支，標(biāo)注為主測(cè)管，將受血者的血清和供血者細(xì)胞分別置入試管中；另取潔凈試管，標(biāo)注為次測(cè)管。將一滴供血者的血清滴入到主測(cè)管中，1滴受血者血清滴入到次測(cè)管中，混合后進(jìn)行離心，1000r/min 處理1min，觀察結(jié)果。

1.2.2 低離子凝聚胺法：取潔凈試管標(biāo)明主次測(cè)管。加入2 滴受血者血清以及1 滴供血者紅細(xì)胞懸液到主測(cè)管中，另外加入2 滴供血者血清和1 滴受血者紅細(xì)胞懸液到次測(cè)管中。兩支試管均分別加入0.5mL 的低離子介質(zhì)，混合均勻，于25℃下靜置1min 左右后分別加入凝聚胺試劑2 滴，混勻后3500r/min 離心15s，離心結(jié)束去除上清液，觀察試管底部的凝集狀態(tài)，后在兩支測(cè)管中加入假凝集清除液2 滴，充分混勻后再次進(jìn)行觀察。

1.2.3 不規(guī)則抗體譜細(xì)胞鑒定：將Combs 卡上端的錫紙膜平行向后拉扯至所需孔完全暴露，于孔內(nèi)加入50μL 譜細(xì)胞懸液以及50μL 病人自身紅細(xì)胞，在對(duì)應(yīng)孔內(nèi)加入25μL 病人血漿，37℃條件下孵育15min，將Combs 卡置于離心機(jī)中進(jìn)行離心9min，轉(zhuǎn)速為1100r/min，離心結(jié)束后于白色背景前觀察結(jié)果。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)：鹽水法判斷標(biāo)準(zhǔn)：20min 內(nèi)于顯微鏡下觀察，若有紅細(xì)胞凝集的現(xiàn)象發(fā)生則判定為陽(yáng)性；低離子凝聚胺法判斷標(biāo)準(zhǔn)：2 支測(cè)管或單獨(dú)一側(cè)試管中的紅細(xì)胞若一直為凝集狀態(tài)，則判定為陽(yáng)性，若凝集狀態(tài)在60s 后消失，則判定為陰性；不規(guī)則抗體譜細(xì)胞鑒定判定結(jié)果：紅細(xì)胞均沉淀于微管底部，則為陰性，若紅細(xì)胞處于微管下端1/3 至微管頂部截段內(nèi)則為陽(yáng)性。

1.4 觀察指標(biāo)：①統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性檢出情況，并以不規(guī)則抗體譜細(xì)胞鑒定結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，判定兩種檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性出現(xiàn)情況；②比較兩種檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度以及穩(wěn)定性，靈敏度=檢測(cè)陽(yáng)性/陰性+假陰性；準(zhǔn)確度=檢驗(yàn)結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)一致結(jié)果/總例數(shù)；穩(wěn)定性=紅細(xì)胞凝集明顯例數(shù)/總例數(shù)；③記錄兩種方法檢測(cè)耗時(shí)情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：運(yùn)用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t 檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組陽(yáng)性檢出率比較：低離子凝聚胺法中，通過(guò)低離子凝聚胺技術(shù)檢測(cè)出陽(yáng)性20 例，陽(yáng)性率為20.00%；鹽水法中，利用鹽水法檢測(cè)出陽(yáng)性13 例，陽(yáng)性率為9.26%，低離子凝聚胺法陽(yáng)性率高于鹽水法（P<0.05）；低離子凝聚胺法有4 例為假陽(yáng)性，鹽水法有3 例為假陽(yáng)性，兩組假陽(yáng)性率比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），詳見(jiàn)表1。

表1 兩組患者陽(yáng)性檢出率比較 [n（%）]

2.2 兩種方法檢測(cè)效能比較：低離子凝聚胺法靈敏度、穩(wěn)定度、準(zhǔn)確度分別為94.00%、91.00%、90.00%，均高于鹽水法78.00%、76.00%、74.00%（P<0.05），詳見(jiàn)表2。

表2 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)效能比較 （%）

2.3 兩種檢測(cè)方法耗時(shí)比較：低離子凝聚胺法平均耗時(shí)（7.24±1.75）長(zhǎng)于鹽水法平均耗時(shí)（4.17±0.56）min（P<0.05）。

3 討論

交叉配血試驗(yàn)是測(cè)定受血者和供血者血清中是否存在對(duì)雙方紅細(xì)胞形成破壞的抗體，可作為判斷能否可進(jìn)行輸血的重要依據(jù)，其準(zhǔn)確性直接與患者生命安全相關(guān)[1-2]。目前臨床上交叉配血多樣，其中鹽水法操作簡(jiǎn)單，成本低，一度得到較為廣泛的應(yīng)用。然而，鹽水法具有相當(dāng)大的局限性，其雖能較好地檢測(cè)出一般抗體IgM，但對(duì)于特殊類型和不完全抗體無(wú)法準(zhǔn)確檢出，只適合用于ABO 系統(tǒng)檢測(cè)，不能確保檢測(cè)準(zhǔn)確性，在保障患者生命方面，安全系數(shù)不夠高[3-4]。而低離子凝聚胺實(shí)施交叉配血不僅能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出完全抗體，同時(shí)對(duì)于特異性和不完全抗體均能夠快速檢出，準(zhǔn)確性較高[5]。凝聚胺為陽(yáng)離子聚合物，可在溶解之后生成大量正電荷，與紅細(xì)胞表面負(fù)電荷中和，拉近紅細(xì)胞之間的距離，發(fā)生紅細(xì)胞特異性凝集，另外，低離子凝聚胺加入重懸液可有效減少假陽(yáng)性，顯著提高試驗(yàn)結(jié)果的可靠性，應(yīng)用價(jià)值高[6]。

本研究中，對(duì)低離子凝聚胺實(shí)施交叉配血以及鹽水法兩種方法檢測(cè)出陽(yáng)性率進(jìn)行比較，低離子凝聚胺法陽(yáng)性率高于鹽水法，兩者陽(yáng)性檢出率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本研究通過(guò)統(tǒng)計(jì)兩種方法檢測(cè)靈敏度、穩(wěn)定性以及準(zhǔn)確性發(fā)現(xiàn)低離子凝聚胺實(shí)施交叉配血靈敏度94.00%，穩(wěn)定性91.00%，準(zhǔn)確性90.00%，均高于鹽水法。低離子凝聚胺法所需要檢測(cè)時(shí)間明顯高于鹽水法。本研究?jī)H比較低離子凝聚胺實(shí)施交叉配血檢驗(yàn)與鹽水法檢測(cè)結(jié)果，未與微柱凝膠法、酶法等檢測(cè)方法進(jìn)行比較，未能全面說(shuō)明低離子凝聚胺實(shí)施交叉配血檢驗(yàn)在輸血治療中的應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，低離子凝聚胺實(shí)施交叉配血檢驗(yàn)可有效防止溶血性輸血反應(yīng)，確保輸血安全。