王旭紅 趙宏彩

摘要：目的 分析探討細(xì)針穿刺BRAF基因檢測(cè)技術(shù)在甲狀腺微小乳頭狀癌診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 將本院收治的接受甲狀腺結(jié)節(jié)手術(shù)治療的患者作為研究對(duì)象，共計(jì)80例，所有患者的結(jié)節(jié)均<1cm。將患者術(shù)后組織病理學(xué)檢查作為參照標(biāo)準(zhǔn)，探討患者接受甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢測(cè)、BRAF單基因檢測(cè)對(duì)于診斷甲狀腺微小乳頭狀癌的臨床價(jià)值。結(jié)果 細(xì)針穿刺檢測(cè)的診斷準(zhǔn)確率為88.75%，BRAF單基因檢測(cè)的診斷準(zhǔn)確率為92.50%，后者更高;二者聯(lián)合檢測(cè)，診斷準(zhǔn)確率則達(dá)到了98.75%，明顯高于兩種方法單獨(dú)檢測(cè)。結(jié)論 本研究使用的兩種甲狀腺微小乳頭狀癌診斷方法中，BRAF單基因檢測(cè)的診斷效果相對(duì)更好，能夠作為診斷此類(lèi)疾病的重要輔助診斷標(biāo)準(zhǔn)。為了確保較高的診斷準(zhǔn)確率，還可以聯(lián)合使用多種診斷方法。

關(guān)鍵詞：細(xì)針穿刺;BRAF單基因檢測(cè);甲狀腺微小乳頭狀癌;診斷價(jià)值

【中圖分類(lèi)號(hào)】R736.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1673-9026（2021）11-01

甲狀腺癌為發(fā)生率較高的內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤。其中甲狀腺微小乳頭狀癌在甲狀腺癌患者中占有較高的比重，確診患者人數(shù)也不斷增多。這主要與當(dāng)前比較先進(jìn)的影像學(xué)診斷技術(shù)有關(guān)。通過(guò)對(duì)患者實(shí)施高頻超聲檢查，能夠通過(guò)影像學(xué)征象判斷甲狀腺腫瘤的性質(zhì)。甲狀腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查安全可靠，但是受到操作者專(zhuān)業(yè)水平、取材質(zhì)量等因素的影響，會(huì)影響最終檢測(cè)結(jié)果[1]。隨著臨床研究的深入，發(fā)現(xiàn)BRAF基因檢測(cè)在該疾病的診斷中也有較高的價(jià)值。本文主要對(duì)比了細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢測(cè)、BRAF單基因檢測(cè)的臨床診斷價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料

將2020年3月至2021年3月在本院接受診斷和治療的80例（80枚結(jié)節(jié)）甲狀腺微小乳頭狀癌患者納入研究，結(jié)節(jié)直徑均<1cm。其中男性患者共計(jì)20例，女性患者60例，年齡范圍為20-73歲，均值為（46.22±6.78）歲。

1.2方法

所有患者均接受細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)、BRAF基因突變檢測(cè)，詳情如下：（1）細(xì)針穿刺檢測(cè)方法：讓患者仰臥在檢查床上，對(duì)操作位置的皮膚做好消毒鋪巾準(zhǔn)備之后，使用超聲儀進(jìn)行甲狀腺結(jié)節(jié)的探查，超聲引導(dǎo)下將25G針頭穿刺結(jié)節(jié)之后，在無(wú)負(fù)壓狀態(tài)下進(jìn)行10-15次的反復(fù)提插，然后用注射器針筒吸空氣到4-5ml刻度的位置，連接獲取標(biāo)本的針頭，通過(guò)推氣使標(biāo)本置于載玻片上，用95%乙醇進(jìn)行固定，實(shí)施HE染色。采取以上方法繼續(xù)將標(biāo)本置入盛有2ml生理鹽水的離心管，放置于冰箱4℃環(huán)境下[2]。細(xì)胞病理學(xué)醫(yī)生對(duì)涂片進(jìn)行鏡下觀察、判讀，若判讀結(jié)果為惡性腫瘤、可疑惡性腫瘤，認(rèn)定為細(xì)胞學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性，其余情況為陰性。（2）BRAF單基因檢測(cè)：將冰箱保存的細(xì)胞學(xué)標(biāo)本在3000轉(zhuǎn)速下進(jìn)行10min離心處理，將上清液去除?；驒z測(cè)采取突變擴(kuò)增阻滯系統(tǒng)法，試劑盒為人類(lèi)BRAF基因V600E突變檢測(cè)試劑盒，上游引物、下游引物分別為5-TCA TAA TGC TTG CTC TGA TAG GA3，5-GGC CAA AAA TTT AATCAG TGG A-3，通過(guò)常規(guī)反轉(zhuǎn)錄方法獲取cDNA。將混合液進(jìn)行解凍之后，和Taq酶、待測(cè)DNA樣品按照20∶0.25∶5進(jìn)行配置并混勻，然后將其放入到PCR儀擴(kuò)增。60℃狀態(tài)下進(jìn)行HEX信號(hào)、FAM信號(hào)的收集，若結(jié)果顯示Ct值<28，表示基因突變檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理工具使用SPSS18.0軟件，其中（）表示計(jì)量資料，檢驗(yàn)方式為t檢驗(yàn)，（%）表示計(jì)數(shù)資料，檢驗(yàn)方式為X2檢驗(yàn)，P<0.05代表組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

細(xì)針穿刺檢測(cè)的診斷準(zhǔn)確率為88.75%（71/80），BRAF單基因檢測(cè)為92.50%（74/80），二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。另外，二者聯(lián)合檢測(cè)準(zhǔn)確率為98.75%，顯著高于兩種方法單獨(dú)檢測(cè)（P<0.05）。

3討論

近年來(lái)報(bào)告的甲狀腺癌診斷病例不斷增多，而在這些新增的患者中，約有半數(shù)屬于甲狀腺微小乳頭狀癌。由于結(jié)節(jié)體積小，給臨床鑒別診斷帶來(lái)了一定難度。當(dāng)前的甲狀腺微小乳頭狀癌診斷措施中，超聲引導(dǎo)下的細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)檢查比較常用，這種方法的操作簡(jiǎn)便，且可以保障安全，在沒(méi)有其他干擾因素的情況下，檢測(cè)準(zhǔn)確率也較高。但是受到操作者、取材質(zhì)量等因素的影響，實(shí)際操作中可能會(huì)出現(xiàn)誤診現(xiàn)象。隨著臨床診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，基因檢測(cè)技術(shù)在臨床診斷中發(fā)揮了越來(lái)越重要的作用。本研究中，BRAF基因突變檢測(cè)比細(xì)針穿刺檢測(cè)的準(zhǔn)確率更高。而為了保證較高的準(zhǔn)確率，也可以二者聯(lián)合使用，以減少誤診率。

參考文獻(xiàn)：

[1]高秋霞，張國(guó)輝，李賢蘭，等. 超聲引導(dǎo)下細(xì)胞穿刺標(biāo)本BRAF～（V600E）基因檢測(cè)在甲狀腺乳頭狀癌診斷中的意義[J]. 中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志，2020，36（10）：879-882.

[2]鄭海紅，謝伯劍，朱優(yōu)優(yōu)，等. BRAF～（V600E）基因檢測(cè)在術(shù)前輔助細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)診斷甲狀腺微小乳頭狀癌中的意義[J]. 實(shí)用腫瘤雜志，2020，35（03）：228-230.

2017年省衛(wèi)計(jì)委科研課題：

BRAFV600E基因突變指導(dǎo)cN0甲狀腺乳頭狀微小癌中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)清掃的應(yīng)用研究 課題編號(hào)2017070

作者簡(jiǎn)介：王旭紅（1972-），男，2004年在山西省腫瘤醫(yī)院頭頸外科工作，1997年畢業(yè)于新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院，現(xiàn)任山西省腫瘤醫(yī)院頭頸科外科主任醫(yī)師。

通訊作者：趙宏彩，與第一作者為同一單位，現(xiàn)任山西省腫瘤醫(yī)院頭頸外科主任護(hù)師。