劉 巖， 曲 穎， 李斯琪， 劉 兵， 李紅帥， 劉艷霞

北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院 老年醫(yī)學(xué)中心 干二科，遼寧 沈陽 110016

動(dòng)脈粥樣硬化是心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)最常見的病因之一[1]。有研究表明，鞘脂分子可以通過多種不同的機(jī)制介導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展。神經(jīng)酰胺為一類重要的鞘脂，能夠參與維持細(xì)胞的正常功能，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長和凋亡，并且與多種心血管危險(xiǎn)因素密切相關(guān)。已有研究證實(shí)，動(dòng)脈粥樣硬化患者的血漿中神經(jīng)酰胺的水平更高，并且在粥樣硬化斑塊區(qū)域可以分離出含有神經(jīng)酰胺在內(nèi)的多種鞘脂，斑塊低密度脂蛋白中神經(jīng)酰胺的含量比血漿低密度脂蛋白中高10～50倍[2-3]。有研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)酰胺可以預(yù)測(cè)冠心病患者18年后的全因死亡，這一結(jié)果在調(diào)整年齡性別、體質(zhì)量指數(shù)、高血壓、吸煙、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血糖和CVD家族史等危險(xiǎn)因素后仍然顯著[4]。但對(duì)于神經(jīng)酰胺與1年內(nèi)心血管事件的發(fā)生情況的預(yù)測(cè)尚有爭議。本研究旨在探討神經(jīng)酰胺水平與心血管事件發(fā)生情況的相關(guān)性，為應(yīng)用神經(jīng)酰胺預(yù)測(cè)心血管事件發(fā)生提供依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取自2019年8月至2020年7月于北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院體檢或入院診治的師級(jí)以上干部586例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡≤80歲；均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期婦女；惡性腫瘤患者；依從性較差者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 研究方法 所有研究對(duì)象均空腹采集靜脈血，應(yīng)用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS)法檢測(cè)血液中4種不同類型的神經(jīng)酰胺的含量(Cer16∶0、Cer18∶0、Cer24∶0、Cer24∶1)。準(zhǔn)確度采用加樣回收試驗(yàn)評(píng)價(jià)，通過向血漿樣品中加入低值和高值濃度(同精密度和準(zhǔn)確度濃度)標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)濃度重復(fù)檢測(cè)6次，按照“樣品處理流程”處理樣品；計(jì)算回收率，評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度。依據(jù)檢測(cè)出的具體的數(shù)值進(jìn)行打分，打分標(biāo)準(zhǔn)[5]見表1。根據(jù)神經(jīng)酰胺水平的不同分?jǐn)?shù)等級(jí)，將其分為A組(神經(jīng)酰胺低水平組，總分0～2分，n=403)，B組(神經(jīng)酰胺中水平組，總分3～6分，n=157)、C組(神經(jīng)酰胺高水平組，總分7～12分，n=26)。隨訪觀察1年，記錄3組患者1年內(nèi)心血管事件(因缺血性心血管病包括心絞痛發(fā)作、心肌梗死等)的發(fā)生情況。

表1 UPLC-MS/MS法檢測(cè)神經(jīng)酰胺項(xiàng)目及打分標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果

2.1 3組患者一般資料比較 3組患者男性比例、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、血糖、吸煙比例、高血壓比例、同型半胱氨酸、糖化血紅蛋白比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。A組患者的甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白水平低于B組、C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組患者一般資料比較

2.2 3組患者心血管事件發(fā)生率比較 A組、B組、C組分別發(fā)生心血管事件9例(2.2%)、9例(5.7%)、4例(15.4%)。B組患者心血管事件發(fā)生率明顯高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組患者心血管事件發(fā)生率明顯高于A、B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3 高水平神經(jīng)酰胺患者發(fā)生心血管事件的二元Logistic回歸分析 應(yīng)用二元Logistic回歸分析，對(duì)3組患者低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、膽固醇和甘油三酯水平進(jìn)行校正，結(jié)果表明高水平神經(jīng)酰胺是心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表3。

表3 高水平神經(jīng)酰胺患者發(fā)生心血管事件的二元Logistic回歸分析

3 討論

目前，我國CVD處于高患病率、高致殘率、高病死率階段，已成為重大公共衛(wèi)生問題[6-8]。構(gòu)建有效的心血管事件預(yù)測(cè)體系，尋找能預(yù)測(cè)心血管事件的核心生物學(xué)標(biāo)記物意義重大。而神經(jīng)酰胺在心血管事件風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)中有重要的臨床指導(dǎo)價(jià)值，具備成為CVD相關(guān)生物學(xué)標(biāo)記物的潛能。

本研究中神經(jīng)酰胺的檢測(cè)采用了國際領(lǐng)先UPLC/MS-MS技術(shù)。UPLC/MS-MS技術(shù)是一種通過制備、分離、檢測(cè)氣相離子來鑒定化合物的專門技術(shù)，廣泛應(yīng)用于各領(lǐng)域中[9]。在眾多的分析測(cè)試方法中，質(zhì)譜學(xué)方法被認(rèn)為是一種同時(shí)具備高特異性和高靈敏度的且被廣泛應(yīng)用的普適性方法，在臨床研究的應(yīng)用方面，已成為國際公認(rèn)的定量分析首選技術(shù)。截至目前，UPLC/MS-MS已經(jīng)可以用于檢測(cè)多種神經(jīng)酰胺[10]。有研究發(fā)現(xiàn)，血漿神經(jīng)酰胺水平越高的急性心肌梗死患者斑塊易損特征越明顯[11]。一些前瞻性研究證實(shí)，血漿中Cer(d18∶1/16∶0)、Cer(d18∶1/20∶0)、Cer(d18∶1/24∶1)及其與 Cer(d18∶1/24∶0)的比率對(duì)斑塊的不穩(wěn)定性、CVD病死率和健康人群發(fā)生意外主要心血管事件均具有預(yù)測(cè)能力[12-14]?；颊咝难苁录陌l(fā)生受多種因素的影響，如年齡、性別、膽固醇、低密度脂蛋白、血糖、吸煙、飲酒、用藥情況等[15]。本研究結(jié)果顯示，高水平神經(jīng)酰胺是心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。這表明，神經(jīng)酰胺水平與心血管事件發(fā)生密切相關(guān)。本研究結(jié)果還顯示，B組患者心血管事件發(fā)生率明顯高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組患者心血管事件發(fā)生率明顯高于A、B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這表明，高水平神經(jīng)酰胺患者心血管事件發(fā)生率更高，高水平神經(jīng)酰胺能夠一定程度上預(yù)測(cè)心血管事件的發(fā)生。本研究納入人群為師級(jí)以上干部，對(duì)于研究廣泛人群的神經(jīng)酰胺水平仍有一定局限性，尚需進(jìn)一步大樣本、多中心檢測(cè)。

綜上所述，高水平的神經(jīng)酰胺的患者心血管事件發(fā)生率更高，為心血管事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。